聚丙烯酰胺水凝膠注射隆胸術后局部組織中VEGF的變化

高 翔 蔣文杰 孫一凡 路 瑋

（1 內蒙古醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院整形外科，內蒙 包頭 014010；2 中國醫(yī)學科學院整形外科醫(yī)院，北京 010033）

聚丙烯酰胺水凝膠（polyacrylamide hydrogel，PAHG）曾一度被視為良好的組織填充物，由于其操作簡單、不開刀、無手術瘢痕、痛苦少，被廣泛地應用于整形美容外科領域，特別在隆乳術中得到了大量的應用。但是隨著時間的推移，出現(xiàn)了大量并發(fā)癥[1]。2006年國家食品藥品監(jiān)督管理局停止了其生產和使用。現(xiàn)雖已全面禁止使用，但對于注射物不能取凈仍有少量遺留體內的患者及目前無任何不良反應的人群，其長期滯留體內對人體有無傷害尚不清楚。我們采用實時定量PCR方法通過對聚丙烯酰胺水凝膠注射隆胸術后乳腺組織和巨乳、外傷后等乳腺組織VEGF的含量檢測對比觀察，旨在了解其分布及相互關系，為其預后及臨床治療提供基礎理論依據(jù)。

1.材料與方法

1.1 取材：來自我院就診的聚丙烯酰胺水凝膠隆胸術后行聚丙烯酰胺水凝膠取出術的患者采集乳腺組織9例，并作為研究組；對巨乳、乳房外傷等患者乳腺組織采集9例作為對照組：其中2例為巨乳乳腺組織；2例為外傷后予以清創(chuàng)術提取的乳腺組織；1例為自體脂肪組織隆乳術后提取的乳腺組織；1例為乳房纖維瘤患者，術中取腫物邊緣1 cm外的乳腺組織；2例從乳房燒傷后瘢痕患者提取的乳腺組織；1例為硅凝膠假體隆乳術后包膜攣縮患者提取的乳腺組織。年齡為26～42歲，平均年齡34.3歲。將取出的組織標本在-80 ℃低溫冰箱凍存。

1.2 方法：采用實時定量PCR方法對血管內皮生長因子（VEGF）mRNA含量進行檢測，最后用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件進行數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計學處理。應用t檢驗進行統(tǒng)計學處理分析。

2 結 果

根據(jù)繪制的梯度稀釋DNA標準曲線，獲得各樣品VEGF基因和GAPDH管家基因的濃度結果，并計算出VEGF mRNA在組織中的含量。見圖1。

圖1

實驗組與對照組經(jīng)t檢驗，P＞0.05，無統(tǒng)計學差異。研究組中有1例患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，但是體溫正常，血常規(guī)檢查正常，雖然細菌培養(yǎng)未能明確結果，但是仍然考慮為局部炎性反應所致。其組織標本中VEGF mRNA的含量為7.82?10-3，高于其他樣品。由于研究組的9例中僅有1例出現(xiàn)這種現(xiàn)象，而且該患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，因此，不能單純考慮為PAHG注射所致。

3 討 論

聚丙烯酰胺水凝膠是一種水溶性聚合物，由丙烯酰胺單體聚合而成。其單體丙烯酰胺具有細胞毒性和神經(jīng)毒性及可能的生殖毒性、致癌性，聚丙烯酰胺水凝膠置入體后與體液及各種酶相接觸，可能會在體內發(fā)生降解反應，使部分小分子單體從聚合物中溶出，另外其在聚合、交聯(lián)等生產過程中也不可避免地存在丙烯酰胺單體的殘留物[2-3]。目前對PAHG植入人或動物體內是否具有毒性的認識尚不充分，國內外的學者針對其毒性進行了一些基礎研究，魯開化等[4]的研究發(fā)現(xiàn)，在人體內環(huán)境中，4 年以內無丙稀酰胺單體含量的增加。Wan[5]等在對聚丙烯酰胺水凝膠的穩(wěn)定性以及單體含量研究中指出，PAHG在H2O2作用下可以完全降解為丙烯酰胺單體，氧化降解可能是PAHG的主要反應。麥慧等[6]在PASH對SD大鼠的肝腎及背闊肌組織實驗中均能產生細胞變性。而Lise等[7]隨訪了27例行PAHG注射隆胸8年以上的患者，認為PAHG在乳房內性質穩(wěn)定。但是，在喬群等[8]的研究中發(fā)現(xiàn)，PHAG在體內會引起多核巨細胞及淋巴細胞增生，并在其周圍形成肉芽腫樣組織。余敏等[10]也認為PAHG在人體內會導致局部產生不同程度的免疫應答反應。

由于其在人體內將長期存在幾年甚至數(shù)十年，故若存在長期安全性問題，后果非常嚴重，不僅給使用者（大多為健康女性）帶來身體上的痛苦，還可因為其使用部位的特殊性而造成巨大的心理創(chuàng)傷。另外，值得注意的是目前尚有一部分沒有出現(xiàn)并發(fā)癥的人群，因為心理恐懼、負擔重等原因強烈要求取出注射物，在本研究組中就有2例患者屬于該情況。因此有必要對聚丙烯酰胺水凝膠引入我國以來在臨床使用的并發(fā)癥發(fā)生情況進行完整、系統(tǒng)和深入的研究，以便更好地了解其安全性。

血管內皮生長因子（VEGF）是一種肝素親和外分泌二聚體糖蛋白，其在血管形成和腫瘤生長、浸潤、轉移中起關鍵作用，它受到一系列促進和抑制因子的調節(jié)，其中最重要的促進因子之一是腫瘤細胞在生長過程中分泌的VEGF。大量的實驗研究證實，幾乎所有的惡性腫瘤都表達較高水平的VEGF。而在正常組織中無或僅有極低水平的表達[10]。

PAHG注射是否會導致腫瘤的發(fā)生是廣大患者和研究人員都想了解的一個問題。為此，我們于2006年至2014年在內蒙古醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院選擇聚丙烯酰胺水凝膠注射隆乳的患者9例，作為研究組，研究組患者平均注射時間為7.4年；同期根據(jù)年齡等基線特征配比選擇巨乳、乳房外傷、隆乳術后等患者9例，作為對照組。由于在臨床中，正常的乳腺組織標本采集困難，而且存在倫理學問題，故而采用與對乳腺組織影響較小的乳房疾病患者手術治療時需要祛除的組織作為研究標本。由于樣本量較小，為了減少誤差和干擾，增加檢測的靈敏度、特異性和精確性，我們采用熒光定量PCR方法對組織中的血管內皮生長因子（VEGF）進行定量檢測。兩組比較，未發(fā)現(xiàn)具有統(tǒng)計學意義的差異。研究組中有1例患者其組織標本中VEGF mRNA的含量為7.82?10-3，高于其他樣品。由于研究組的9例中僅有1例出現(xiàn)這種現(xiàn)象，而且該患者乳房皮膚顏色發(fā)紅，因此，不能單純考慮為PAHG注射所致。

我們的結果是長時間注射PAHG并沒有引起乳房組織標本中VEGF mRNA含量的改變，但這也不能說明PAHG就一定不會導致腫瘤的發(fā)生，是安全可用的。目前雖然多項研究均沒有找到PAHG致癌的確切證據(jù)，但是由于我國使用 PAHG注射的人群數(shù)量很大，而且一但發(fā)生并發(fā)癥又不能完全取凈，為此關于注射PAHG是否會導致腫瘤的發(fā)生還需要進一步大量的相關研究去證實。

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