阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清IL-6、IL-17水平變化及臨床意義*

包薩日娜高麗于韜馬國強

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清IL-6、IL-17水平變化及臨床意義*

包薩日娜①高麗①于韜①馬國強①

目的：探討阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）患者血清炎性因子白細胞介素-6（Interleukin，IL-6）、白細胞介素-17（Interleukin，IL-17）水平變化及臨床意義。方法：回顧性分析2013年5月-2014年10月間本院呼吸科門診及住院部經多導睡眠圖（Polysomnagraphy，PSG）監測確診的102例OSAHS患者，及同期本院體檢中心98例健康體檢者的一般臨床資料、睡眠呼吸暫停低通氣指數（Apnea-hypopnea index，AHI）、最低血氧飽和度（Lowest arterial oxygen saturation，LSaO2）。采集靜脈血，分離血清，酶聯免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測患者血清IL-6、IL-17水平并分析其與OSAHS的相關性。結果：與健康對照組比較，OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平均升高，差異有統計學意義（P＜0.05），且血清IL-6、IL-17水平隨OSAHS分布嚴重程度的升高而升高。OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平與AHI呈正相關（r=0.868，P＜0.05；r=0.896，P＜0.05），而與LSaO2呈負相關（r=-0.769，P＜0.05；r=-0.703，P＜0.05）。結論：血清炎性因子IL-6、IL-17水平在OSAHS組患者中升高，提示其參與OSAHS疾病進程，可以作為OSAHS嚴重程度的生物學指標。

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征； IL-6； IL-17； 酶聯免疫吸附法

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）是由于睡眠過程中部分或完全的上呼吸道阻塞，從而引起呼吸暫停或低通氣到覺醒反復發生的常見疾病[1-2]。患者常伴打鼾、睡眠呼吸暫停，白天嗜睡等癥狀，嚴重危害人類健康，現已成為呼吸疾病臨床研究的熱點領域之一。既往研究表明，OSAHS是一種炎癥性、免疫性疾病，一些炎癥因子如IL-1、8、10等都參與OSAHS的疾病進程[3-4]。先前關于IL-17的研究僅局限于其與兒童OSAHS患者發病的相關性，而鮮有報道IL-6與IL-17與成人OSAHS患者發病的相關性。為此，本研究采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）測定OSAHS組患者血清IL-6與IL-17水平并探討其與OSAHS發病的相關性，為OSAHS的早期診治提供試驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2013年5月-2014年10月

間內蒙古自治區人民醫院呼吸科門診及住院經多導睡眠圖（Polysomnagraphy，PSG）監測確診的OSAHS患者102例，其中男57例，女45例，年齡37～64歲，平均（50.41±10.25）歲，BMI（27.75±2.61）kg/m2。參照中華醫學會呼吸病學分會睡眠學組制定的《阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南》（2011年修訂版）病情分度標準[5]，將OSAHS組按病情嚴重程度分為：輕度組20例，中度組28例，重度組54例。另選取PSG監測正常者98例作為對照組，其中男56例，女42例，年齡36～62歲。各組的一般資料比較差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

1.2 納入與排除標準 納入標準：符合中華醫學會呼吸病學分會睡眠學組制定的《阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南》（2011年修訂版）診斷標準。排除標準：排除單純鼾癥、上氣道阻力綜合征、肥胖低通氣、發作性睡病、不寧腿綜合征和睡眠中周期性腿動、慢性呼吸系統疾病、心腦血管疾病、甲狀腺功能亢進或減低、急慢性肝炎、腫瘤、免疫系統等疾病。

1.3 試驗試劑及儀器 人白細胞介素-6、17 ELISA試劑盒（美國R&D公司），SM-SW2000C多導睡眠采集分析系統（中美合資北京東方萬泰技術開發有限公司），X-15R低溫高速離心機（美國Beckman Coulter公司），RT-2100C酶標儀（深圳雷杜生命科學股份有限公司）。

1.4 方法 多導睡眠采集分析系統連續7 h監測患者睡眠狀態（患者需在安靜、舒適的狀態下就寢后進行），以獲得AHI、LSaO2數據。待多導睡眠監測完成后，于次日凌晨6時抽取空腹靜脈血，促凝處理，離心（3000 rpm/min，15min），收集血清于-20 ℃冰箱保存備用。應用ELISA法測定血清IL-6、17的水平，簡明步驟如下：用純化的人IL-6、17抗體包被微孔板，制成固相抗體，加入血清樣品，再與HRP標記的IL-6、17抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-6、17含量呈正相關。用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算血清樣品中IL-6、17的含量。

1.5 統計學處理 使用SPSS 13.0統計學軟件進行分析，計量資料采用（±s）表示，比較采用t檢驗，計數資料采用 χ2檢驗，相關性分析采用直線相關分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組的睡眠監測情況比較 各組的睡眠監測結果（AHI、LSpO2）比較，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 各組的睡眠監測情況比較（±s）

表2 各組的睡眠監測情況比較（±s）

*與對照組比較，P＜0.05；△與輕度組比較，P＜0.05；#與中度組比較，P＜0.05

組別AHI（次/h）LSpO2（%）對照組（n=98） 2.50±1.3091.26±7.10 OSAHS組（n=102）31.34±9.14*77.11±10.26*輕度組（n=20）12.24±5.16*88.32±8.31*中度組（n=28）24.84±6.17*△72.47±6.54*△重度組（n=54）52.14±7.41*△#43.55±8.41*△#

2.2 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較 與對照組比較，OSAHS組的血清IL-6、IL-17水平均升高，且隨著病情程度的加重，血清IL-6、IL-17水平也升高，差異均有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較（±s） pg/mL

表3 兩組的血清IL-6、IL-17水平變化情況比較（±s） pg/mL

*與對照組比較，P＜0.05；△與輕度組比較，P＜0.05；#與中度組比較，P＜0.05

組別 IL-17 IL-6對照組（n=98）6.02±0.310.47±0.29輕度組（n=20）6.89±0.21*1.59±0.23*中度組（n=28）7.67±0.27*△3.43±0.76*△重度組（n=54）8.54±0.31*△#7.83±1.42*△#OSAHS組

2.3 各組的血清IL-6、IL-17水平與睡眠呼吸監測指標（AHI、LSaO2）的相關性分析 OSAHS組各組的血清IL-6、IL-17水平分別與睡眠呼吸監測指標AHI呈現正相關（r=0.868、0.896），差異均有統計學意義（P＜0.05）。而OSAHS組血清IL-6、IL-17水平分別與LSaO2呈負相關（r=-0.769、-0.703），差異均有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes，OSAHS）是臨床上常見、多發的疾病，由睡眠過程中反復出現的上呼吸道塌陷所致的上氣道部分或者完全阻塞、氣流受限，導

致了反復的間歇性低氧血癥和高碳酸血癥，進而誘發機體發生一系列的病理生理改變的臨床綜合征，最終導致高血壓、冠心病等心血管疾病[6-7]。由于長期的間歇性缺氧，OSAHS患者的高碳酸血癥使中性粒細胞等細胞應激性增多，相關炎癥細胞因子濃度隨之增加。既往研究表明，OSAHS是多種炎性因子參與繼而導致的一個慢性炎癥的過程。多種炎性因子及細胞如腫瘤壞死因子-α、白介素家族、C反應蛋白等都參與患者睡眠時睡眠結構紊亂的發生及發展的過程[8-10]。

IL-6是重要的免疫調節因子，能夠參與到體液免疫調節與肺部的炎癥病理過程中，出現在炎癥反應急性期。在局部損傷激活炎癥細胞后，IL-6的分泌會增加，能促進炎癥反應的進行，其水平能夠反映肺部的感染程度[11-12]。而在OSAHS患者中，由于血清IL-6水平的升高使缺氧所導致的應激性升高，并非機體主動的病理反應，因而容易導致血管壁損傷、內皮細胞增生等，進而刺激機體產生其他炎癥因子，加重炎癥反應，最終引起心血管系統的損害，引發心血管系統疾病[13-14]。同時，缺氧引起的低氧血癥和高碳酸血癥能使交感神經興奮，導致血中兒茶酚胺類物質的濃度升高，又進一步促進IL-6分泌，導致OSAHS患者血清IL-6水平的上升[15]。

IL-17是近年來發現一種新型的不同于Th1、Th2的CD4+效應T細胞，稱為Th17細胞，該細胞產生IL-17，IL-17作為一種前炎性因子，在炎癥性疾病中也發揮著重要調節作用[16-17]。目前研究表明IL-6、IL-17通過細胞信號轉導激活核因子NF-κB通路，使炎癥介質和細胞因子的基因轉錄增強[18]。而OSAHS引起的間歇低氧和再氧合，直接損害內皮細胞，可激活炎癥反應的關鍵因子和啟動因子NF-κB，因此筆者推測，IL-6、IL-17在OSAHS疾病的發展過程中也發揮了重要的作用。

筆者的研究結果發現，OSAHS患者IL-6、IL-17血清水平較健康對照組增高，提示IL-6、IL-17參與OSAHS形成，且IL-6、IL-17水平與OSAHS嚴重程度呈正比，提示IL-6、IL-17在OSAHS的發生發展過程中也發揮了重要作用，并有利于評估OSAHS的嚴重程度。同時，OSAHS患者IL-6、IL-17血清水平與睡眠呼吸監測指標AHI呈現正相關，與LSaO2呈負相關，說明IL-6、IL-17這兩個指標在一定程度上能夠反應OSAHS疾病進程。

OSAHS可能是一種炎癥相關性的疾病，OSAHS患者體內炎性因子水平顯著升高可能是誘發和加重OSAHS的重要調控機制之一，IL-6、IL-17是否可作為OSAHS發生其他并發癥的預測因子仍有待進一步證實。

[1]姚莉.不同程度阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征危險因素的相關性研究[J].中外醫學研究，2014，12（9）：19-20.

[2]郝晴虹，鄧文暉.CPAP治療中重度阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征的療效分析[J].中外醫學研究，2013，11（33）：31-32.

[3]張勁松，黃文靜，沈觀樂，等.C反應蛋白及相關炎性因子變化在OSAHS中的價值觀察和分析[J].北方藥學，2015，12（7）：114-115.

[4]張淑文，趙國鋒，劉亞輝，等.OSAHS患者血清MIF和IL-18水平變化[J].大連醫科大學學報，2015，37（4）：372-375.

[5]何權瀛，王莞爾.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征診治指南（基層版）[J].中國呼吸與危重監護雜志，2015，14（4）：398-405.

[6] Punjabi N M.The epidemiology of adult obstructive sleep apnea[J].Proc Am Thorac Soc，2008，5（2）：136-143.

[7]周麗芹.持續性氣道正壓通氣對老年阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者心血管合并癥的影響[J].中外醫學研究，2014，12（31）：27-28.

[8] Hatipoglu U Rubinstein I.Inflammation and obstructive sleep apnea syndrome pathogenesis： a working hypothesis[J].Respiration，2003，70（6）：665-667.

[9] Ryan S，Mcnicholas W T.Intermittent hypoxia and activation of inflammatory molecular pathways in OSAS[J].Arch Physiol Biochem，2008，114（4）：261-266.

[10]許萍，陳蘭珍，沈海診，等.重度阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征圍手術期護理體會[J].中外醫學研究，2013，11（17）：101-102.

[11]李錦，郭瑞雪，王金虎.血清TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10在兒童肺炎支原體肺炎中的應用價值[J].中國現代藥物應用，2015，9（16）：20-21.

[12]孫真，薛穎，王東霞，等.血清HGF和IL-6水平與非小細胞肺癌預后的相關性研究[J].局解手術學雜志，2015，24（4）：403-405.

[13]趙鵬展，胡克，崔忠惠，等.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者呼出氣冷凝液中TNF-α、IL-6的研究[J].臨床肺科雜志，2011，16（4）：620-622.

[14]徐健，黃平，李志瑩，等.持續氣道正壓通氣對阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者外周血IL-6影響的Meta分析[J].國際呼吸雜志，2014，34（3）：191-195.

[15]馬建國.經鼻持續正壓通氣對OSAHS 患者血清CRP、IL-6 水平的影響[J].山東醫藥，2011，51（43）：82-83.

[16]賀學文.阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征的臨床分析[J].中外醫學研究，2012，10（20）：121-122.

[17] Sade K，Fishman G，Kivity S，et al.Expression of Th17 and Treg lymphocyte subsets in hypertrophied adenoids of children and its clinical significance[J].Immunol Invest，2011，40（6）：657-660.

[18]湯榮華，黃建軍.類風濕性關節炎患者血清GM-CSF、IL-6、IL-17和TNF-α的水平測定及臨床意義[J].檢驗醫學，2013，28（3）：173-177.

The Change and Clinical Significance of Serum IL-6 and IL-17 Levels in Patients with Obstructive Sleep Apnea-hypopnea Syndromes/

BAO Sarina，GAO Li，YU Tao，et al.//Medical Innovation of China，2015，12（32）：005-007

Objective：To discuss the change and clinical significance of serum IL-6 and IL-17 levels in patients with obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes （OSAHS）.Method：102 patients with OSAHS who were diagnosed by polysomnagraphy （PSG） and 98 cases of healthy as control group were selected from May 2013 to Octomber 2014，the general clinical data， apnea-hypopnea index （AHI） and lowest arterial oxygen saturation （LSaO2） of them were retrospectively analyzed.The serum IL-6 and IL-17 levels were determined by enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）， and its correlation with OSAHS were analyzed. Result： Compared with the control group，the serum IL-6 and IL-17 levels of OSAHS patients increased and increased with the severity of OSAHS，there was statistically significant difference between them（P＜0.05）.The serum IL-6 and IL-17 levels of OSAHS patients presented positively correlated with AHI（r=0.868，P＜0.05；r=0.896，P＜0.05），but negatively correlated with LSaO2（r=-0.769，P＜0.05；r=-0.703，P＜0.05）.Conclusion：The levels of serum inflammatory cytokines IL-6 and IL-17 are higher in OSAHS group，suggests its participation in OSAHS disease process，and it can be used as biological index of the severity of OSAHS.

Obstructive sleep apnea-hypopnea syndromes； IL-6； IL-17； Enzyme-linked immunosorbent assay

10.3969/j.issn.1674-4985.2015.32.002

2015-08-17） （本文編輯：周亞杰）

內蒙古自治區自然科學基金項目（2011MS1179）

①內蒙古自治區人民醫院 內蒙古 呼和浩特 010017

馬國強

First-author’s address：Inner Mongolia Autonomous Region People’s Hospital，Hohhot 010017，China