慢性皮質(zhì)酮注射對(duì)小鼠抑郁樣行為及腦糖原水平的影響*

張繪宇， 趙玉男， 王中立

抑郁癥(depression)是一種以顯著而持久的心境低落為主要臨床表現(xiàn)的情感障礙性疾病，其發(fā)病率隨著人們生活水平的提高、工作生活壓力的增加呈逐年上升趨勢(shì)。到2020年可能成為僅次于心臟病的第2大疾患。大量的臨床資料顯示當(dāng)機(jī)體受到長(zhǎng)期強(qiáng)烈身心應(yīng)激刺激時(shí)，神經(jīng)內(nèi)分泌活動(dòng)增強(qiáng)，表現(xiàn)為下丘腦-垂體-腎上腺(hypothalamus-pituitary bodyadrenal gland，HPA)軸的功能亢進(jìn)，糖皮質(zhì)激素水平急劇升高。抑郁癥患者皮質(zhì)醇水平增高，使患者產(chǎn)生認(rèn)知功能障礙和情感障礙［1］。在嚙齒類動(dòng)物，長(zhǎng)期皮下注射皮質(zhì)酮(corticosterone，CORT)可誘導(dǎo)出抑郁樣行為［2］，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)可塑性指標(biāo)突觸素(synaptophysin，SYP)表達(dá)下調(diào)［3］，海馬 CA3 區(qū)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)降低［4］，導(dǎo)致神經(jīng)元功能障礙［5］。這可能是長(zhǎng)期CORT注射誘導(dǎo)了抑郁樣行為。然而，神經(jīng)元功能障礙的機(jī)制尚不清楚。

目前的研究結(jié)果表明，神經(jīng)元的活動(dòng)所需能量依賴于腦糖原。腦糖原是非常重要的腦能量?jī)?chǔ)備。腦糖原不僅為星形膠質(zhì)細(xì)胞的生存和功能提供了物質(zhì)基礎(chǔ)，還為神經(jīng)元的活動(dòng)和生存提供能量［6］，腦糖原是神經(jīng)元活動(dòng)的主要能量來(lái)源。因此腦糖原代謝異常可能是應(yīng)激致海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)可塑性損傷的早期重要環(huán)節(jié)。為了進(jìn)一步闡明抑郁樣行為的發(fā)病機(jī)制，本研究采用慢性應(yīng)激抑郁模型，從而探討慢性皮質(zhì)酮注射對(duì)腦糖原水平的影響。

材料和方法

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、藥品與試劑

健康成年雄性ICR級(jí)C57BL/6N小鼠，體重在18～20 g之間，購(gòu)于揚(yáng)州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心，許可證號(hào)為SCXK(蘇)2012-0004。飼養(yǎng)于南京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，飼養(yǎng)溫度為(25±1)℃，標(biāo)準(zhǔn)的12 h等分動(dòng)物房(光照從早上6 h到下午6 h)，動(dòng)物可以自由飲食進(jìn)水。被用于實(shí)驗(yàn)和其它科學(xué)用途的脊椎動(dòng)物根據(jù)中國(guó)動(dòng)物保護(hù)公約制定飼養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)操作規(guī)則，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)遵守國(guó)際實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理學(xué)要求。

皮質(zhì)酮、淀粉葡萄糖苷酶、己糖激酶、尿嘧啶核苷二磷酸葡萄糖、6-磷酸葡萄糖、磷酸烯醇式丙酮酸、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸、1，6-二磷酸葡萄糖、腺嘌呤核糖核苷酸、葡萄糖磷酸變位酶、丙酮酸激酶均購(gòu)自Sigma;腺嘌呤核苷三磷酸和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶購(gòu)自Solarbio;乳酸脫氫酶購(gòu)自 Generay;β-actin和SYP單克隆抗體、BDNF多克隆抗體購(gòu)自Abcam;HRP標(biāo)記的山羊抗小鼠IgG及山羊抗兔IgG購(gòu)自Gene Script;其它試劑均為分析純，購(gòu)自南京化學(xué)試劑公司。

2 方法

2.1 CORT注射誘導(dǎo)小鼠慢性應(yīng)激性抑郁模型 40只C57BL/6N小鼠均為雄性，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，自由進(jìn)食飲水。動(dòng)物隨機(jī)分為2組，每組10只，稱重。根據(jù)文獻(xiàn)［2］給予小鼠皮下注射CORT，制備慢性應(yīng)激性抑郁模型。模型組按20 mg·kg－1·d－1劑量給予皮下注射CORT混懸液(混懸液濃度為2 g/L)，對(duì)照組每天皮下注射相同劑量的溶劑，連續(xù)注射4周后稱量體重，進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試。最后抽血檢測(cè)CORT并行Western blot、糖原及其酶的含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)。

2.2 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn) 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(forced swim test，F(xiàn)ST)采用上海吉量軟件科技有限公司的JLBehv-FSG-4型小鼠強(qiáng)迫游泳測(cè)試分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試，將小鼠分別放入加有15 cm水深的5 000 mL的大燒杯中(水溫25℃)，使小鼠強(qiáng)迫游泳6 min，計(jì)算機(jī)自動(dòng)記錄小鼠在實(shí)驗(yàn)后4 min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)時(shí)間。不動(dòng)時(shí)間被界定為沒(méi)有主動(dòng)逃脫行為，比如游泳、跳躍、躬起身體、探查和水下動(dòng)作等。每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后更換器皿內(nèi)的水以保持水的清潔，去除動(dòng)物糞便及氣味的干擾。

2.3 小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn) 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)(open field test，OFT)采用上海吉量軟件科技有限公司的DigBehv動(dòng)物行為分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)試，將小鼠分別放入一個(gè)底部為直徑30 cm、高40 cm的開(kāi)放場(chǎng)區(qū)域內(nèi)的底面中心，使用攝像機(jī)進(jìn)行記錄隨后6 min內(nèi)的小鼠自主活動(dòng)情況，包括運(yùn)動(dòng)總路程、自主活動(dòng)次數(shù)。每只小鼠測(cè)試結(jié)束后對(duì)箱底進(jìn)行清潔，去除動(dòng)物糞便及氣味的干擾。

2.4 血清CORT的測(cè)定 1%戊巴比妥鈉深度麻醉小鼠，采用心臟穿刺取血約0.8 mL，靜止30 min后以3 000 r/min離心15 min，收集血清備用。采用定量競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清CORT。在96孔板中先預(yù)涂多克隆CORT特異性抗體，分別加入標(biāo)準(zhǔn)的血清樣品25 μL和25 μL生物素標(biāo)記的CORT孵育2 h，沖洗后加入鏈霉親和素-過(guò)氧化物酶50 μL孵育30 min，顯色后采用波長(zhǎng)450 nm的酶標(biāo)儀進(jìn)行讀板。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)血清和樣本均取3個(gè)復(fù)孔的平均值進(jìn)行計(jì)算，樣品濃度根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)得。

2.5 Western blot實(shí)驗(yàn) 取海馬組織100 mg加1 mL的組織裂解緩沖液，冰浴勻漿至組織完全裂解，10 000 r/min離心3 min，收集離心上清液。在95℃水浴中變性5 min。分裝放置－20℃?zhèn)溆谩Ｖ苽浜秒娪灸z后用微量加樣器將樣品加入各個(gè)泳道，經(jīng)10%SDS-PAGE分離，濕轉(zhuǎn)法將膠上的蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。將膜漂洗后浸于含5% 脫脂奶粉的25 mL PBST緩沖液中，37℃輕搖1 h以封閉膜上的非特異結(jié)合。浸入 PBST稀釋的 I抗［β-actin(1∶1 000)、SYP(1∶500)、BDNF(1∶200)］4 ℃ 靜置過(guò)夜。漂洗后加入HRP標(biāo)記的PBST稀釋的 II抗(1∶2 000)以結(jié)合I抗室溫孵育1 h。采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行曝光、顯影，將膠片上目的條帶掃描進(jìn)電腦，用Bandscan軟件進(jìn)行灰度分析，以各樣本灰度值與內(nèi)參照β-actin灰度值的比值作為所測(cè)樣品中目的蛋白相對(duì)含量。

2.6 腦糖原測(cè)定 腦糖原檢測(cè)采用Kong等［7］報(bào)道的方法，將小鼠投入液氮中處死，取出后迅速剝離大腦，于液氮中把海馬組織研磨成粉后，用6%高氯酸勻漿滅活各代謝酶的活性。取適量勻漿液用2×104U/L淀粉葡萄糖苷酶10 μL室溫消化16 h，使糖原徹底分解成葡萄糖。加入6%高氯酸終止反應(yīng)離心取上清，用3 mol/L KOH溶液調(diào)節(jié)pH值，使pH=7。在96孔加樣板中加入200 μL的反應(yīng)體系，以355 nm激發(fā)、480 nm發(fā)射、420 nm的截止波長(zhǎng)，采用螢光酶法測(cè)定葡萄糖的含量。加入0.3 U己糖激酶50 μL讀取總數(shù)值。同時(shí)，按上述操作不加淀粉葡萄糖苷酶，測(cè)出組織中所含的內(nèi)源性葡糖糖量，用總葡萄糖含量減去內(nèi)源性葡萄糖的含量，即為糖原分解所得到的葡萄糖。基于這個(gè)數(shù)值，從糖原含量測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可計(jì)算得出組織中糖原的含量。

2.7 糖原合酶檢測(cè) 在海馬組織中加入預(yù)冷勻漿液5 mL/g，在冰上徹底勻漿備用。在20 μL樣品中加入尿苷二磷酸葡萄糖反應(yīng)液50 μL，38℃水浴60 min。取出后加入10 μL反應(yīng)終止液，室溫下放置30 min。加入l mL尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸反應(yīng)液室溫放置20 min后，以激發(fā)光340 nm、發(fā)射光460 nm測(cè)定熒光吸光值。同時(shí)，按上述操作不加2 mmol/L尿苷二磷酸葡萄糖和5 mmol/L 6-磷酸葡萄糖測(cè)出組織空白值，再用總糖原合酶熒光值減去組織空白熒光值，最終在尿苷二磷酸標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出對(duì)應(yīng)值。

2.8 糖原磷酸化酶檢測(cè) 在180 μL30℃和pH=6.8的磷酸鹽緩沖液中加入20 μL樣本勻漿液。加入2 g/L的糖原開(kāi)始反應(yīng)。糖原被糖原磷酸化酶分解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸，再經(jīng)磷酸葡萄糖變位酶作用生成葡萄糖-6-磷酸，在葡萄糖-6-磷酸脫氫酶反應(yīng)體系中，我們可通過(guò)測(cè)定 NADP(低吸收峰)轉(zhuǎn)化為NADPH(高吸收峰)，即在340 nm波長(zhǎng)處所產(chǎn)生的吸光值的變化，來(lái)定量分析糖原磷酸化酶的特異活性。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，各組間數(shù)據(jù)差異用t檢驗(yàn)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 體重及行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果

小鼠皮下注射CORT，4周后模型組的體重顯著低于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出不動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)，出現(xiàn)抑郁樣行為特征。模型組小鼠強(qiáng)迫游泳的靜止時(shí)間較正常組明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)。在曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)動(dòng)物的自發(fā)活動(dòng)明顯減少，出現(xiàn)抑郁樣行為特征。模型組小鼠運(yùn)動(dòng)的總路程減少、活動(dòng)次數(shù)明顯下降(P＜0.01)，見(jiàn)表 1。

表1 模型組與正常組小鼠體重及行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果Table 1.The weight and behavior of mice in control and CORT group(Mean±SD.n=20)

2 皮質(zhì)酮檢測(cè)結(jié)果

實(shí)驗(yàn)進(jìn)行4周后，與正常組小鼠相比，模型組小鼠血清的CORT水平顯著升高(P＜0.01)，見(jiàn)圖1。

Figure 1.Serum corticosterone levels in control and CORT-injected mice.Mean ±SD.n=10.＊＊P ＜0.01 vs control.圖1 正常組與模型組血清皮質(zhì)酮濃度的比較

3 神經(jīng)元標(biāo)志性蛋白含量的變化

模型組的SYP和BDNF蛋白條帶密度顯著下降，與正常組相比，模型組小鼠海馬組織內(nèi)的2種蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)(P＜0.01)，見(jiàn)圖2。

4 腦糖原及其相關(guān)酶含量的變化

小鼠皮下注射CORT 4周后，型組與正常對(duì)照組相比，腦糖原和腦糖原合酶含量明顯降低(P＜0.05)。但模型組腦糖原磷酸化酶含量高于正常對(duì)照組(P ＜0.05)，見(jiàn)圖3。

討 論

Figure 2.The effects of CORT injection on the protein levels of SYP and BDNF in the mouse hippocampal tissues.Mean±SD.n=10.＊＊P ＜0.01 vs control.圖2 CORT注射對(duì)小鼠海馬組織內(nèi)SYP和BDNF蛋白表達(dá)的影響

Figure 3.The effects of CORT injection on the levels of brain glycogen，glycogen synthase and glycogen phosphorylase in the mouse hippocampal tissues.Mean±SD.n=10.*P ＜0.05 vs control.圖3 CORT注射對(duì)小鼠海馬組織糖原、糖原合酶和糖原磷酸化酶含量的影響

本實(shí)驗(yàn)根據(jù)前期研究成果［2］連續(xù)4周小鼠皮下注射CORT后，采用計(jì)算機(jī)圖像實(shí)時(shí)分析檢測(cè)系統(tǒng)，動(dòng)態(tài)分析動(dòng)物的活動(dòng)軌跡。慢性應(yīng)激組小鼠食欲減退，體重降低。在強(qiáng)迫游泳和曠場(chǎng)2個(gè)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中，小鼠靜止不動(dòng)的時(shí)間明顯延長(zhǎng)，小鼠自主活動(dòng)能力降低，反映小鼠的自主活動(dòng)能力降低、情緒低落、興趣喪失、絕望狀態(tài)、認(rèn)知和記憶能力減退，與抑郁癥患者出現(xiàn)的情緒低落和易疲勞等癥狀相似。以上結(jié)果證明慢性皮質(zhì)酮注射成功誘導(dǎo)小鼠抑郁樣行為。在嚙齒類動(dòng)物重復(fù)注射CORT已經(jīng)被認(rèn)為是一個(gè)可靠的研究慢性應(yīng)激性抑郁障礙的動(dòng)物模型［8］。

Figure 4.A model for energy substrate supply pathways of the neuron.圖4 神經(jīng)元的能量底物供給途徑模型

SPY是位于突觸前膜囊泡上與突觸結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān)的鈣結(jié)合膜蛋白，參與突觸小泡膜與突觸前膜的融合和神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，還參與了神經(jīng)元間信息傳遞。因此突觸素既是突觸發(fā)生的標(biāo)志，又是突觸傳遞效能的反映，其定量和定性分布可以準(zhǔn)確反映突觸的分布與密度［9］。Yau 等［10］發(fā)現(xiàn)，皮質(zhì)酮可以抑制神經(jīng)系統(tǒng)的形成，從而降低海馬樹(shù)突棘密度而引起空間學(xué)習(xí)障礙。本研究的數(shù)據(jù)表明，長(zhǎng)期注射CORT，神經(jīng)系統(tǒng)突觸發(fā)生和成熟標(biāo)志性蛋白SYP的水平均明顯下降。提示CORT升高影響突觸的形成與成熟，突觸數(shù)目的減少與功能降低將影響神經(jīng)系統(tǒng)的信息傳遞。

星形膠質(zhì)細(xì)胞合成和釋放多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，對(duì)神經(jīng)元功能的維持至關(guān)重要，而其中最多的是BDNF。BDNF基因位于11q13，主要促進(jìn)海馬齒狀回神經(jīng)干細(xì)胞生長(zhǎng)、分化，維持神經(jīng)元生存，參與調(diào)控海馬神經(jīng)重塑，拮抗神經(jīng)元受損，并與長(zhǎng)時(shí)程學(xué)習(xí)、記憶功能有關(guān)［11］。臨床尸檢研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者腦組織中BDNF水平顯著降低，抗抑郁劑治療后患者抑郁癥狀緩解，血清BDNF水平可恢復(fù)正常［12］，且經(jīng)過(guò)抗抑郁治療的患者腦組織中BDNF也恢復(fù)正常。BDNF下調(diào)可能降低神經(jīng)元可塑性而促進(jìn)神經(jīng)元死亡。有研究表明［13］，長(zhǎng)期注射皮質(zhì)酮或慢性應(yīng)激能降低大鼠海馬BDNF表達(dá)，并且海馬區(qū)和前額區(qū)BDNF的mRNA水平下降，從而影響海馬結(jié)構(gòu)可塑性，誘導(dǎo)了抑郁樣行為，并且敲除動(dòng)物齒狀回BDNF基因使其抑郁樣行為增加。Yu等［14］的研究表明，BDNF已被證明能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)元的形態(tài)，慢性應(yīng)激降低腦組織BDNF水平，使神經(jīng)樹(shù)突棘密度降低從而誘導(dǎo)了抑郁樣行為。近年來(lái)，動(dòng)物模型和臨床研究均提示，海馬腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子BDNF缺乏可能與抑郁發(fā)生密切相關(guān)。我們的研究驗(yàn)證了這一結(jié)論，長(zhǎng)期注射CORT損傷海馬神經(jīng)元結(jié)構(gòu)，下調(diào)小鼠海馬的BDNF表達(dá)，小鼠出現(xiàn)抑郁樣行為。

糖原由葡萄糖單位組成的具有高度分支結(jié)構(gòu)的大分子多糖，是人和動(dòng)物體內(nèi)主要的葡萄糖儲(chǔ)存形式。當(dāng)機(jī)體需能增加而葡萄糖減少時(shí)，糖原可以迅速分解為葡萄糖或生成乳酸，為機(jī)體提供能量。腦糖原是非常重要的腦能量?jī)?chǔ)備，幾乎全部?jī)?chǔ)存在星形膠質(zhì)細(xì)胞中［15］，是神經(jīng)元活動(dòng)的主要能量來(lái)源。腦糖原不均勻地分布在整個(gè)大腦，電子顯微鏡的研究表明，腦糖原集中的區(qū)域也是突觸密度最高的腦區(qū)，也許這意味著在突觸傳遞的能量依賴性［16］。由于神經(jīng)元對(duì)能量危機(jī)非常敏感，而神經(jīng)元的能量?jī)?chǔ)存又很有限，因此，糖原能量是正常神經(jīng)元的功能和生存的關(guān)鍵。神經(jīng)元的神經(jīng)能量底物有2個(gè)主要來(lái)源，一是血液循環(huán)中的葡萄糖直接供給，葡萄糖進(jìn)入神經(jīng)元后發(fā)生氧化代謝。除了葡萄糖直接進(jìn)入神經(jīng)元外，第2個(gè)來(lái)源是葡萄糖首先進(jìn)入星形膠質(zhì)細(xì)胞，并以糖原的形式儲(chǔ)存起來(lái)，當(dāng)神經(jīng)元活動(dòng)增加需要能量時(shí)，糖原可迅速分解代謝成乳酸，作為能量底物轉(zhuǎn)運(yùn)給神經(jīng)元［17］(圖4)。神經(jīng)元的活性依賴于乳酸，為高效能的突觸傳遞提供能量需求。研究表明［18］在海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞中糖原源性乳酸也是神經(jīng)元空間工作記憶的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。因此，當(dāng)神經(jīng)元需求能量增加時(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞存儲(chǔ)的糖原提供了一個(gè)充足的能量?jī)?chǔ)備。

因?yàn)槟X糖原是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最大的能源儲(chǔ)備，星形膠質(zhì)細(xì)胞的糖原含量的變化可能會(huì)顯著影響大腦的能量代謝。糖原水平的減少會(huì)直接影響星形膠質(zhì)細(xì)胞的代謝和功能。星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元起到重要的營(yíng)養(yǎng)作用。因此，星形膠質(zhì)細(xì)胞本身的變化也會(huì)直接影響神經(jīng)元的代謝和功能。如果星形膠質(zhì)細(xì)胞不能及時(shí)為大腦提供糖原能量，將導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞的萎縮和死亡。一旦中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的糖原含量減少，神經(jīng)遞質(zhì)和動(dòng)作電位也會(huì)立即受到嚴(yán)重影響。因此，腦糖原的缺乏可以直接影響星形膠質(zhì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致星形膠質(zhì)細(xì)胞萎縮，從而又會(huì)進(jìn)一步加重神經(jīng)元的能源危機(jī)，增加細(xì)胞凋亡的風(fēng)險(xiǎn)，減少神經(jīng)元的興奮性，誘導(dǎo)抑郁樣行為。糖皮質(zhì)激素可以直接影響星形膠質(zhì)細(xì)胞的糖原代謝，糖皮質(zhì)激素顯著降低的時(shí)候，可促進(jìn)糖原合成。體外培養(yǎng)大鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞的研究表明，皮質(zhì)酮可以顯著降低星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)糖原含量［19］。在以往的研究中發(fā)現(xiàn)，束縛應(yīng)激導(dǎo)致小鼠糖代謝紊亂，糖原含量降低［20］。我們的研究表明，與對(duì)照組相比小鼠長(zhǎng)期注射CORT，海馬糖原含量顯著降低，從而降低了神經(jīng)元的興奮性，誘導(dǎo)了小鼠的抑郁樣行為。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和組織細(xì)胞培養(yǎng)表明，糖原受多因素影響，包括葡萄糖、胰島素、神經(jīng)遞質(zhì)以及神經(jīng)元的激活等。腦糖原合成與降解受2個(gè)關(guān)鍵酶的調(diào)節(jié)，分別為糖原合酶和糖原磷酸化酶。葡萄糖合成糖原取決于糖原合酶和糖原分支酶的活性;降解發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)中，通過(guò)糖原磷酸化酶和分支酶的作用。在我們的研究中，我們發(fā)現(xiàn)慢性注射皮質(zhì)酮增加糖原磷酸化酶的活性，表明增加糖原分解。并且慢性注射皮質(zhì)酮降低糖原合酶活性，使糖原合成減少，結(jié)果使糖原含量下降。糖皮質(zhì)激素可抑制葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)到神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞，減少糖原合成。因此，慢性應(yīng)激可能是通過(guò)增加下丘腦-垂體-腎上腺活動(dòng)的情況下調(diào)星形膠質(zhì)細(xì)胞的糖原儲(chǔ)存。海馬糖原水平的降低是因?yàn)樘窃厦傅臏p少以及糖原磷酸化酶的增加。高濃度的糖皮質(zhì)激素作用于星形膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)損害糖原的補(bǔ)充，消耗的能量?jī)?chǔ)備，減少乳酸運(yùn)輸，減少能量的供給，這將引起神經(jīng)元的功能障礙，從而引起抑郁樣行為。

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