子宮內膜樣腺癌中低氧誘導因子-1α、-2α和Survivin的表達

艾小慶　李永川　劉玉嵚　青措吉　(青海紅十字醫院婦三科，青海　西寧　810000)

?

子宮內膜樣腺癌中低氧誘導因子-1α、-2α和Survivin的表達

艾小慶李永川劉玉嵚青措吉(青海紅十字醫院婦三科，青海西寧810000)

〔摘要〕目的檢測子宮內膜樣腺癌術后組織中低氧誘導因子(HIF)-1α、2α和生存素(Survivin)的表達特征。方法64例子宮內膜樣腺癌患者的臨床資料和術后蠟塊組織作為觀察組，56例子宮脫垂行子宮全切術后的子宮內膜組織作為對照組。應用免疫組化SP法檢測兩組中HIF-1α、-2α和Survivin的表達。結果兩組中HIF-1α、-2α和Survivin表達的陽性率差別顯著。觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的陽性率均與腫瘤最大徑及肌層浸潤深度密切相關，HIF-1α、-2α的表達與腫瘤的分化程度密切相關。線性相關分析顯示觀察組中HIF-1α和Survivin、HIF-2α和Survivin的表達具有正相關性。結論子宮內膜樣腺癌術后組織中HIF-1α、-2α和Survivin高表達，三者對促進腫瘤的形成和進展均有重要作用。HIF-1α、-2α均與Survivin有協同正向作用。

〔關鍵詞〕子宮內膜樣腺癌;低氧誘導因子(HIF)-1α; HIF-2α; Survivin;免疫組化

低氧誘導因子(HIF)-1α和-2α是細胞為了適應低氧條件而產生的核轉錄因子，它在多種人類腫瘤中的表達升高〔1，2〕。HIF-1α和-2α的大量表達可以增加腫瘤細胞的侵襲性和降低腫瘤細胞對放、化療藥物的敏感性〔3〕。生存素(Survivin)與腫瘤的凋亡和形成有關，也是腫瘤進展中重要的調節蛋白〔4〕。本實驗探討子宮內膜樣腺癌術后組織中HIF-1α、-2α和Survivin的表達特征，分析三者在不同臨床病理特征中的差別及相關性。

1　資料與方法

1. 1一般資料2013年1月至2014年12月行子宮內膜樣腺癌手術根治患者的臨床資料及術后蠟塊組織作為觀察組，共64例，納入均經病理醫師按WHO中子宮內膜樣腺癌的標準進行判定。年齡43～86歲，平均(62. 6±7. 6)歲。56例子宮脫垂行子宮全切術后的子宮內膜組織作為對照組，年齡45～87歲，平均(60. 9±7. 9)歲。兩組一般資料差別無顯著性。

1. 2 HIF-1α、-2α和Survivin的檢測方法HIF-1α、-2α和Survivin抗體均應用0. 1 ml的濃縮液。先行預實驗，選擇最理想的配比濃度用在正式實驗。兩組正式實驗中HIF-1α、-2α和Survivin的檢測均應用免疫組化SP法，嚴格按說明書進行操作，減少誤差，做好免疫組化的質控。

1. 3 HIF-1α、-2α和Survivin結果的判讀標準HIF-1α、-2α和Survivin的陽性部位均定位在細胞質，以染成棕黃色為陽性細胞。選擇上皮細胞集中的區域進行計數，選擇10個高倍視野(400倍)，計數陽性細胞的百分率，取平均值，以＜10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1. 4統計學方法采用SAS6. 12軟件進行χ2檢驗或線性相關分析。

2　結果

2. 1兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率的比較兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率差別顯著(P＜0. 000 1)。見表1。

表1　兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率比較〔n(%)〕

2. 2觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin在不同臨床特征中的比較觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的陽性率均與腫瘤最大徑及肌層浸潤深度密切相關，HIF-1α、-2α的表達與腫瘤的分化程度密切相關。見表2。

表2　觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性表達在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2. 3觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的相關性觀察組中HIF-1α和Survivin(r = 0. 48，P = 0. 029 1)、HIF-2α和Survivin(r=0. 46，P=0. 018 0)的表達具有正相關性。

3　討論

子宮內膜樣腺癌是由子宮內膜發生的原發性上皮性惡性腫瘤，伴有腺體分化、具有浸潤子宮肌壁及遠處擴散的潛能。病變時腫瘤呈一系列組織分化，經典學說認為其由非典型復雜性增生轉變而來，現在認為除了復雜性增生，單純性增生伴有非典型增生的腺體也可能引起腫瘤的形成。腺體由單層或假復層柱狀細胞被覆，并以其長軸垂直排列于基底膜上，腫瘤細胞核輕度增大并具有一定的極向。當腺體分化減少并被實性巢或成片的細胞取代時，腫瘤表達為低分化，也有學者〔5〕認為此時腫瘤為高級別的狀態，侵襲性和惡性程度均明顯升高。病變形成過程中，腫瘤表現為蛋白表達的失調，其中與缺氧相關的蛋白表達異常較為明顯。HIF-1α、-2α是HIFs家族的重要成員，廣泛存在〔6，7〕。目前認為HIF-1α、-2α是腫瘤生長的正向調節因子，其可能調節機制包括:①轉錄水平的上調和蛋白穩定;②蛋白的磷酸化水平〔8，9〕;③氧依賴的HIF-α降解;④配體的結合能力和在細胞內的定位。缺氧的條件對正常細胞的生長是不利的，然而對于腫瘤細胞，缺氧的條件則會對腫瘤細胞產生不同的影響。首先，缺氧的條件可以導致腫瘤細胞生長受到抑制，繼而出現局部壞死等表現〔10，11〕。其次，腫瘤內部的一些缺血缺氧部位的細胞生長受到抑制〔12〕。HIF-1α、-2α高表達時可以引起血管內皮生長因子分泌增多，并可以引起腫瘤間質的血管生成增多，進而使腫瘤組織供氧增多，有利于腫瘤的生長〔13〕。Survivin基因定位于17q25，編碼含有142個氨基酸，分子量16. 5 kD。其發揮作用是通過效應細胞蛋白酶受體1來調節凋亡進程的〔14〕。近年來顯示Survivin的作用可能更多，如對腫瘤細胞增殖的調控作用，對血管生成的誘導作用等〔15，16〕。

本實驗結果提示HIF-1α、-2α和Survivin高表達是促進腫瘤形成和進展重要因素。HIF-1α、-2α和Survivin高表達可以促進腫瘤的生長，使腫瘤的生長加速，腫瘤的體積增大。HIF-1α、-2α和Survivin高表達時可以促進腫瘤侵襲生長，使腫瘤的浸潤能力增強。HIF-1α、-2α高表達時可以使腫瘤的分化低，腫瘤的異型性明顯，細胞更幼稚。HIF-1α、-2α均可能與Survivin具有協同正向作用。HIF-1α/Survivin、HIF-2α/Survivin的協同作用可能和橋接通路有關〔17〕，如HIF-1α、-2α和Survivin均可以對血管內皮生長因子有明顯作用，因此VEGF可能是其協同作用的中介蛋白〔18，19〕，但是具體機制有待更多實驗研究證實。

綜上，子宮內膜樣腺癌術后組織中HIF-1α、-2α和Survivin高表達，三者對促進腫瘤的形成和進展均有重要作用。HIF-1α、-2α均與Survivin有協同正向作用。

4參考文獻

1謝虎，李永忠，郭風勁，等.骨肉瘤中低氧誘導因子2α(HIF-2α)、骨橋蛋白(OPN)、血管內皮生長因子(VEGF)的表達及其臨床意義〔J〕．中國實驗診斷學，2011; 15(1): 117-9.

2王健，易繼林，王煒煜，等. HIF-1α和HIF-2α在肝癌細胞中的時相差異表達〔J〕．中國癌癥雜志，2006; 16(2): 124-6.

3 Boddy JL，Fox SB，Han C，et al．The androgen receptor is significantly associated with vascular endothelial growth factor and hypoxia sensing via hypoxia-inducible factors HIF-1α，HIF-2α and the prolyl hydroxylases in human prostate cancer〔J〕．Clin Cancer Res，2005; 11(21): 7658-63.

4 Tong E，Xu Y，Li G，et al．The effects of β-elemene on the expression of mTOR，HIF-1A，survivin in lung adenocarcinoma A549 cell〔J〕．Afr J Tradit Complement Altern Med，2013; 10(4): 18-23.

5 Koukourakis MI，Giatromanolaki A，Skarlatos J，et al．Hypoxia inducible factor(HIF-1α and HIF-2α)expression in early esophageal cancer and response to photodynamic therapy and radiotherapy〔J〕．Cancer Res，2001; 61(5): 1830-2.

6閆哲，白立立，趙偉靜，等. HIF-1α E-cadherin在乳腺中的表達及意義〔J〕．河北醫學，2015; 21(6): 914-6.

7 Wang YF，Ma SR，Wang WM，et al．Inhibition of survivin reduces HIF-1α，TGF-β1 and TFE3 in salivary adenoid cystic carcinoma〔J〕．PLoS One，2014; 9(12): e114051.

8 Tong WW，Tong GH，Chen XX，et al．HIF2α is associated with poor prognosis and affects the expression levels of survivin and cyclin D1 in gastric carcinoma〔J〕．Int J Oncol，2015; 46(1): 233-42.

9 Li DW，Zhou L，Jin B，et al．Expression and significance of hypoxia-inducible factor-1α and survivin in laryngeal carcinomatissue and cells〔J〕．Otolaryngol Head Neck Surg，2013; 148(1): 75-81.

10 Zhang B，Yin CP，Zhao Q，et al．Upregulation of HIF-1α by hypoxia protect neuroblastoma cells from apoptosis by promotingsurvivin expression 〔J〕．Asian Pac J Cancer Prev，2014; 15(19): 8251-7.

11 Zou K，Tong E，Xu Y，et al．Down regulation of mammalian target of rapamycin decreases HIF-1α and survivin expression in anoxic lung adenocarcinoma A549 cell to elemene and/or irradiation〔J〕．Tumour Biol，2014; 35(10): 9735-41.

12 Fan LF，Dong WG，Jiang CQ，et al．Role of Hypoxia-inducible factor-1 alpha and Survivin in colorectal carcinoma progression〔J〕．Int J Colorectal Dis，2008; 23(11): 1057-64.

13 Sun HC，Qiu ZJ，Liu J，et al．Expression of hypoxia-inducible factor-1 alpha and associated proteins in pancreatic ductal adenocarcinoma and their impact on prognosis〔J〕．Int J Oncol，2007; 30(6): 1359-67.

14劉揚，劉荔萍，劉愛東.老年眼瞼基底細胞癌患者術后組織中Survivin、Ataxin-3和PTEN表達及意義〔J〕．中國老年學雜志，2014; 34(11): 2933-4.

15 Lu D，Qian J，Yin X，et al．Expression of PTEN and survivin in cervical cancer: promising biological markers for early diagnosis and prognostic evaluation〔J〕．Br J Biomed Sci，2012; 69(4): 143-6.

16 Chen J，Li T，Liu Q，et al．Clinical and prognostic significance of HIF-1α，PTEN，CD44v6，and survivin for gastric cancer: a meta-analysis〔J〕．PLoS One，2014; 9(3): e91842.

17 Bache M，Holzapfel D，Kappler M，et al．Survivin protein expression and hypoxia in advanced cervical carcinoma of patients treated by radiotherapy〔J〕．Gynecol Oncol，2007; 104(1): 139-44.

18 Alig SK，Stampnik Y，Pircher J，et al．The tyrosine phosphatase SHP-1 regulates hypoxia inducible factor-1α(HIF-1α)protein levels in endothelial cells under hypoxia〔J〕．PLoS One，2015; 10(3): e0121113.

19 Li J，Guo ZY，Gao XH，et al．Low molecular weight heparin(LMWH)improves peritoneal function and inhibits peritoneal fibrosis possibly through suppression of HIF-1α，VEGF and TGF-β1〔J〕．PLoS One，2015; 10(2): e0118481.

〔2014-07-19修回〕

(編輯苑云杰)

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5821-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 066

〔文獻標識碼〕A

〔中圖分類號〕R737. 33

第一作者:艾小慶(1981-)，女，主治醫師，主要從事婦產科疾病研究。