重組人血管內皮抑素介入栓塞治療對肝癌患者血清血管內皮生長因子、基質金屬蛋白酶含量的影響及其臨床價值

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨陽

（鄭州大學附屬腫瘤醫院介入科，河南 鄭州 450000）

·臨床論著·

重組人血管內皮抑素介入栓塞治療對肝癌患者血清血管內皮生長因子、基質金屬蛋白酶含量的影響及其臨床價值

肖金成，李靖，黎海亮，郭晨陽

（鄭州大學附屬腫瘤醫院介入科，河南 鄭州 450000）

目的分析重組人血管內皮抑素介入栓塞治療對肝癌患者血清血管內皮生長因子（VEGF）、基質金屬蛋白酶（MMP）含量的影響及其臨床價值。方法選擇在該院接受住院治療的肝癌患者作為研究對象，隨機分為接受傳統肝動脈化療栓塞治療的對照組、接受重組人血管內皮抑素介入栓塞治療的觀察組，比較兩組患者的治療后血清VEGF水平、血清MMP水平及淋巴細胞亞群分布等差異。結果觀察組患者接受治療7，15及30 d后的血清VEGF水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。觀察組患者接受治療后的血清MMP-2及MMP-9水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明顯高于對照組（P＜0.05）。結論重組人血管內皮抑素介入栓塞治療可以有效抑制肝癌患者的腫瘤細胞血管新生及侵襲能力，提升患者治療后細胞免疫功能，有助于治療效果的維持。

肝癌；重組人血管內皮抑素；介入栓塞

肝癌為目前臨床惡性程度最高的腫瘤性疾病之一，臨床確診時多已至中晚期，故姑息性治療方式應用較為合理。經肝動脈化療栓塞術是目前應用最為廣泛的微創治療方法，通過栓塞肝癌細胞供血動脈、同時局部應用化療藥物，以達到最大程度殺滅腫瘤細胞的目的。但是栓塞治療后周圍區域會殘留肝癌細胞，加上動脈化療栓塞治療后血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表達水平顯著增高，可造成參與腫瘤細胞迅速增生轉移[1]。重組人血管內皮抑素是特異性、多靶點抑制VEGF表達的物質，其與單純動脈化療栓塞術聯用有望增強治療效果、改善患者預后。本次研究主要分析重組人血管內皮抑素介入栓塞治療對肝癌患者血清VEGF、基質金屬蛋白酶（matrix-metalloproteinases，MMP）含量的影響及其臨床價值。具體匯報如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇于2013年9月-2014年9月在本院接受住院治療的首次確診的肝癌患者82例作為研究對象，均經臨床病理證實且排除伴冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（冠心?。┖吞悄虿〉戎卮蠹膊』颊撸腥虢M患者及家屬在了解研究過程后均簽署知情同意書。按照隨機數表法將所有入組患者分為：接受傳統肝動脈化療栓塞（traditionalhepaticarterial chemoembolization，TACE）治療的對照組，接受TACE術中加用重組人血管內皮抑素的觀察組，每組各41例。觀察組患者中，男性23例，女性18例；年齡53～82歲，平均（68.26±8.05）歲；觀察組患者中，男性22例，女性19例；年齡55～81歲，平均（69.31±8.76）歲。兩組患者的基線資料差異無統計學意義，P＞0.05，具有可比性。

1.2 治療方法

對照組患者接受常規肝動脈栓塞治療，具體如下：患者全身麻醉插管，常規消毒鋪巾后穿刺股動脈，行腹腔干造影、腫瘤供血動脈選擇性插管。經導管注入絲裂霉素8 mg、替加氟注射液1.0 g，將吡柔比星20 mg與碘化油5～20 ml混合成乳化物，用明膠海綿栓塞動脈血管近端。觀察組患者用吡柔比星20 mg+重組人血管內皮抑素30 mg，與碘化油5～20 ml混合成乳化物，其余操作同對照組。

1.3 觀察指標

1.3.1 血清VEGF水平兩組患者采用不同治療方案前后，均抽取外周靜脈血，采用ELISA法測定血管內皮細胞生長因子（VEGF）水平。

1.3.2 血清MMP水平兩組患者采用不同治療方案前后，均抽取外周靜脈血，采用ELISA法測定基質金屬蛋白酶（MMP）水平，具體包括MMP-2及MMP-9。

1.3.3 淋巴細胞亞群分布兩組患者采用不同治療方案前后，均抽取外周靜脈血，采用酶聯免疫吸附實驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法測定T細胞亞群分布情況，具體包括CD4+、CD8+及CD4+/CD8+。

1.4 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件對上述數據進行統計學分析，計量資料采用t檢驗、計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

癩阿小雖然三十好幾還光棍一個，但他碰過的女人決不比老村長爛眼阿根少，所以女人身上那點小秘密他太懂了。想想也是，這大熱天的，柳紅穿的套衫薄得跟張紙似的，他的手就相當于直接碰到了敏感部位；再加上蘇石出門有半年了，她還能不念得慌嗎？再加上剛才玉米地里撞見蘇秋琴，觸景生情……就在柳紅飄到云端上的瞬間，癩阿小抓住時機將她按倒在地，動手扒她的褲子想霸王強上弓；但突然嘩啦一聲巨響，一只大西瓜砸在他頭上，癩阿小倒下了。

2 結果

2.1 血清VEGF水平

治療前兩組患者的血清VEGF水平差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療7，15及30 d后的血清VEGF水平均明顯低于對照組（P＜0.05），具體見表1。

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的血清VEGF水平比較（pg/ml±s）

表1 兩組患者接受不同治療方案前后的血清VEGF水平比較（pg/ml±s）

組別治療前治療后7 d治療后15 d治療后30 d觀察組123.92±21.05 112.38±18.62 100.72±13.2789.21±8.33對照組126.27±19.73 121.82±21.18 153.28±26.42 173.28±32.61 t值0.3844.9386.3829.0372 P＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

表2 兩組患者接受不同治療方案前后的血清MMP水平比較（ng/L±s）

表2 兩組患者接受不同治療方案前后的血清MMP水平比較（ng/L±s）

組別治療前MMP-2MMP-9治療后MMP-2MMP-9觀察組126.54±11.13 127.28±11.7234.48±4.3435.42±5.06對照組128.04±12.56 129.17±13.3375.12±7.2677.33±8.15 t值0.4420.3536.8477.485 P＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05

2.2 血清MMP水平

如表2所示，治療前兩組患者的血清MMP水平差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的血清MMP-2及MMP-9水平均明顯低于對照組（P＜0.05）。

2.3 淋巴細胞亞群分布

治療前兩組患者的T細胞亞群分布差異無統計學意義（P＞0.05），觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明顯高于對照組（P＜0.05），具體見表3。

表3 兩組患者接受不同治療方案前后的淋巴細胞亞群分布情況（±s）

表3 兩組患者接受不同治療方案前后的淋巴細胞亞群分布情況（±s）

組別治療前治療后CD3+/%CD4+/%CD3+/%CD4+/%CD4+/CD8+觀察組50.03±2.1741.12±3.661.73±0.2554.53±4.4743.42±4.272.24±0.36 CD4+/CD8+對照組49.49±2.6341.36±4.481.67±0.1748.15±2.5838.07±3.751.71±0.17 t值0.3210.2860.5354.9855.2656.395 P＞0.05＞0.05＞0.05＜0.05＜0.05＜0.05

3 討論

肝癌在臨床中較為常見，惡性程度高，多數患者自覺身體不適而就醫時已至肝癌中晚期，失去最佳根治性治療時機，故經肝動脈化療栓塞術（TACE）是較為理想的治療方式。目前普遍認為TACE雖可有效殺滅腫瘤細胞、阻斷其血供，但是其存在明顯弊端：術后血管內皮生長因子（VEGF）表達水平顯著增高，可直接導致栓塞區域周圍的殘留腫瘤組織內部血管新生、腫瘤組織獲取養分后快速增生并經血管途徑發生遠處播散轉移，加重病情[2-3]。為了有效控制肝癌病情，在TACE同時加入抑制VEGF活性的藥物是較為可行的改良治療方案。重組人血管內皮抑素具有顯著抑制VEGF表達的效果，其作用于血管內皮細胞，抑制腫瘤血管的生存而達到抗腫瘤目的[4]。由于血管內皮細胞具有正常人體染色體基因組，遺傳性具有穩定性，因此其治療不易獲得耐藥性，具有廣譜安全等臨床應用優勢。本次研究就選擇中晚期肝癌患者作為研究對象，重點觀察重組人血管內皮抑素在其治療中的效果。

惡性腫瘤細胞的侵襲能力主要與其誘導血管再生能力相關，即腫瘤的生長轉移依賴于腫瘤組織內部的新生血管形成[5]。血管內皮細胞生長因子（VEGF）是一類對血管生長具有強誘導能力的因子，其可特異性作用于血管內皮細胞、直接參與腫瘤血管的形成。經肝動脈栓塞治療（TACE）的機制就是封閉腫瘤血管、阻斷腫瘤細胞的營養供應，造成內皮細胞的缺血缺氧甚至壞死，栓塞同時局部注入的化療藥物可以輔助達到控制腫瘤生長轉移的目的[6-7]。肝動脈栓塞治療并非根治性治療手段，已經有較多臨床資料顯示，TACE治療后參與病灶邊緣或者內部會有新血管形成，使得腫瘤繼續生長轉移，造成肝癌復發且病情更為嚴重[8]。鑒于VEGF對血管內皮細胞作用的特異性，通過測定患者血清VEGF水平可以直觀了解患者的腫瘤血管新生能力及腫瘤復發可能性。上述結果顯示對照組患者接受治療后的血清VEGF先降后升，而觀察組患者接受治療后一段時間的血清VEGF水平顯著低于治療前，亦明顯低于對照組患者。說明單純TACE治療后對照組患者出現的腫瘤血管新生及腫瘤復發，而重組人血管內皮抑素的多靶點抗血管形成作用抑制了血清VEGF水平的上升，同時有效遏制了腫瘤組織的血管新生及腫瘤復發[9]。

基質金屬蛋白酶（MMPs）是腫瘤細胞分泌的一類鋅離子依賴蛋白酶，是細胞外基質的主要降解酶之一，可以降解所有細胞外基質（extracellular matrix，ECM）成分，已經有較多臨床學者發現MMPs直接參與了腫瘤轉移[10]。MMPs有較多亞型，其中MMP-2及MMP-9是最主要兩種，MMP-2及MMP-9可在腫瘤介導下完成ECM破壞，促進成纖維細胞進入細胞外基質與腫瘤產生協同作用，最終產生惡性循環加重ECM破壞及腫瘤侵襲轉移。MMPs作為腫瘤轉移必不可少的蛋白酶，其水平可以準確反映腫瘤侵襲力大小及治療對腫瘤活性的殺滅情況[11]。上述研究結果顯示：觀察組患者在TACE治療中加入了重組人血管內皮抑素，顯著降低了血清MMP-2、MMP-9水平，抑制殘余腫瘤組織活性及轉移能力，這與重組人血管內皮抑素的誘導腫瘤細胞快速凋亡、調節組織蛋白酶生物活性等作用相關。

肝癌患者普遍存在免疫功能降低的情況，在抗腫瘤過程中細胞免疫發揮著重要作用，其功能水平與腫瘤的侵襲轉移程度呈反比。T淋巴細胞中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平直接決定細胞免疫整體狀態，其中，CD3+淋巴細胞代表全T淋巴細胞、CD4+淋巴細胞代表輔助性T淋巴細胞，CD8+代表抑制性T淋巴細胞[12]。上述研究顯示觀察組患者接受治療后的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+水平明顯高于對照組，可見接受重組人血管內皮抑素治療后腫瘤患者細胞免疫功能提升，有助于其術后發揮抑制殘余腫瘤細胞的作用，同時細胞免疫功能的提升側面反映了術中腫瘤細胞被有效殺滅、殘余腫瘤組織的活性小、轉移侵襲力低。

綜上所述，得出以下結論：重組人血管內皮抑素介入栓塞治療可以有效抑制肝癌患者的腫瘤細胞血管新生及侵襲能力，提升患者治療后細胞免疫功能，值得在日后臨床實踐中推廣應用。

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The influence and clinical value of recombinant human endostatin vascular endothelial on liver cancer patient's serum VEGF,MMP levels

Jin-cheng XIAO,Jing LI,Hai-liang LI,Chen-yang GUO
(Department of Interventional Radiology,Cancer Hospital affiliated to Zhengzhou University, Zhengzhou,Henan 450000,P.R.China)

【Objective】To analyze influence of recombinant human endostatin vascular endothelial on liver cancer patients'serum VEGF,MMP levels and its clinical value.【Methods】Liver cancer patients in our hospital as research object,randomly divided into control group with traditional TACE treatment,observation group with recombinant human endostatin vascular endothelial treatment,compared serum VEGF levels after treatment,serum levels of MMP and lymphocyte subsets distribution differences.【Results】observation group patients'serum VEGF level after treatment was significantly lower than control group(P＜0.05).observation group patient's serum levels of MMP-2 and MMP-9 after treatment were significantly lower than control group(P＜0.05).observation group patients'CD3+,CD4+,CD4+/CD8+levels after treatment were significantly higher than control group(P＜0.05).【Conclusion】recombinant human endostatin vascular endothelial treatment could effectively inhibit tumor cells in liver cancer patients angiogenesis and invasion ability,promote cells after treatment in patients with immune function, help to cure effect.

liver cancer;recombinant human endostatin;interventional embolization

R735.7

A

1005-8982（2015）31-0070-04

2015-06-13