丹參酮ⅡA對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠左心室心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡的影響

王詩(shī)才，陳太軍，黃美松，朱少銘

丹參酮ⅡA對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠左心室心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡的影響

王詩(shī)才，陳太軍，黃美松，朱少銘

目的：研究丹參酮ⅡA對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠（SHR） 左心室心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡的影響。

方法：將60只8周齡SHR隨機(jī)分為3組，即空白對(duì)照組（第8 W時(shí)處死）、丹參酮ⅡA處理組 [1 ml/（kg·d）]和溶劑對(duì)照組 [1 ml/（kg·d）] ，每組15只大鼠（各組均另留5只為備用）。丹參酮ⅡA處理組和溶劑對(duì)照組繼續(xù)喂養(yǎng)至18 W后測(cè)定SHR的收縮壓和左心室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）；左心室組織經(jīng)蘇木素伊紅（HE）染色后拍照，應(yīng)用全自動(dòng)形態(tài)測(cè)量?jī)x測(cè)定心肌細(xì)胞的直徑和表面積；應(yīng)用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡率，同時(shí)運(yùn)用蛋白免疫印跡（Western-blot）測(cè)定心肌組織中凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax和p53的表達(dá)水平。

結(jié)果：（1）與溶劑對(duì)照組（18 W）比較, 丹參酮ⅡA處理組（18 W）SHR的LVMI[ （3.23±0.24） mg/g vs（4.58±0.68） mg/g ]、細(xì)胞的直徑[（16.13±1.77） μm vs （27.15±3.52） μm]、表面積[（230.23±69.37） μm2vs（490.12±118.96） μm2]和心肌細(xì)胞凋亡率[（7.45±1.78）% vs （10.61±2.77）%]均降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）；（2）蛋白相對(duì)表達(dá)水平[經(jīng)內(nèi)參還原型輔酶Ⅱ（NAPDH）校正后以Bcl-2/NAPDH、Bax/NAPDH、p53/ NAPDH表示]：與溶劑對(duì)照組（18 W）比較, 丹參酮ⅡA處理組（18 W）SHR的Bcl-2/NAPDH升高（0.97±0.31vs 0.40±0.11），Bax/NAPDH降低（0.37±0.15 vs1.81±0.44）和p53/NAPDH降低（0.83±0.18 vs2.72±0.28），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.05或＜0.01）。而丹參酮ⅡA處理組（18 W）與空白對(duì)照組（8 W）比較，上述指標(biāo)均無明顯變化，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。

結(jié)論：丹參酮ⅡA能抑制SHR左心室心肌肥厚的發(fā)生，同時(shí)能降低心肌細(xì)胞凋亡的程度，提示丹參酮ⅡA可能通過上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)和下調(diào)Bax、p53蛋白表達(dá)來調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞的凋亡水平。

丹參酮ⅡA；自發(fā)性高血壓大鼠；心肌肥厚；細(xì)胞凋亡

Methods: A total of 60 SHRs at 8 weeks of age were randomly divided into 3 group: Blank control group, the rats were sacrificed at 8 weeks, TSN group, the rats were treated with TSN at 1 ml/（kg·d） for 18 weeks and Solvent control group, the rats were treated with the solvent at 1 ml/（kg·d） for 18 weeks. n=20 in each group and 15 rats were used for the experiments. The systolic blood pressure （SBP） and left ventricular mass index （LVMI） were examined, cardiomyocyte’s diameter and surface area were measured by HE staining, the apoptosis rate was evaluated by TUNEL method and the apoptosis related protein expression s of Bcl-2, Bax and p53 were determined by Western blot analysis.

Results: ①Compared with Solvent control group, TSN group had decreased LVMI （3.23 ± 0.24） mg/g vs （4.58 ± 0.68） mg/g,

cardiomyocyte’s diameter （16.13 ± 1.77） μm vs （27.15 ± 3.52） μm and surface area （230.23 ± 69.37） μm2vs （490.12 ± 118.96） μm2and decreased apoptosis rate （7.45 ± 1.78） % vs （10.61 ± 2.77） %, all P＜0.01.②With NAPDH reference correction, compared with Solvent control group, TSN group presented increased protein expression of Bcl-2 （0.97 ± 0.31）vs （0.40 ± 0.11） and decreased Bax （0.37 ± 0.15） vs （1.81 ± 0.44）, decreased p53 （0.83 ± 0.18） vs （2.72 ± 0.28）, all P＜0.05 or P＜0.01. The above indexes were similar between TSN group and Blank control group, P＞0.05.

Conclusion: TSN could inhibit the development of LVH and decrease the cardiomyocyte apoptosis, which might be via up-regulating the protein expressions of Bcl-2 and down-regulating Bax and p53 in SHRs.

（Chinese Circulation Journal, 2015,30:694.）

左心室細(xì)胞過度肥厚是高血壓患者的常見并發(fā)癥，也是冠心病發(fā)生發(fā)展過程中的顯著特征，左心室細(xì)胞過度肥厚是冠心病發(fā)生的一種風(fēng)險(xiǎn)因子[1]。研究發(fā)現(xiàn)左心室細(xì)胞過度肥厚將導(dǎo)致心肌缺氧、心律失常、心臟衰竭甚至猝死[2,3]。丹參酮ⅡA （tanshinoneⅡA） 為唇形科多年生草本植物，是一種傳統(tǒng)中藥，具有活血化瘀、寧心安神等功效，已廣泛用于臨床治療心腦血管疾病[4]。在自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）模型中的研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA具有心肌保護(hù)功能防止左心室細(xì)胞過度肥厚[5]。丹參酮ⅡA預(yù)防左心室細(xì)胞過度肥厚發(fā)生可能的作用機(jī)制在于其抑制腎素—血管緊張素—醛固酮系統(tǒng)（RAAS）[6]。研究發(fā)現(xiàn)在左心室細(xì)胞過度肥厚時(shí)高活性的RAAS與心肌細(xì)胞凋亡率呈正相關(guān)[7]。因此，本研究以SHR為實(shí)驗(yàn)對(duì)象研究丹參酮ⅡA在左心室細(xì)胞肥厚過程中的作用以及抗凋亡蛋白的表達(dá)變化，初步探討丹參酮ⅡA對(duì)SHR左心室心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡的影響。

1 材料與方法

動(dòng)物模型建立及分組：2013-05至2014-02用于實(shí)驗(yàn)的大鼠嚴(yán)格按照國(guó)家動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求規(guī)則執(zhí)行，并得到湖北醫(yī)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理委員會(huì)的批準(zhǔn)。60只雄性SHR購(gòu)自于上海市高血壓研究所，用于實(shí)驗(yàn)的大鼠在實(shí)驗(yàn)前正常進(jìn)食，在（25±1）℃和50%～55%濕度條件下飼養(yǎng)8 W。隨后將大鼠隨機(jī)分為3組，每組15只大鼠，另每組再各留5只為備用,防止SHR大鼠意外死亡。實(shí)驗(yàn)分組為空白對(duì)照組（第8周時(shí)處死）；丹參酮ⅡA處理組[1 ml/（kg·d）]：實(shí)驗(yàn)開始即給丹參酮ⅡA[1 ml/（kg·d） ]，第1 天開始給藥，每周給藥1次；溶劑對(duì)照組[1 ml/（kg·d）]：以二甲基亞砜（DMSO）為溶劑，給藥方式同丹參酮ⅡA處理組。丹參酮ⅡA處理組和溶劑對(duì)照組培養(yǎng)至18 W時(shí)將大鼠麻醉致死，保藏于-80℃用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

試劑：丹參酮ⅡA（純度≥98%，貨號(hào)：S02001300）購(gòu)自于中國(guó)藥品和生物制品檢測(cè)中心；兔抗鼠Bcl-2，Bax和p53單克隆抗體購(gòu)自Santa Cruz公司（美國(guó)）；辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗LgG購(gòu)自北京中山金橋；TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司；DAB染色試劑盒（貨號(hào)：070004-D）購(gòu)自北京賽馳生物科技有限公司；BCA蛋白濃度檢測(cè)試劑盒（貨號(hào)：23225）購(gòu)自Thermo公司（美國(guó)）；Hoechst 33258及其他生化試劑購(gòu)自Sigma公司（美國(guó)）。

SHR收縮壓的測(cè)定：將處理后的SHR于38℃放置15 min，用血壓計(jì)袖帶（MRS2 III）測(cè)量每只老鼠的收縮壓，每只老鼠重復(fù)測(cè)量5次，計(jì)算每只老鼠的平均收縮壓，所有的操作都是在老鼠有意識(shí)的情況下進(jìn)行。

SHR左心室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）的測(cè)定：SHR處死后，取出心臟，將主要的血管、心房、右心室從左心室中分離出來，隨后把左心室置于預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液（PBS，pH=7.2）中洗滌，晾干，稱重。然后根據(jù)下列公司計(jì)算LVMI。

左心室質(zhì)量指數(shù)（LVMI）=左心室的體重（mg）/大鼠總體重（g）

蘇木素伊紅（HE）染色及心肌細(xì)胞直徑和表面積的測(cè)量：取出大鼠左心室組織，樣本通過4%多聚甲醛固定，PBS沖洗，乙醇脫水，石蠟包埋，冷凍切片，乙醇脫蠟，制成組織切片。再將制好的切片置于Harris蘇木精溶液中染色5 min，使細(xì)胞核著色，自來水沖洗；再將組織切片放入0.5%的伊紅酒精溶液中染色2 min，使細(xì)胞質(zhì)著色，再經(jīng)過乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片；運(yùn)用Nikon ECLIPSE 80i生物顯微鏡進(jìn)行觀察，隨機(jī)選擇3個(gè)視野進(jìn)行拍照。運(yùn)用全自動(dòng)形態(tài)測(cè)量?jī)x（HPIAS21000,

中國(guó)）對(duì)左心室心肌細(xì)胞直徑和面積進(jìn)行測(cè)量，每張切片測(cè)量5次并計(jì)算其平均值。

心肌細(xì)胞凋亡分析：按照TUNEL試劑盒說明書對(duì)心肌細(xì)胞凋亡進(jìn)行分析，左心室組織經(jīng)過脫蠟，乙醇脫水，加入20 μg/ml 蛋白激酶K 37℃孵育15 min，隨后加入0.3%的H2O2使組織中氧化酶失活。組織切片經(jīng)PBS洗滌3次，加入30 μl TUNEL混合液，隨后將組織切片放入濕盒內(nèi)37℃孵育1 h。組織切片用PBS洗滌3次，再加入30 μl TUNEL混合液，放入濕盒內(nèi)37℃孵育30 min。切片經(jīng)PBS沖洗后用二氨基聯(lián)苯胺顯色液（DAB）顯色，組織切片再經(jīng)過HE染色。運(yùn)用Nikon ECLIPSE 80i生物顯微鏡進(jìn)行觀察，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行拍照，這時(shí)細(xì)胞核呈藍(lán)色而凋亡的細(xì)胞呈紅色，隨機(jī)選擇3個(gè)視野計(jì)算心肌細(xì)胞凋亡率。

蛋白免疫印跡（Western-blot）：取出左心室組織，用勻漿機(jī)將其搗碎，10 580 g，4℃離心10 min，收集上清，按照BCA試劑盒說明書測(cè)定蛋白濃度。將總蛋白50 μg進(jìn)行十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，5%脫脂奶粉室溫封閉1 h，孵育一抗（p53抗體1:500, Bax抗體1:1000, Bcl-2抗體1:1000和β-肌動(dòng)蛋白（actin）抗體1:3000），4℃過夜。TBST（Tris-HCl緩沖液包含10 mmol/L Tris-HCl, 150 mmol/L NaCl, 0.5‰吐溫-20, pH7.4）洗膜、加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗鼠IgG（1:2000）室溫孵育1 h。照片經(jīng)免疫印跡化學(xué)發(fā)光試劑顯影后掃描，蛋白表達(dá)灰度值經(jīng)Quanity-One軟件分析。

2 結(jié)果

3組SHR 18 W 時(shí)收縮壓的比較：第18周時(shí)SHR的收縮壓在丹參酮ⅡA處理組為（155±12）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），溶劑對(duì)照組為（152±7）mmHg，均處于較高水平（表1），兩組與空白對(duì)照組（8 W）比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 3組SHR 18 W時(shí)收縮壓、左心室質(zhì)量指數(shù)、心肌細(xì)胞直徑和心肌細(xì)胞表面積的比較（

表1 3組SHR 18 W時(shí)收縮壓、左心室質(zhì)量指數(shù)、心肌細(xì)胞直徑和心肌細(xì)胞表面積的比較（

注：SHR：自發(fā)性高血壓大鼠。與空白對(duì)照組比較*P＜0.05**P＜0.01。與溶劑對(duì)照組比較△△P＜0.01。1 mmHg=0.133 kPa

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3組SHR 18 W時(shí)LVMI、心肌細(xì)胞直徑及表面積的比較：表1顯示，SHR培養(yǎng)至18 W時(shí)，（1）LVMI：與溶劑對(duì)照組比較，丹參酮ⅡA處理組SHR的LVMI降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而丹參酮ⅡA處理組和空白對(duì)照組（8 W）間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（2）心肌細(xì)胞的直徑和表面積：心肌細(xì)胞經(jīng)HE染色后顯微鏡觀察拍照，經(jīng)圖像軟件對(duì)心肌細(xì)胞直徑和表面積計(jì)算分析顯示，與溶劑對(duì)照組比較，丹參酮ⅡA處理組SHR的心肌細(xì)胞的直徑和表面積減小（表1、圖1），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。但丹參酮ⅡA處理組心肌細(xì)胞的直徑和表面積與空白對(duì)照組（8 W）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖1 蘇木素伊紅（HE） 染色觀察丹參酮IIA對(duì)SHR左心室心肌細(xì)胞形態(tài)的影響（HE，×400）

3組SHR 18 W時(shí)心肌細(xì)胞凋亡率和蛋白表達(dá)水平的比較（表2）：SHR培養(yǎng)至18 W時(shí)，（1）心肌細(xì)胞凋亡率：與溶劑對(duì)照組比較，丹參酮ⅡA處理組SHR的心肌細(xì)胞凋亡率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）； 而與空白對(duì)照組（8 W）比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（2） 蛋白表達(dá)水平（表2、圖2、3）：運(yùn)用Western-blot測(cè)定SHR經(jīng)丹參酮ⅡA處理后的左心室組織中凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2，Bax和p53表達(dá)，結(jié)果經(jīng)內(nèi)參還原型輔酶Ⅱ（NAPDH）校正后（Bcl-2/NAPDH、Bax/NAPDH、p53/NAPDH）表示。結(jié)果顯示SHR培養(yǎng)至18 W時(shí)，與溶劑對(duì)照組比較，丹參酮ⅡA處理組SHR的Bcl-2/ NAPDH升高，Bax/NAPDH和p53/NAPDH降低，提示Bcl-2蛋白水平升高，而Bax和p53蛋白表達(dá)降低；同時(shí)Bcl-2/Bax值（圖3）也升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。盡管圖3顯示丹參酮ⅡA處理組Bcl-2/Bax值也小于空白對(duì)照組，但兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。此外與空白對(duì)照組（8 W）相比，丹參酮ⅡA處理組（18 W）SHR的Bcl-2、Bax和p53蛋白相對(duì)表達(dá)水平差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。表明，丹參酮ⅡA能抑制SHR左心室中與細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白和p53蛋白的表達(dá)，提示丹參酮ⅡA通過抑制細(xì)胞凋亡通路來防止SHR發(fā)生左心室過度肥厚。

表2 3組SHR 18 W時(shí)心肌細(xì)胞凋亡率和蛋白表達(dá)水平的比較

表2 3組SHR 18 W時(shí)心肌細(xì)胞凋亡率和蛋白表達(dá)水平的比較

注：NAPDH：還原型輔酶Ⅱ。與空白對(duì)照組比較**P＜0.01；與溶劑對(duì)照組比較△P＜0.05△△P＜0.01。余縮略語(yǔ)注釋見表1

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圖2 蛋白免疫印跡檢測(cè)SHR 18 W時(shí)心肌組織中Bcl-2，Bax和p53蛋白表達(dá)

圖3 丹參酮ⅡA對(duì)SHR 18 W時(shí)心肌組織Bcl-2/Bax值相對(duì)表達(dá)的影響

3 討論

丹參酮ⅡA屬于丹參酮類物質(zhì)，從丹參中提取獲得。大量研究表明丹參酮ⅡA具有血管舒張[8]，抗動(dòng)脈硬化[9]，防止心律失常[10]，抗炎癥[11]等作用。臨床研究則發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能改善患者的臨床癥狀[12-14]。進(jìn)一步研究表明丹參酮ⅡA能阻滯心肌細(xì)胞中L型鈣離子通道，從而發(fā)揮鈣離子通道抑制劑的功能[15,16]。另有研究報(bào)道丹參酮ⅡA能抑制心肌細(xì)胞中核轉(zhuǎn)錄因子-кB（nuclearfactor kappa B，NF-кB）蛋白表達(dá)[11]。Zhou等[17]發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能抑制心臟中血管緊張素Ⅱ的生成，阻止兒茶酚胺向交感神經(jīng)中釋放，從而降低α/β腎上腺素受體的含量，推測(cè)其可預(yù)防SHR左心室細(xì)胞過度肥厚的發(fā)生。本研究利用HE染色法發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA處理組SHR左心室心肌細(xì)胞直徑大小和表面積均顯著低于溶劑對(duì)照組，說明丹參酮ⅡA具有抗SHR的左心室心肌肥厚功能。

已有研究報(bào)道細(xì)胞凋亡與左心室細(xì)胞過度肥厚密切相關(guān)[18]。Bcl-2蛋白是一種抗凋亡蛋白，其功能在于抑制細(xì)胞凋亡，而Bax蛋白是一種促凋亡蛋白，正常生理?xiàng)l件下促進(jìn)細(xì)胞凋亡[19]。細(xì)胞是否發(fā)生凋亡取決于Bcl-2/Bax的比例，當(dāng)Bcl-2蛋白表達(dá)量高于Bax蛋白時(shí)細(xì)胞凋亡被抑制，反之亦然[20]。p53基因是一種抑癌基因，在細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮著重要作用。研究表明，p53基因通過上調(diào)Bax蛋白和下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)進(jìn)而使細(xì)胞發(fā)生凋亡[21,22]。本研究利用TUNEL法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能夠顯著抑制SHR左心室心肌細(xì)胞的調(diào)亡，為進(jìn)一步揭示其作用機(jī)制，我們檢測(cè)了細(xì)胞凋亡相關(guān)的蛋白Bcl-2、Bax和p53在SHR經(jīng)丹參酮ⅡA作用后

左心室組織中的表達(dá)變化。結(jié)果顯示,溶劑對(duì)照組發(fā)生明顯的細(xì)胞肥厚，與空白對(duì)照組（8 W）和丹參酮ⅡA處理組（18 W）比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。與空白對(duì)照組相比，溶劑對(duì)照組（18 W）大鼠在左心室細(xì)胞過度肥厚的同時(shí)，左心室組織中Bax和p53蛋白表達(dá)也顯著增加，而抗凋亡Bcl-2表達(dá)水平顯著降低，同時(shí)Bcl-2/Bax值也隨之顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。當(dāng)給予丹參酮ⅡA后Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增加，而Bax和p53蛋白表達(dá)則被抑制，Bcl-2/Bax值水平隨之上升。本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA處理組（18 W）和溶劑對(duì)照組（18 W）SHR的收縮壓無明顯差異，提示丹參酮ⅡA預(yù)防大鼠發(fā)生左心室細(xì)胞肥厚不是通過降低血壓或改善心臟后負(fù)荷而實(shí)現(xiàn)。我們猜測(cè)SHR發(fā)生左心室細(xì)胞肥厚與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，研究結(jié)果提示丹參酮ⅡA通過抑制細(xì)胞凋亡過程最終抑制左心室細(xì)胞肥厚的發(fā)生。然而，細(xì)胞凋亡導(dǎo)致SHR左心室肥厚詳細(xì)的分子機(jī)制仍需要進(jìn)一步研究。

本研究以SHR為研究模型，發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA能抑制大鼠左心室細(xì)胞肥厚和細(xì)胞凋亡過程，其可能的分子機(jī)制在于丹參酮ⅡA通過上調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)和下調(diào)Bax和p53蛋白的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)。

[1] 樊朝美, 許莉, 楊宏, 等. 阿羅洛爾對(duì)擴(kuò)張型心肌病患者左心室功能的影響. 中國(guó)循環(huán)雜志, 2009, 23: 117-119.

[2] Sundstr?m J, Lind L, ?rnl?v J, et al. Echocardiographic and electrocardiographic diagnoses of left ventricular hypertrophy predict mortality independently of each other in a population of elderly men . Circulation, 2001, 103: 2346-2351.

[3] 章友華, 徐守春. 心臟腎素—血管緊張素系統(tǒng)與心肌肥厚, 心肌缺血再灌注損傷 . 中國(guó)循環(huán)雜志, 1992, 7: 598-600.

[4] Liu L, Yin Y, Guo G, et al. P725Anti-inflammatory effect of tanshinone IIA on oxidative-injured vascular endothelial cells is mediated by estrogen receptor activation and through ERK signaling pathway . Cardiovasc Res, 2014, 103: S132.

[5] 龔麗婭, 鄭智, 熊瑋, 等. 丹參預(yù)防自發(fā)性高血壓大鼠左心室肥厚.高血壓雜志, 2003, 11: 257-259.

[6] Yang L, Zou X, Liang Q, et al. Sodium tanshinone IIA sulfonate depresses angiotensin II-induced cardiomyocyte hypertrophy through MEK/ERK pathway. Exp Mol Med, 2007, 39: 65-73.

[7] 張海燕, 李強(qiáng). 心肌梗死后心室重構(gòu)病理過程的研究進(jìn)展. 實(shí)用老年醫(yī)學(xué), 2012, 26: 251-253.

[8] Wang P, Wu X, Bao Y, et al. Tanshinone IIA prevents cardiac remodeling through attenuating NAD（P）H oxidase-derived reactive oxygen species production in hypertensive rats. Pharmazie, 2011, 66: 517-524.

[9] Tang FT, Cao Y, Wang TQ, et al. Tanshinone IIA attenuates atherosclerosis in ApoE（-/-） mice through down-regulation of scavenger receptor expression. Eur J Pharmacol, 2011, 650: 275-284.

[10] Shan H, Li X, Pan Z, et al. Tanshinone IIA protects against sudden cardiac death induced by lethal arrhythmias via repression of microRNA-1. Brit J Pharmacol, 2009, 158: 49-50.

[11] Jang SI, Kim HJ, Kim Y, et al. Tanshinone IIA inhibits LPS-induced NF-κB activation in RAW 264. 7 cells: Possible involvement of the NIK-IKK, ERK1/2, p38 and JNK pathways. Eur J Pharmacol, 2006, 542: 1-7.

[12] Bishopric NH, Andreka P, Slepak T, et al. Molecular mechanisms of apoptosis in the cardiac myocyt . Curr Opin Pharmacol, 2001, 1: 141-150.

[13] 羅富良, 孫嘉康, 唐躍, 等. 缺血后適應(yīng)對(duì)大鼠移植心臟心肌細(xì)胞凋亡的影響. 中國(guó)循環(huán)雜志, 2013, 27: 470-472.

[14] Goga LM, Vasiliu OM, Ionescu CR. Molecular mechanisms of apoptosis. Fas and TNF systems. ICE protease system. Bcl-2 family. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi, 2001, 105: 23-29.

[15] Jiang FL, Leo S, Wang XG, et al. Effect of tanshinone IIA on cardiomyocyte hypertrophy and apoptosis in spontaneously hypertensive rats. Exp Ther Med, 2013, 6: 1517-1521.

[16] Sun L P, Zheng Z. Effect of Salvia miltiorrhiza Bge on left ventricular hypertrophy and the expression of tumor necrosis factor-alpha in spontaneously hypertensive rats. J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci, 2007, 27: 245-247.

[17] Zhou DX, Liang QS, He XX, et al. Changes of c-fos and c-jun mRNA expression in angiotensin II-induced cardiomyocyte hypertrophy and effects of sodium tanshinone IIA sulfonate . J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci, 2008, 28: 531-534.

[18] Lu F, Xing J, Zhang X, et al. Exogenous hydrogen sulfide prevents cardiomyocyte apoptosis from cardiac hypertrophy induced by isoproterenol . Mol Cell Biochem, 2013, 381: 41-50.

[19] 董麗君, 湯寶鵬, 周賢惠, 等. 心房肌基質(zhì)金屬蛋白酶及其抑制劑,凋亡相關(guān)基因表達(dá)改變與增齡性心房顫動(dòng)關(guān)系的研究. 中國(guó)循環(huán)雜志, 2014, 29: 1034-1038.

[20] Jiang H, Yu P, Qian D H, et al. Hydrogen-rich medium suppresses the generation of reactive oxygen species, elevates the Bcl-2/Bax ratio and inhibits advanced glycation end product-induced apoptosis . Int J Mol Med, 2013, 31: 1381-1387.

[21] Haines CD, Harvey PA, Luczak ED, et al. Estrogenic compounds are not always cardioprotective and can be lethal in males with genetic heart disease . Endocrinology, 2012, 153: 4470-4479.

[22] Sheng R, Gu ZL, Xie ML. Epigallocatechin gallate, the major component of polyphenols in green tea, inhibits telomere attrition mediated cardiomyocyte apoptosis in cardiac hypertrophy . Int J Cardiol, 2013, 162: 199-209.

Effect of Tanshinone IIA on Left Ventricular Hypertrophy and Cardiomyocyte Apoptosis in Spontaneous Hypertensive Rats

WANG Shi-cai, CHEN Tai-jun, HUANG Mei-song, ZHU Shao-ming.
Department of Internal Medicine, Shiyan Hospital of Integrated Traditional and Western Medicine, Shiyan （442000）, Hubei, China

Objective: To investigate the effect of tanshinone IIA （TSN） on left ventricular hypertrophy （LVH） and cardiomyocyte apoptosis in spontaneous hypertensive rats （SHRs）.

Tanshinone IIA; Spontaneous hypertensive rats; Myocardial hypertrophy; Apoptosis

2014-10-12）

（編輯：梅 平）

442000 湖北省，十堰市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 內(nèi)科

王詩(shī)才 副主任醫(yī)師 學(xué)士 研究方向?yàn)楣谛牟』A(chǔ)與臨床研究 Email：syzxywsc@163.com 通訊作者：朱少銘 Email：zhusaoming@163.com

R541

A

1000-3614（2015）07-0694-05

10.3969/j.issn.1000-3614.2015.07.019