冰凍機采血小板融化后析出原因的分析及解決方法

麥義鋒

（丹東市中心血站成分科，遼寧 丹東 118002）

冰凍機采血小板融化后析出原因的分析及解決方法

麥義鋒

（丹東市中心血站成分科，遼寧 丹東 118002）

目的 通過冰凍機采血小板融化后析出的原因分析，找出對應的解決方法，降低冰凍機采血小板融化析出的報廢，提高冰凍機采血小板的使用效率，為患者搶救贏得時間。方法 分析對比我站2011年～2013年冰凍血小板在融化時的析出在制備、冰凍、儲存、解凍過程中各個環節與融化后析出的關系，并于2014年調整后的冰凍血小板數據對比。結果 冰凍儲存溫度控制在-75～-85 ℃；計算好冰凍血小板的加藥量；融化溫度在42 ℃，融化時間不超過10 min；加藥時間控制在10 min，并且加藥過程中不斷的混勻；控制每次冰凍血小板的數量；控制每次存放冰凍血小板的冰箱開啟的時間間隔等都能有效的降低冰凍血小板在融化時的析出問題。結論 通過編寫詳細有效的操作規程，并嚴格執行，控制好各個環節的關鍵控制點，可以大大降低冰凍血小板在融化時析出報廢或完全控制無析出報廢現象，提高冰凍機采血小板的使用效率，為患者搶救贏得時間。

冰凍血小板；融化析出；質量控制；解決方法

新鮮的血小板在（22±2） ℃的環境中能保存5 d，因臨床患者需求的不同，會導致一部分新鮮血小板的過期浪費，因此深低溫（-80 ℃）[1]冰凍保存，能保證血小板保存1年，避免了新鮮血小板的過期浪費，又能在患者需要搶救時，及時的通過冰凍血小板的融化來滿足供應。我站開展冰凍血小板項目較晚，在實際工作中發現有融化后冰凍血小板的析出現象，造成冰凍血小板的浪費，影響了臨床供應。經過幾年的分析研究，發現了冰凍血小板融化析出的問題所在，找出了質量的關鍵控制點，有效解決析出問題，現經驗總結如下。

1　一般資料

1.1儀器和試劑：Amicus血細胞分離機（美國百特），-80 ℃超低溫冷凍冰箱（三洋），奧斯邦ph900血小板保存箱（美國），細胞專用搖床（廣東新普），二甲基亞砜DMSO（美國），一次20 mL針管（山東威高），一次性加藥件（四川南格爾），PH-IA恒溫循環解凍箱（山東普華）。

1.2血小板篩選：血小板供者符合國家規定《獻血者健康檢查標準》（GB-18467-2011），血小板質量符合國家規定《全血及成分血要求》（GB-18469-2012）。

2　方法與結果

2.12011年～2014年血小板冰凍數量及報廢原因，見表1。

表1　2011年～2014年血小板冰凍數量及報廢原因

2.2逐項析出原因分析及解決方法

2.2.1加藥量計算錯誤：從表1數據分析，加藥量計算錯誤發生較少，也是完全可以避免的，由于工作人員的粗心，稱重和計算時發生錯誤，未達到要求的DMSO濃度5%左右，沒有起到抑制冰晶形成的作用，從而在融化冰凍血小板時析出。解決方法：從稱重到計算藥量開始由2名工作人員負責，1人具體操作，1人復核，完全可以避免計算藥量和加藥時的錯誤。

2.2.2加藥速度過快和未混勻：從表1數據分析，該錯誤呈逐年下降趨勢，主要原因是工作人員在開始冰凍血小板操作不熟練，責任心不強沒有控制加藥速度，加藥時間掌握不好，加藥前后血袋內氣體沒有排凈，還有就是在加藥過程中細胞專用搖床轉速錯誤。解決方法：對操作人員落實責任，加強操作技巧和手法的培訓，因在加入DMSO過程中，水合作用會釋放大量熱能，致血漿蛋白和血小板膜蛋白變性。所以必須控制加藥速度在1 mL/min左右，加藥時間在10 min左右，加藥時在細胞專用搖床上操作，轉數在100～120轉/分，通過充分的混勻和稀釋藥液來降低加藥時產生的熱量。加藥前后，盡量排盡袋內空氣，加藥時的振蕩會使殘余的空氣形成大量氣泡，氣泡破裂產生碎片易激活凝血系統，導致血小板聚集而析出。

2.2.3冰凍溫度不足：從表1數據分析，該項原因導致的析出報廢最多，原因主要是冰箱的溫度沒有達到-75～85 ℃，未能在最短時間內固化血小板。因水分子在不同低溫條件下改變分子排列，使結晶體發生變化，還可能造成對細胞膜和細胞質的破壞，導致血小板溶化后析出[2]。另外儲存溫度波動范圍較大，血小板內冰晶反復形成，對血小板可造成機械性損傷，又因細胞內外滲透壓的迅速變化也可造成血小板胞膜化學損傷，導致融化后析出[3]。

導致冰箱溫度不足的原因：①在我站開始冰凍血小板時的冰箱最低溫度為-65 ℃，未達到冰凍血小板的溫度要求。②一次冰凍血小板的數量過多（≥3袋），冰箱的溫度波動范圍較大，未能短時間固化血小板。經過多次實踐1次冰凍2袋，冰箱溫度波動變化不大，冰箱制冷溫度控制較好（受冰箱的制冷能力控制）。③開啟冰箱門過頻，導致溫度變化波動過大。④放入冰箱的血小板重疊存放，導致局部溫度達不到冰凍要求。解決方法：必須保證冰箱的有效制冷溫度在（80± 5） ℃；同一時間最多冰凍血小板數量2袋；每次開門間隔時間最少1 h或冰箱溫度達到-80 ℃以下；存放冰凍血小板時平整放入包裝盒內，單袋擺平，不可重疊。定期對低溫冰箱進行除霜，保證冰凍溫度，化霜期間應將冰凍血小板放入另一臺-80 ℃冰箱中，不應放入溫度過高的冰箱中。

2.3.4融化溫度、時間錯誤：從表1數據分析，該項原因導致的報廢也可以避免，發生的次數也少，主要是工作人員不認真操作，沒有查看水浴箱的溫度和解凍時間。解決方法：落實工作責任制，加強工作人員的責任心，配備專用的PH-IA恒溫循環解凍箱解凍血小板，從冰箱取出冰凍血小板迅速放入水浴箱中，水要浸沒血小板保存袋，溫度設置為42 ℃，時間10 min，自動振蕩。融化好的血小板要保存在奧斯邦ph900血小板保存箱，溫度設定在（22±2） ℃。

2.3.5原因不詳：僅在2012年發生，同一獻血者的血小板分別3次冰凍融化后均析出（冰凍操作人員和融化操作人員均不同），經追溯分析并沒發現差錯和不符合操作規程的環節，冰凍溫度控制到位，融化溫度控制到位，融化設備正常。又通過獻血檔案查詢該獻血者捐獻血小板30多單位，獻血者符合《獻血者健康檢查標準》，采集過程正常，捐獻的血小板質量符合國家規定《全血及成分血要求》。該獻血者的血小板冰凍反復析出，具體原因不詳，暫無頻繁捐獻血小板冰凍析出資料文獻報道，有待進一步研究分析析出原因。解決方法：避免該獻血者捐獻的血小板再次冰凍。

2.3.6融化后運輸問題：從表1數據分析，該項原因導致的報廢完全可以避免，僅在2011年和2012年發生，因臨床工作人員未認真聽取我站血庫人員的告知，導致運輸過程中的溫度未控制在（22±2） ℃，最終到達床頭時發生血小板析出而報廢。解決方法：血庫工作人員認真詳細告知取血人員冰凍血小板注意事項，配備專用的血小板運輸箱。血站有義務對臨床用血單位工作人員進行血液和血小板相關知識的培訓和指導。

2.4結果：經過幾年的摸索和總結經驗，我站在冰凍血小板工作上取得很大的進步，從表1的數據分析可以看出，2014年8月以前實現冰凍血小板融化析出零報廢。

3　討 論

在冰凍血小板的操作中，加強工作人員的責任心，做好上崗前的培訓和操作注意事項的講解，嚴格控制各個環節的關鍵控制點，按照操作規程認真操作，完全可以降低冰凍血小板的析出報廢問題。避免寶貴的血液資源浪費，為患者搶救贏得時間。

[1] 郭美媛,彭光平,肖萍.吉安市冰凍血小板臨床應用情況[J].中國輸血雜志,2009,22(5):409.

[2] 張玉芬.溫度波動引起冰凍血小板融化后出現絮狀物58例分析[J].醫學理論與實踐,2009,22(3):333-334.

[3] 劉景漢,歐陽錫林,呂留彩,等.低溫保存血小板胞內冰晶形成溫度測定[J].中國實驗血液學雜志,2002,10(6):574.

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1671-8194（2015）33-0292-02