范偉興/中國動物衛生與流行病學中心
當前布魯氏菌病現狀和職業人群防護
范偉興/中國動物衛生與流行病學中心

中國動物衛生與流行病學中心人獸共患病實驗室范偉興主任
(一)人畜間布魯氏菌病疫情現狀
1. 人間布魯氏菌病(以下簡稱“布病”)病例(如表1)。2014年全國報告人間新發病例58 515例(4.30/10萬),較2013年上升30.4%,達歷史新高,病例涉及30個省、市、自治區,2013年西藏有2病例報告,2014年無病例報告。全國56.4%縣有病例報道。全國除黑龍江、吉林、青海報告病例下降、廣西持平外,其他26個省份新發病例均上升。
2. 近年來畜間布病監測情況。
2007以來全國持續開展布病定點調查結果表明:(1)牛羊布病呈現“北方高、南方低”的特點。東北、西北、華北最為嚴重,西南地區呈上升趨勢;華東和華南地區布病疫點顯現。

表1 近5年人間新發病例分布(全國2852縣)
(2)牛羊ⅡP1.57%~4.32%,牦牛3.51%~8.37%,高于控制標準。2013年:牛ⅡP4.02%牛、HP34.13%; 羊 ⅡP4.32%、HP51.18%。2014年:在全國12省份、23調查點,321個村和75個規模場血清17 340份,牛ⅡP2.5%、HP22%;羊ⅡP2.4%、HP25%。病料149份,分離22株,牛種菌7株、羊種菌15株。現分離到:牛種1、3、7型,羊種1、2、3型,豬種1、3型和犬種菌。存在多種型布菌并存和跨種間感染現象。(3)時間分布:牛羊個體、群體陽性率整體呈上升趨勢。2009年調查點采取撲殺措施,2010年陽性率下降,仍超國家控制標準;無堅定政治意愿和保障措施,布病防控效果不可持續。
(二)建國以來布病防控歷程
第1階段(1950-1964年):建立機構,培訓人員,探索診斷方法、疫苗研發和免疫途徑,開展疫情普查,只在有限地區開展防治;第2階段(1965-1976年):確立疫苗預防為主綜合防控措施,大規
模、高密度免疫,積極總結經驗;第3階段(1977-1988年):制定“全國布病防治規劃”,實施家畜免疫為主綜合措施,組織考核驗收,對職業人群實行重點免疫。第4階段(1989-2000年):按疫情有無、輕重分類指導,采取檢疫、淘汰和免疫為主的綜合措施,同時輔以考核驗收,人間采取“三早”措施;第5階段(2000年至今):疫情回升階段。進入21世紀,全國大部分地區疫情持續上升,37種法定報告傳染病中,由2000年的17位升至2013年的7位,至今仍呈上升趨勢。這對產業造成損失,對公共衛生、食品安全構成威脅。
(三)發達國家防控家畜布病的主要策略與措施
1.一般動因。布病造成母畜流產、公畜睪丸炎,導致嚴重經濟損失;家畜布病引致嚴重的公共衛生和食品安全問題;影響家畜及其產品的對外貿易。
2.布病根除計劃制定者和參與者情況。國家或聯邦政府必須主持制定布病防控規劃,并提供法律法規、經費、有效協調等方面保障。地方政府、行業協會和牧場主的通力協作。
3.法律行政、管理和技術措施。
(1)法律行政、管理措施:成立國家布病根除領導機構,統一全國根除行動;法律支持和保障。牛群分級和分區策略。
(2)主要技術措施:①采用“疫苗免疫” 控制和“檢測-撲殺”根除2步驟:在群流行率較高(5%~10%)情況下采用疫苗免疫控制,但疫苗免疫僅能將陽性率控制在2%或更低水平、達不到根除目的。此后需通過“檢測-撲殺”才能真正根除。②詳實的流行病學工作:各流行病學單元的流行率;病原菌種型分布、野生動物帶菌和潛在傳播能力。③及時研發和應用可靠的診斷技術。④有效開展屠宰場監測項目。⑤有效開展個體鑒定和尾標追蹤體系:要求100%集中牛羊;嚴格控制牛羊移動;準確記錄牛羊轉移(轉場、售出、屠宰)。⑥行業組織和農場主的支持是根除運動成功先決條件。⑦適時采取整群屠殺措施:對難以集中的放牧牛群和野水牛(野豬)、持續感染牛群、檢測難度大而經濟上不合算的牛群,實施整群屠宰、現場屠殺和射殺的辦法清群,加速傳染源的清除。
4.防控成效。發達國家通過制定與實施布病根除規劃,經過幾十年堅持不懈的努力,最終根除布病或將危害控制在很低水平(如表2)。例如,西班牙針對不同飼養方式和流行率,采取“全面免疫”和“檢疫-撲殺”主導性措施取得顯著成效,1986-2009年 HP:6.59%下降為0.32%, ⅡP:2.7%下降為0.07%,目前西班牙只有4個大區有散在疫情,2種措施均顯著降低牛布病群流行率至1%水平,撲殺下降快,免疫成本低。

表2 宣布根除布病的國家和地區
歐盟牛奶制品質量安全監管體系的借鑒
歐盟奶業鏈衛生控制的原則:只有在確保前一個環節符合要求的前提下,原料或中間產品才能進入下一個環節。歐盟具有目前世界上最為完善的奶制品質量安全監管體系。政府、奶牛場、牛奶加工企業、科研機構和消費者共同參與,依據一整套牛奶制品條例和指令,統一對牛奶制品實施從“農場到餐桌”的整個奶業生產鏈的全程監管。
目前荷蘭開展的奶牛疫病監測計劃
1.政府強制監測項目:布氏桿菌病、結核病、口蹄疫、白血病及其他以根除疾病。布病和結核病在實施無疫監測。
2.行業強制監測項目包括:副結核、沙門氏菌病和鉤端螺旋體病。
3.牛場自愿監測項目包括:BVD、ⅡBR和新孢子蟲病。荷蘭ⅡBR根除項目自1990年開始醞釀,1997年正式開始,目前28%牛群“無疫”,17%牛群暫時無疫,55%牛群呈現低流行率。荷蘭正在進行BVD根除計劃。
(四)當前我國布病防控的瓶頸問題
1.政府(行政)對布病防控重視程度;2.家畜(陽性家畜)移動控制缺乏有效抓手;3.免疫、檢測、撲殺難以徹底實施;4.各縣未能真實掌握轄區布病流行病學狀況;5.陽性畜無害化處理;6.行業組織和場(戶)缺乏應有的支持力度。
(五)策略與措施建議
我們已經提出防控建議:因地制宜、分區防控、分步實施、統籌推進。策略與措施:一類區主導措施:“全面免疫”;二類區主導措施:“檢疫+撲殺”;三類區主導措施:“無疫認證+無疫維持”。
在政策方面:
1. 政府層面領導小組,重大動物疫病防控范疇,政策、法規的支持和保障。
2. 發布布病防控計劃,實行全國一盤棋,統一分區標準、統一流通監管、統一撲殺政策和統一免疫方案。
3. 推動行業、養殖者、產品加工企業主動參與布病防控行動,實施監測與奶畜健康證統一,布病檢測結果與售奶資格結合,確保憑證供奶,逐步淘汰陽性奶畜。4. 設立國家級布病參考實驗室——技術統領。5. 推進無疫群和無疫區的評估認證工作(補欄、示范)。
在技術方面:
1.移動控制健康牛(陰性牛)獲證移動,陽性牛只能單向移往屠宰場。
2.流產診斷。凡奶牛出現流產,均需做實驗室診斷,排除布病。若確診為布病,要對同場(群)牛按陽性牛群進行檢測。
3.對陽性牛群的凈化措施:①對 陽性率高(如2%)牛群實施免疫:只免犢牛(4~8月齡),持續一個世代,疫苗:S(A)19苗或S2;②對陽性率低的牛群實施嚴密檢測:每年對場(群)混裝奶至少檢查3次(國標方法或OⅡE Ⅱ-ELⅡSA),若出現陽性,立即對全場(群)進行血清學檢測,查出陽性牛。全群檢測,間隔頻次1~3個月,國標方法或OⅡE方法檢疫,陽性牛撲殺。對陽性牛舍全面消毒,專人負責陽性奶牛飼養、擠奶和管理,所用器具禁止出舍。
4.健康牛群的防控措施:①建立健全規章制度,人員、工具相對固定,場內不飼養羊、豬、犬;②受布病威脅的健康牛群,堅持在4~8月齡接種S19疫苗;③人工授精確保凍精顆粒不能污染,并做好器具消毒;④引進牛只必須隔離飼養,專人管理,經2次檢疫陰性后,方可混群;⑤采血按國標或OⅡE方法,每年對場(群)混裝奶至少檢查3次。
(一)生物安全概說
廣義的生物安全(Biosafety)主要是指生物改造和基因操作對生命和環境的影響,以及防治其惡意使用的生物安保(Biosecurity)。農場生物安全是一個有關集約化生產過程中保護和提高畜群健康狀況的管理策略,通過它來盡可能減少引入致病因子,并從現有環境中去除致病因子,是注重生產過程各個環節聯系的一種系統工程,強調控制病原的感染與傳播。
實驗室生物安全是指病原微生物感染(污染)人和環境之風險的隔離。
科學家在實驗室對病原微生物的操作始于1 700年,從此實驗室感染事件就不斷發生傷寒、霍亂、鼻疽、布魯氏菌、破傷風等。二戰期間,美、日、德、俄等相繼開發生物武器,又發展高級別生物安全實驗室和防護裝備。1976年Sulkin累計調查實驗室相關感染3 921例,僅18%可追溯到已知事故,80%以上病例與感染性氣溶膠暴露有關。實驗室生物安全是一個必須重視的問題。致病微生物特性、人體對致病因子的易感性、環境條件和操作方法是實驗室感染的4大主因。
(二)實驗操作常見的生物暴露與防護
實驗操作常見的生物暴露與防護包括硬件因素(設施、設備、個人防護裝備)、軟件因素(SOP、人員培訓)、人員因素(精神狀態、健康狀況、免
疫接種)。
1.硬件因素包括一級和二級防護屏。一級防護屏障是指實驗室的生物安全柜和個人防護裝備等構成的防護屏障。生物安全柜是最重要的安全設備,形成最主要的防護屏障;為消除或減少人員暴露于有害生物材料所配備其他安全設備(如離心機負壓罩等);必須給實驗室工作人員配備必要的個體防護用品(手套、口罩、鞋套、面罩、正壓服等)。二級防護屏障是指實驗室的設施結構和通風系統等構成的防護屏障。包含選址與平面布局;圍護結構;送、排風系統;消毒、滅菌設備;污水處理設備;尸體處理設備;其他安全裝置。
2.軟件因素包括SOP和培訓。SOP:制定完善的標準操作規程;培訓:人員按照SOP操作的熟練程度。
3.人員因素包括人員資質、健康與精神狀況、免疫接種。
人員:工作場所完善、個人防護到位,以及學歷、經歷、經驗、培訓。
精神狀況:精神正常、心理健康、人際關系、關注工作。
健康狀況:懷孕員工潛在的暴露風險,巨細胞病毒、風疹病毒、乙型肝炎病毒、單純皰疹病毒、梅毒密螺旋體、弓形體等先天或新生兒感染。
免疫接種:職業性免疫接種(如狂犬病、乙型肝炎等),各種原因無法進行職業性免疫接種。
4.個人防護裝。
頭部面部腳部的防護(帽子、護目鏡、面具、鞋套、洗眼裝置):戴口罩和護目鏡可防止傳染性物質飛濺到實驗人員眼睛、口腔及鼻腔黏膜。
手部防護(手套):當接觸血液、體液、排泄物、分泌物及破損的皮膚黏膜時應戴手套;并且進行密閉性檢查、交叉污染、雙層佩戴手套:第一層為丁腈手套,機械強度、抗磨損、抗刺穿性能和抗化學性好第二層為乳膠手套,極好的彈性,特別柔韌有一定的抗磨損、抗撕裂和抗割性能)。
防護服(工作服、實驗服、隔離服、正壓服、圍裙袖套):有效選擇、適配性檢測、有效佩戴隔離服防止被傳染性的血液、分泌物、滲出物、飛濺的水和大量的傳染性材料,必要時可在外加放水圍裙。
呼吸道防護(口罩、正壓防護系統):正壓防護系統包括吸液時不小心產生氣泡;注射器混勻感染性的液體,針的端部在容器的液面上;向空氣中直接排放注射器的氣泡。要注意將感染性樣品置于呼吸帶之上;生物安全柜隔離板下緣在呼吸帶之上。
使用注射器注意事項:使用注射器后,重新給針頭蓋帽或夾針頭;由破裂的或有缺口的玻璃器皿引起的傳染性物質的意外感染;不小心操作,致銳器皿如皮下接種針(針頭)、玻璃吸管和碎玻璃導致實驗人員感染;對動物進行接種時未固定。使用鋒利的針頭或套管,動物活動時針頭傷及操作者。
感染性氣溶膠的產生:當操作液體或半固體,例如搖動、傾注、攪拌,或將液體滴加到固體表面上或另一種液體中時,均可能產生氣溶膠:在對瓊脂板劃線接種;用吸管接種細胞培養瓶;采用多道加樣器將感染性試劑的混懸液轉移到微量培養瓶中;對感染性物質進行勻漿及旋渦振蕩;對感染性液體進行離心;進行動物實驗操作。
劃破安瓿以前,未在手里墊一塊酒精浸透的棉花再握住安瓿;移去的安瓿頂部未按污染物處理;打開標本管塞子時,未墊上紗布再握住塞子濺出;用顯微技術檢測固定并染色的血液和排泄物等標本時,可能并未殺死涂片上的所有微生物和病毒; 受到污染實驗記錄紙張,未經可靠消毒帶出實驗室;通常使用傳真進行原始記錄的傳輸;穿著實驗室防護服離開實驗室工作區域。在實驗室內穿露腳趾的鞋;在實驗室工作區域進食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。
(三)職業人群的野外暴露與防護
1. 防止經皮膚和黏膜感染。
(1)防止接觸家畜流產物引起感染;(2)在處理流產胎兒、死胎時,應做好個人防護,除備有工作服、 橡皮圍裙、 帽子、 口罩和膠鞋外,還應戴乳膠手套和線手套,備有接產袋和消毒液,嚴禁赤手抓拿流產物;(3)家畜流產胎兒、 胎盤、 胎衣或死胎等,不能隨意丟棄;(4)不要食用流產胎兒; (5)剪毛、收購、保管、搬運和加工皮毛的工作人員,工作時應做好個人防護,不要赤手接觸皮毛 ,工作后應洗手、洗臉和洗澡 。
2.防止經消化道感染。應按預防腸道傳染病
的一般衛生要求搞好飲食、 飲水衛生,不吃不清潔或被布氏菌污染的食物,勤洗手、喝開水、吃熟食。
奶和奶制品的消毒:各種奶及其制品必需經巴氏消毒法和煮沸法消毒, 煮沸后應立即冷卻。裝奶用的桶及其他容器,用后一定要洗凈、 消毒。
肉類加工和食用時的衛生措施:在食用涮羊肉、烤羊肉時,一定要煮熟后再吃,以免感染布病。家庭烹飪時,應將家畜肉切成小塊,煮熟后再食用,切忌吃生肉或半生肉,尤其是內臟。要把生肉和熟肉分開放,切肉的刀具應及時洗凈,避免污染其他食物和炊具。
防止飲水傳播布病:要加強對水源的管理, 墊高井臺、 加井蓋定期消毒。飲用水源周圍要用木柵欄圍起來,不讓牲畜進入,定期消毒。布病家畜用過的不流動貯水池,須經過 3個月后才能讓健康畜飲用。
3.防止經呼吸道感染。按規定著裝,特別應戴口罩;做好對工作現場的消毒;家畜圈糞常起曬,牲畜停留過的地方要進行清掃、消毒和;家畜的糞便要及時運到糞坑或偏僻、遠離水源的地方集中堆放、泥封,經過生物發酵作用殺死布氏菌后方可用于農田。
4.減少人與牲畜接觸。牛、羊育肥場遠離居民點和人用水源 1 km以上;圈養動物不得散放和串街,不得放入、公共場所,飼養過牲畜的場所進行消毒;飼養牲畜的專業戶應建立產房,在產房內接產、哺育;產房內備有防護服、消毒液、肥皂、面盆、毛巾等,作好個人防護;不要用人用的盆或碗喂養家畜,小孩不要和幼畜玩耍。
5.個人防護。各種防護裝備要合理使用、 消毒,否則不但起不到保護作用,反而還成為傳播因素;工作結束后,應就地脫下保護裝備,洗凈消毒;不要穿工作服離開工作場所,更不許將其拿回家中。開展對布病陽性奶牛污染場所、用具、物品的消毒。
(四)人與人的傳播與防護
在我國經對大量布病病例的調查分析,通過病人而傳染引起的病例不多見。因此,人作為傳染源的意義不大。但有證據證明家庭成員密切接觸傳播,主要為性器官黏膜。實踐證明,布氏菌很容易經性器官黏膜感染發病。為了避免人間經性器官黏膜感染發病,夫妻之間不論男女,在布病急性期或亞急性期,都應禁止或安全措施下性生活,防止經黏膜交叉感染患布病。
人感染分離菌種:接觸山羊發病的病人:羊3型;布病陽性奶牛接觸的感染者:牛7型。致病力與侵入機體布氏菌的菌型、毒力、菌量及機體抵抗力等有關。
不同種型的致病力:一般來說,羊種布魯氏菌各生物型的致病力大于其他的種型,豬種布魯氏菌大于牛種布魯氏菌和其余的種,但是牛種布魯氏菌的某些菌株也有很強的致病力,甚至和羊種布魯氏菌相一致。羊種、牛種和豬種布魯氏菌某些菌株多為強毒株都能感染人,使人發病,呈現各種各樣的臨床表現,病理變化以及細菌學、血清學等一些反應。