聶守民 邢佳欣 趙瑞君** 程璟俠 劉娟娟
(1.山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,寄生蟲教研室,太原 030001;2.山西省疾病預(yù)防控制中心病媒生物防控科,太原 030001)
家蠅幼蟲抗菌肽能有效殺傷腫瘤細(xì)胞而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒害作用的優(yōu)勢(shì)是當(dāng)前研究的一大熱點(diǎn)。隨著對(duì)家蠅幼蟲抗菌肽抗腫瘤細(xì)胞譜的認(rèn)識(shí),它的作用機(jī)制越來(lái)越受到人們的關(guān)注。目前報(bào)道的作用機(jī)制主要有細(xì)胞膜機(jī)制、線粒體機(jī)制、細(xì)胞骨架機(jī)制和細(xì)胞周期機(jī)制(包永芬等,2011)。
FBL-3細(xì)胞為紅白血病細(xì)胞,在體外條件下經(jīng)多次傳代培養(yǎng)之后,細(xì)胞特性會(huì)發(fā)生明顯改變,細(xì)胞毒力降低,對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性造成了干擾(吳遠(yuǎn)彬等,2010)。所以需要通過(guò)構(gòu)建小鼠模型來(lái)獲取更接近體內(nèi)生物學(xué)特性的原代FBL-3細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),大大提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可應(yīng)用性。我們前期研究發(fā)現(xiàn)家蠅幼蟲抗菌肽粗提物對(duì)紅白細(xì)胞病FBL-3腫瘤細(xì)胞具有抑制作用,但未對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行研究,本文模擬體內(nèi)生物學(xué)特性,現(xiàn)以原代FBL-3腫瘤細(xì)胞為對(duì)象,探究家蠅幼蟲抗菌肽粗提物對(duì)其細(xì)胞增殖周期的影響,為家蠅幼蟲抗菌肽的功能研究和臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1.1.1細(xì)胞株:FBL-3細(xì)胞,本實(shí)驗(yàn)室常規(guī)傳代培養(yǎng),-80℃冰箱保存。
1.1.2三齡家蠅幼蟲:在山西省疾病預(yù)防控制中心蟲媒科的養(yǎng)蠅室內(nèi)進(jìn)行飼養(yǎng),為多代培養(yǎng)的純種品系。飼養(yǎng)條件:室溫20~30℃,相對(duì)濕度控制在55%左右。
1.1.3C57BL/6小鼠:北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。
1.1.4主要試劑:RPMI-1640培養(yǎng)基(北京賽默……