肺腺癌中鋅指E-盒結合同源異型盒蛋白-1、-2和增殖細胞核抗原表達及意義

久　太　馮喜英　安文靜　劉洪千　(青海大學附屬醫院呼吸科，青海　西寧　810001)

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肺腺癌中鋅指E-盒結合同源異型盒蛋白-1、-2和增殖細胞核抗原表達及意義

久太馮喜英安文靜劉洪千(青海大學附屬醫院呼吸科，青海西寧810001)

〔摘要〕目的檢測肺腺癌中鋅指E-盒結合同源異形盒蛋白(ZEB)-1、ZEB-2和增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖指數的關系。方法59例肺腺癌患者臨床資料及術后蠟塊組織作為觀察組，同期肺腫物切除后距腫物邊緣＞3 cm腫瘤周圍正常肺組織59例作為對照組，應用免疫組化方法檢測兩組中ZEB-1、-2和PCNA的表達。結果兩組中ZEB-1、-2和PCNA的陽性率差別顯著，觀察組中ZEB-1、-2和PCNA表達的陽性率與腫瘤的最大徑、腫瘤的胸膜累犯密切相關，PCNA表達的陽性率與淋巴結轉移及是否伴有壞死密切相關。觀察組中ZEB-1和PCNA的表達呈正相關。結論

肺腺癌術后組織中ZEB-1、-2和PCNA高表達，不僅對腫瘤的形成有重要意義，還可以促進腫瘤的進展，尤其是PCNA高表達可能對腫瘤進展有多種生物學意義。

〔關鍵詞〕肺腺癌;鋅指E-盒結合同源異型盒蛋白(ZEB)-1; ZEB-2;增殖細胞核抗原(PCNA);免疫組化

第一作者:久太(1971-)，男，副主任醫師，主要從事呼吸系統疾病研究。

肺腺癌目前已超過鱗狀細胞癌成為肺癌最常見的組織學亞型，更常見于不吸煙的患者，尤其是女性。肺癌常表達為周圍型結節，很少位于中央，也很少形成空洞〔1〕。病變形成過程中，常伴有明顯的基因和蛋白表達失調。鋅指E-盒結合同源異形盒蛋白(ZEB)-1、-2是非受體細胞核轉錄因子中的重要成員，異常表達時對腫瘤的形成及進展都有一定促進作用〔2，3〕。增殖細胞核抗原(PCNA)是細胞增殖中重要的標記蛋白，在一定程度上可以客觀地反映細胞增殖狀態〔4〕。本研究分析ZEB-1、-2在肺腺癌中的表達特征及與PCNA的相關性。

1　資料與方法

1. 1一般資料2012年1月至2014年12月行肺腺癌根治手術的患者59例作為觀察組，留取完整臨床資料和術后蠟塊組織。均經病理醫師確診，并符合國際肺癌研究協會(IASLC)/美國胸科協會(ATS)/歐洲呼吸學會(ERS)國際多學科分類中的標準。男31例，女28例;年齡45～79歲，平均62. 1歲。同期肺腫物切除后距腫物邊緣＞3 cm腫瘤周圍正常肺組織59例作為對照組，其中男30例，女29例;年齡46～77歲，平均61. 7歲。兩組常規資料無明顯差別。

1. 2 ZEB-1、-2和PCNA表達的檢測ZEB-1、-2和PCNA蛋白的檢測應用免疫組化SP法，DAB染色，嚴格按說明書操作，并由病理科主管技師完成，做好質量控制，減少誤差。

1. 3 ZEB-1、-2和PCNA結果的判斷標準ZEB-1、-2和PCNA均以細胞核呈現棕黃色為陽性細胞，計數10個上皮細胞集中的區域(×400倍)，計算陽性率，取平均值作為最終結果。以＜25%為陰性，≥25%為陽性。

1. 4統計學方法采用SAS6. 12軟件進行χ2檢驗和線性相關性分析。

2　結果

2. 1兩組中ZEB-1、-2和PCNA陽性率的比較觀察組中ZEB-1、-2和PCNA陽性率明顯高于對照組(P＜0. 000 1)。見表1。

表1　兩組中ZEB-1、-2和PCNA陽性表達的比較〔n(%)，n=59〕

2. 2 ZEB-1、-2和PCNA在觀察組不同臨床特征中的表達觀察組中ZEB-1、-2和PCNA表達的陽性率與腫瘤的最大徑、腫瘤的胸膜累犯密切相關，PCNA表達的陽性率與淋巴結轉移及是否伴有壞死密切相關。見表2。

表2　 ZEB-1、-2和PCNA陽性表達在觀察組不同臨床特征中的表達比較〔n(%)〕

2. 3觀察組中ZEB-1、-2和PCNA的相關性分析觀察組中ZEB-1和PCNA的表達呈正相關(r= 0. 51，P= 0. 035 9)，ZEB-2 和PCNA的表達無明顯相關性(r=0. 39，P=0. 058 7)。

3　討論

肺腺癌是指具有腺樣分化或有黏液產生的腫瘤，表現為腺泡狀、乳頭狀、細支氣管肺泡狀，常形成實性巢狀結構。腫瘤細胞異型性明顯，可伴有明顯的浸潤性生長。腫瘤形成過程中增殖常活躍，使細胞的異型性和染色質濃集。與預后差相關的參數包括組織學分級高和血管侵犯，核分裂增加、淋巴細胞浸潤相對少和廣泛的腫瘤壞死也被認為評價預后的指標。ZEB-1、-2是胚胎發育中必需的轉錄因子〔5，6〕。近來關于ZEB-1、ZEB-2在腫瘤中的研究較多，被認為是與腫瘤生長、增殖及遷移相關的蛋白〔7，8〕。劉亞敏等〔9〕通過對乳腺癌術后組織中ZEB-1的表達進行檢測，發現正常乳腺、乳腺增生及導管內癌中ZEB-1均為陰性，而浸潤性乳腺癌組織中的ZEB-1表達的陽性率明顯增加，認為ZEB-1是與乳腺癌增殖、浸潤及淋巴結轉移有關的蛋白，其可能對判斷患者的預后有一定價值。汪泉〔10〕通過對宮頸鱗狀細胞癌中ZEB-2的表達進行檢測，發現腫瘤中ZEB-2表達的陽性率明顯高于癌旁黏膜組織，且ZEB-2的表達與國際婦產科協會(FIGO)分期、淋巴結轉移有明顯的相關性。PCNA是近年來發現的與細胞增殖活性有關的指標，作為DNA聚合的輔助蛋白，是DNA復制所必需的，在核內表達量增加預示著細胞進入S期或G1晚期〔11〕。也有研究〔12〕認為PCNA是反映細胞增殖分數和所處周期的客觀指標，可以作為判定腫瘤惡性程度及預后。

本實驗結果提示ZEB-1、-2和PCNA高表達是促進腫瘤形成的重要因素。ZEB-1、-2和PCNA高表達可以促進腫瘤的生長及對胸膜的侵犯。腫瘤的生長是依靠細胞的增殖，細胞增殖活躍時腫瘤生長快，PCNA表達高的腫瘤生長快，同時ZEB-1、-2表達也升高，提示ZEB-1、-2也是促進腫瘤生長的重要蛋白。本文結果提示PCNA的高表達可以在一定程度上促進腫瘤的淋巴道播散，同時可以使腫瘤在生長過程中出現細胞凝固性壞死，使腫瘤的進展加速。ZEB-1表達升高時可以促進PCNA的高表達，使腫瘤細胞的繁殖加速，這也間接反映了ZEB-1對細胞增殖有明顯的調節作用〔13〕。雖然學者們〔9，10〕發現ZEB-1、-2與淋巴結轉移有明顯相關性，但是本實驗顯示ZEB-1、-2均與淋巴結轉移無明顯相關性，這種差異表達可能與器官差異性有關，也可能與樣本選擇等因素有關。本實驗未發現ZEB-2和PCNA的直接關聯性，但是結果也顯示出了二者可能具有協同作用的趨勢，這可能與樣本量有關，后續研究可以繼續觀察ZEB-2和PCNA增殖的關系，以更進一步明確二者的協同作用和相關性。

4參考文獻

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〔2014-07-19修回〕

(編輯苑云杰)

〔文章編號〕1005-9202(2015)20-5829-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 070

〔文獻標識碼〕A

〔中圖分類號〕R734