畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能腸道絨毛和細(xì)胞因子的影響

李玉欣，張立梅，韓丹丹，張?jiān)姮帲?lái)弟，韓 博

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193）

畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能腸道絨毛和細(xì)胞因子的影響

李玉欣，張立梅，韓丹丹，張?jiān)姮帲?lái)弟，韓 博

（中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193）

為了研究不同劑量畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道腸絨毛形態(tài)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞因子的影響，本試驗(yàn)選取144頭28日齡平均體重為7.17±0.16 kg的斷奶仔豬，分別給予3個(gè)日糧處理：對(duì)照組C、0.1%畢赤酵母甘露寡糖組T1和0.2%畢赤酵母甘露寡糖組T2，試驗(yàn)周期28 d。結(jié)果顯示，處理組T1和T2均可顯著提高日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率，增加仔豬空腸絨毛長(zhǎng)度和腸道絨腺比，明顯提高血清IL-10含量，降低TNF-α含量（P＜0.05）。表明畢赤酵母甘露寡糖可通過(guò)改善腸絨毛結(jié)構(gòu)，改變細(xì)胞因子含量來(lái)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，從而改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能。

畢赤酵母甘露寡糖；仔豬；生產(chǎn)性能；細(xì)胞因子；腸道結(jié)構(gòu)

酵母甘露寡糖是一類(lèi)效果良好的免疫增強(qiáng)劑，可改善腸道微生態(tài)、清除體內(nèi)有害菌和激發(fā)免疫功能，改善動(dòng)物的健康狀態(tài)[1]。酵母甘露寡糖主要來(lái)源于發(fā)酵行業(yè)的釀酒酵母，研究表明，其作為免疫增強(qiáng)劑能夠改善動(dòng)物的免疫狀況和提高生產(chǎn)性能[2]。酵母甘露寡糖也可來(lái)源于畢赤酵母，妊娠母豬日糧中全程補(bǔ)充0.1%和0.2%劑量的畢赤酵母甘露寡糖產(chǎn)品，可以增加窩產(chǎn)活仔數(shù)和斷奶活仔數(shù)[3]。而畢赤酵母甘露寡糖在仔豬上的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在探討不同劑量畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)和細(xì)胞因子等指標(biāo)的影響，闡述其調(diào)節(jié)斷奶仔豬免疫功能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 畢赤酵母甘露寡糖，購(gòu)自北京金國(guó)茂生物科技有限公司，產(chǎn)品標(biāo)識(shí)為甘露糖≥15%、甘露寡糖≥20%、蛋白質(zhì)≥35%，水分≤8%和粗灰分≤5%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組 選取144頭平均初始體重為7.17±0.16 kg的28日齡斷奶仔豬，隨機(jī)分為3組：空白對(duì)照組C、添加0.1%（T1）和0.2%（T2）畢赤甘露寡糖的處理組，每組分6個(gè)籠舍。試驗(yàn)在北京市海淀區(qū)蘇家坨鄉(xiāng)蘇三四豬場(chǎng)進(jìn)行，全封閉

管理，舍內(nèi)溫度、通風(fēng)強(qiáng)度和濕度均為自動(dòng)化系統(tǒng)控制，粉料飼喂，自由采食和飲水，常規(guī)免疫接種。

1.3 樣品采集 仔豬血清取樣：于試驗(yàn)第28天，每組隨機(jī)挑選6頭仔豬進(jìn)行前腔靜脈采血，分離血清后-20°C保存，備用于細(xì)胞因子的測(cè)定。腸道組織取樣：于試驗(yàn)第28天，每組隨機(jī)取出6頭仔豬待宰分別采集10 cm空腸和回腸中段，無(wú)菌生理鹽水涮洗后固定于10%中性甲醛磷酸鹽緩沖液，備用。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法 生產(chǎn)性能測(cè)定：斷奶后第

1、14天和第28天清晨稱(chēng)量仔豬空腹體重并統(tǒng)計(jì)耗料量，計(jì)算日均采食量、日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率。血清細(xì)胞因子測(cè)定：血清中細(xì)胞因子IL-1β、IL-2、IL-10、TNF-α和IFN-γ采用酶聯(lián)免疫試劑盒測(cè)定（BioSource International Inc.美國(guó)）。小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)測(cè)定：常規(guī)石蠟組織切片制作，鏡下觀察小腸絨毛和腺窩形態(tài)結(jié)構(gòu)。采用病理圖文分析系統(tǒng)定量分析和統(tǒng)計(jì)小腸絨毛的高度和腺窩深度，并計(jì)算小腸絨毛高度和腺窩深度的比值（絨腺比）（見(jiàn)圖1）。

圖1 不同含量畢赤酵母甘露寡糖對(duì)腸道結(jié)構(gòu)的影響A1：對(duì)照組回腸切片；A2：T1處理組回腸切片；A3：T2處理組回腸切片B1：對(duì)照組空腸切片；B2：T1處理組空腸切片；B3：T2處理組空腸切片

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件中的One-Way ANOVA進(jìn)行比較，若各個(gè)處理間差異顯著，則用Duncan′s多重比較進(jìn)行檢驗(yàn)。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 斷奶仔豬的生產(chǎn)性能 表1可見(jiàn)處理組T1和T2均可明顯提高仔豬平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率（P＜0.05）。T2處理組末期體重增加顯著（P＜0.05），而T1處理組與對(duì)照組相比差異不顯著。T2處理組與T1處理組相比，僅在末期體重和平均日增重方面差異顯著。而各組間的平均日采食量無(wú)顯著差異。

2.2 小腸黏膜絨毛與腺窩的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 圖1和表2可見(jiàn)與對(duì)照組C相比，T1和T2處理組空腸黏膜絨毛高度增加顯著；空腸和回腸腺窩深度均顯著降低，絨腺比均表現(xiàn)為顯著升高（P＜0.05），且處理組T1和T2間差異不顯著。回腸段絨腺比T2組大于T1組，而空腸絨腺比T1與T2組間差異不顯著。腺窩深度僅空腸段T2組顯著大于T1組（P＜0.05）。

表1 畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

2.3 血清中細(xì)胞因子的含量 與對(duì)照組C相比，處理組T1和T2中血清IL-10的含量明顯增高，且組間差異顯著（P＜0.05）；血清TNF-α的含量明顯降低（P＜0.05），但處理組T1和T2間無(wú)差異顯著性（見(jiàn)表3）。

表2 日糧中添加畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響

表3 畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬血清細(xì)胞因子水平的影響

3 討論

3.1 畢赤酵母甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響 本試驗(yàn)中添加0.1%和0.2%畢赤酵母甘露寡糖均可以顯著提高增重，明顯改善飼料轉(zhuǎn)化效率而不影響采食量。釀酒酵母甘露寡糖促進(jìn)仔豬生產(chǎn)性能的提高更多來(lái)自于腸道消化能力的增強(qiáng)而不是采食量的變化[4]。由此推斷本處理組飼料轉(zhuǎn)化效率的改善主要來(lái)自于體增重的增加，因?yàn)楫叧嘟湍父事豆烟悄軌蚋纳颇c道環(huán)境，促進(jìn)有益菌的增殖，從而提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率和飼料轉(zhuǎn)化效率。

3.2 畢赤酵母甘露寡糖對(duì)小腸腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響 對(duì)斷奶仔豬而言，較高絨毛高度與腺窩深度比值有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收[5]。本試驗(yàn)處理組空腸絨毛高度明顯增加，各腸段腺窩深度顯著降低，小腸絨腺比明顯提高。說(shuō)明畢赤酵母甘露寡糖可以改善小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)，增加吸收細(xì)胞數(shù)量，減少分泌細(xì)胞的數(shù)量，提高腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收率，促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)發(fā)育。

3.3 畢赤酵母甘露寡糖對(duì)仔豬血清細(xì)胞因子的影響 Kim等證實(shí)釀酒酵母甘露寡糖能夠提高斷奶仔豬血清中IL-2和IFN-γ的含量[6]，而本試驗(yàn)中對(duì)仔豬血清中IL-1β、IL-2和IFN-γ影響不顯著，但可明顯提高血清IL-10的含量和降低TNF-α的含量，究其原因可能有二：一是不同斷奶時(shí)間對(duì)腸道免疫發(fā)育的影響；二是甘露寡糖的來(lái)源和添加劑量不同。Shanmugasundara發(fā)現(xiàn)，畢赤酵母細(xì)胞產(chǎn)品可通過(guò)降低IL-1mRNA的水平和提高IL-10mRNA的水平來(lái)降低炎癥反應(yīng)[7]。本試驗(yàn)亦通過(guò)增加IL-10含量減少TNF-α的含量來(lái)調(diào)節(jié)過(guò)度免疫反應(yīng)，增加機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，實(shí)現(xiàn)斷奶仔豬生產(chǎn)性能的提高。

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Effects of of Pichia GuilliermondiiMannan O ligosaccharide on grow th performance，intestinalmorphology and serum cytokine ofweanling piglets

LIYu-xin，ZHANG Li-mei，HAN Dan-dan，ZHANG Shi-yao，DING Lai-di，HAN Bo（College of Veterinary Medicine，China AgriculturalUniversity，Beijing 100193，China）

The objective of this experimentwas to evaluate the effect of PG-MOS on growth performance，intestinalmorpholo?gy，and serum cytokines ofweanling piglets.One hundred and fourty fourweaning piglets（7.17±0.16 kg BW，28 d of age）were ran?domly fed with C，T1 and T2 treatment diets containing 0%，0.1%，0.2%PG-MOS supplements in basic diet for 28 days.Results showed that the average daily gain and feed efficiency had a significant increase in both T1 and T2 groups，and the intestinal villus heightand the villus height/crypt depth ratio were significantly increased.Increased serum IL-10 concentration and decreased se?rum TNF-αconcentration were observed in weaning piglets（P＜0.05）.In addation，obvious differenceswere found in average daily gain，and serum IL-10 concentration in T2 group.Therefore,it is suggested that PG-MOS supp lements could improve the weaned piglet performance by improvingmorphological structure of intestinalmucosa and changing the cytokine excretion in serum.

Pichia guilliermondiimannan oligosaccharide；piglets；growth performance；cytokine；intestinalmorphology

HAN Bo

S852.65+1

A

0529-6005（2015）11-0033-03

2015-04-16

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31272623）

李玉欣（1972-），男，博士，從事動(dòng)物免疫與營(yíng)養(yǎng)的研究，E-mail：liyx@vip.sohu.com

韓博，E-mail：hanbo＠cau.edu.cn