軟棗獼猴桃良種選育研究進(jìn)展

馮 健，曾凡順，王 嘉，李 程 (遼寧省林業(yè)科學(xué)研究院，遼寧沈陽(yáng)110032)

軟棗獼猴桃(Actinidia arguta)，又名軟棗子、藤瓜、藤棗、獼猴梨，屬于獼猴桃科(Actinidiaceae)獼猴桃屬 (Actinidia)的多年生落葉藤本植物。軟棗獼猴桃是9種光果獼猴桃種類之一，珍貴的野生果中之王，被譽(yù)為“世界之珍果”。軟棗獼猴桃是獼猴桃屬植物中在中國(guó)地域分布最廣泛的野生果樹之一。軟棗獼猴桃生長(zhǎng)于海拔150～900 m之間的闊葉林或針闊葉混交林中，分布于我國(guó)的東北、山東、華北、西北地區(qū)及長(zhǎng)江流域各地，以我國(guó)東北三省的野生資源最為豐富，其中，小興安嶺和長(zhǎng)白山山區(qū)較多見。另外，朝鮮、日本、俄羅斯(遠(yuǎn)東地區(qū))也有分布。軟棗獼猴桃營(yíng)養(yǎng)豐富，維生素C含量高，素有“VC之王”的美譽(yù)，是一種上好的保健食品，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。軟棗獼猴桃的根、莖、葉及果實(shí)均可入藥，具有一定的藥用價(jià)值。軟棗獼猴桃還是一種優(yōu)美的庭園觀賞樹，它的美觀奇特遠(yuǎn)非一般花木可比，用于造園配景，可謂一絕。另外，軟棗獼猴桃花還可用來(lái)提取香料，也是豐富的蜜源植物［1］。

目前，由于資源保護(hù)、良種選育及配套豐產(chǎn)栽培技術(shù)等方面的原因，軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展進(jìn)程相對(duì)遲緩，筆者通過(guò)對(duì)軟棗獼猴桃良種選育現(xiàn)狀進(jìn)行論述，旨在為軟棗獼猴桃良種選育及產(chǎn)業(yè)化提供理論指導(dǎo)。

1 軟棗獼猴桃良種選育的現(xiàn)狀

國(guó)外對(duì)軟棗獼猴桃資源的開發(fā)利用較早，并且進(jìn)行了大量研究工作。在軟棗獼猴桃資源開發(fā)利用中，日本處于領(lǐng)先地位，有學(xué)者對(duì)日本境內(nèi)分布的軟棗獼猴桃資源進(jìn)行了詳細(xì)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)日本各州縣分布的軟棗獼猴桃有2倍體、4倍體、6倍體、7倍體和8倍體，倍性上有很大的變異性。日本利用這些資源培育的軟棗獼猴桃品種多達(dá)9個(gè)(峰香、香粹、里泉、山形娘、雪娘、花之井、茂綠、光香、信山)。韓國(guó)從20世紀(jì)90年代就開始了軟棗獼猴桃品種篩選工作，并且與美味獼猴桃品種雜交，培育出一些優(yōu)良品種。目前，韓國(guó)從野生軟棗獼猴桃中篩選出‘Chiak’、‘Congsan’和‘Gwangsan’3個(gè)純軟棗獼猴桃品種，其具有抗寒、抗病和早熟的特點(diǎn)，適合北方寒冷地區(qū)栽培;以軟棗獼猴桃為父母本育成了‘Bidan’、‘Bangwoori’、‘Skinny Green’、‘Book’和‘Bohua’5 個(gè)軟棗獼猴桃的雜交種，其果個(gè)大，且多數(shù)無(wú)毛，但耐寒性較差，生育期較長(zhǎng)，適合較溫暖地區(qū)栽培［2］。

我國(guó)有豐富的軟棗獼猴桃基因資源，但開發(fā)利用的較少，至今選育出軟棗獼猴桃品種和優(yōu)良品系主要有:‘魁綠’、‘豐綠’、‘8401’、‘9701’、‘8134’、‘遼丹 － 34’、‘遼恒 －8301’、‘遼清 8301’、‘遼 清 8401’、‘遼清 8405’、‘遼 清8406’、‘遼清 8410’、‘遼 清 8411’、‘遼清 8413’、‘遼 清8501’、‘遼本 －蘭1號(hào)’、‘遼本 －連焦1號(hào)’、‘軟果二號(hào)’、‘A －1’、‘81 －18’等［3－6］。

隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展，分子標(biāo)記作為種質(zhì)資源遺傳多樣性檢測(cè)的有效工具，在探討種內(nèi)及其近緣種屬植物的起源、進(jìn)化等方面應(yīng)用越來(lái)越多。樸一龍等對(duì)東北原生種獼猴桃的軟棗、狗棗及葛棗獼猴桃種質(zhì)進(jìn)行了RAPD研究并建立了指紋圖譜，確定了種間親緣關(guān)系和種內(nèi)雄株與雌株之間遺傳距離［7］。有學(xué)者利用RAPD技術(shù)對(duì)長(zhǎng)白山區(qū)8個(gè)縣市30個(gè)取樣點(diǎn)采集的軟棗獼猴桃樣品進(jìn)行遺傳多樣性分析，結(jié)果表明，長(zhǎng)白山區(qū)野生軟棗獼猴桃各居群樣品存在一定程度的地理區(qū)域聚類趨勢(shì)，遺傳變異與地理距離間沒(méi)有顯著的相關(guān)性。也有學(xué)者對(duì)遼寧地區(qū)5種野生軟棗獼猴桃進(jìn)行RAPD遺傳多樣性分析，建立了親緣關(guān)系樹形圖。王佳卉基于NCBI公共數(shù)據(jù)庫(kù)中獼猴桃屬的EST為軟棗獼猴桃開發(fā)SSR，并對(duì)36份軟棗獼猴桃的雌株進(jìn)行遺傳多樣性分析。將獲得的141對(duì)有效性引物在36份軟棗獼猴桃材料上進(jìn)行擴(kuò)增，其中110對(duì)引物具有多態(tài)性，多態(tài)性頻率為78.01%。每對(duì)引物的等位基因有1～6個(gè)，平均2.35個(gè)。將110個(gè)多態(tài)性標(biāo)記的數(shù)據(jù)用于36份軟棗獼猴桃材料的遺傳多樣性分析，遺傳相似系數(shù)為0.58 ～0.95，平均為0.68。相似系數(shù)約為 0.68時(shí)，36份軟棗獼猴桃材料被分為7組［8］。

2 軟棗獼猴桃苗木繁育技術(shù)現(xiàn)狀

目前，有關(guān)軟棗獼猴桃苗木繁育的研究主要集中在扦插和組織培養(yǎng)等無(wú)性繁殖技術(shù)方面。在扦插研究中，主要研究了基質(zhì)、激素種類和濃度、穗材等對(duì)扦插育苗的影響。在組織培養(yǎng)研究中，主要從培養(yǎng)基、外源激素種類和濃度、外植體等方面進(jìn)行了研究。

2.1 軟棗獼猴桃扦插育苗技術(shù)研究進(jìn)展 研究表明，影響軟棗獼猴桃扦插成功與否的關(guān)鍵因素包括穗材、基質(zhì)、激素種類和濃度。穗材是影響軟棗獼猴桃的重要因素之一。在穗材選取方面，如果采用嫩枝扦插，穗材要求粗度＞0.5 cm，半木質(zhì)化新生枝條為最佳扦插材料;如果采用硬枝扦插，應(yīng)選取1年生枝條［9］。除了嫩枝和硬枝對(duì)軟棗獼猴桃扦插生根有影響外，穗材的選取部位、時(shí)間等也影響扦插生根率。龍茹等在研究不同部位的插穗對(duì)生根率的影響試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，軟棗獼猴桃枝條上部的插穗在生根率、生根數(shù)量、根長(zhǎng)上都比枝條基部的插穗表現(xiàn)好，因此在軟棗獼猴桃大規(guī)模扦插中應(yīng)盡量采取枝條上部作為插穗［10］。在基質(zhì)選取方面，黃祥童等研究表明，扦插基質(zhì)以浮石30.0% 、草炭土40.0%、枯葉粉碎物27.5%、木炭2.5%為最佳基質(zhì)［11］。趙淑蘭等研究表明，細(xì)爐灰也是軟棗獼猴桃扦插的理想基質(zhì)，以細(xì)爐灰為基質(zhì)，插條生根率可達(dá)71.6%［12］。外源激素能顯著提高軟棗獼猴桃插穗的生根能力，且對(duì)提早生根有一定的作用，但不同種類、不同濃度的外源激素處理的插穗之間生根情況不同。研究表明，ABT生根粉是軟棗獼猴桃扦插的最佳外源激素。黃祥童等研究表明，200 mg/L ABT1號(hào)生根粉處理0.5 h生根率最高［11］。龍茹等研究了12個(gè)激素處理組合，以100 mg/L ABT處理的生根率最高，而綜合生根率、不定根數(shù)量和最長(zhǎng)根的長(zhǎng)度等3項(xiàng)指標(biāo)，以200 mg/L ABT處理和200 mg/L IAA處理的效果最佳［10］。王占勤采用不同濃度的奈乙酸、3721生根液和258ABT生根粉分別處理軟棗獼猴桃插穗，之后進(jìn)行扦插試驗(yàn)。結(jié)果表明，用3721生根液200倍浸穗2 h，50倍浸穗30 s處理的野生軟棗獼猴桃插穗發(fā)芽率、成活率及當(dāng)年新條生長(zhǎng)量、生根數(shù)量和根系生長(zhǎng)量均優(yōu)于其他處理，發(fā)芽率均達(dá)40%以上，成活率分別為23.83%、21.33%;成活發(fā)芽率分別為58.04%、46.95%，平均新條生長(zhǎng)量分別為13.8、13.5 cm;平均生根數(shù)分別為22.3、21.3 條;平均根系長(zhǎng)度分別為10.3、9.0 cm。因此，3721生根液可作為軟棗獼猴桃扦插繁育的優(yōu)良生根劑［13］。

2.2 軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展 目前，已基本建立起軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)技術(shù)體系，研究?jī)?nèi)容主要集中在外植體、培養(yǎng)基、外源激素等影響組織培養(yǎng)的關(guān)鍵因素。在外植體選取上，已有學(xué)者分別以莖段、葉塊、葉柄、腋芽、莖尖和未成熟胚等作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)并獲得了成功。在培養(yǎng)基的選擇上，主要使用MS培養(yǎng)基，也有學(xué)者使用1/2MS培養(yǎng)基。在激素使用方面，多使用 IBA、NAA、2，4-D、BA、ZT等外源激素，根據(jù)外植體、培養(yǎng)階段的不同，選擇一種或者幾種激素及相應(yīng)的濃度。劉延吉等以5個(gè)野生軟棗獼猴桃品種(H1、H2、H3、H4和H5)莖段為外植體，采用6-BA 和 NAA的組合進(jìn)行研究，篩選適宜于野軟棗獼猴桃各品種快繁的最佳培養(yǎng)基，建立起軟棗獼猴桃離體培養(yǎng)快繁體系［14］。胡皓等研究了軟棗獼猴桃“魁綠”的試管苗增殖、生根移栽技術(shù)。結(jié)果表明，試管苗繼代增殖適宜培養(yǎng)基為MS+BA 4.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L，30 d 增殖系數(shù)達(dá) 5.8;適宜生根的培養(yǎng)基為 1/2MS+IBA 1.0 mg/L，生根率達(dá) 87.11%［15］。鄭小華研究表明，軟棗獼猴桃莖段愈傷組織誘導(dǎo)中的基本培養(yǎng)基以MS培養(yǎng)基為最佳。莖段愈傷組織誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為MS+BA 3.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L，愈傷組織再生芽分化的最佳培養(yǎng)基為 MS+BA 3.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L，生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.2 mg/L，生根率高達(dá) 85.89%，增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為 MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+GA30.1 mg/L，月增殖系數(shù)達(dá)5.33［16］。張喜春以軟棗獼猴桃葉片為試材，以MS為基本培養(yǎng)基，附加生長(zhǎng)素(2，4-D、NAA)和玉米素(ZT)成功地誘導(dǎo)出愈傷組織。軟棗獼猴桃葉片在MS+ZT 1 mg/L+2，4-D 3 mg/L的情況下能誘導(dǎo)出適合于建立懸浮細(xì)胞系的愈傷組織。另外，張喜春還研究了愈傷組織生長(zhǎng)年齡、激素濃度、肌醇和蔗糖濃度4個(gè)方面對(duì)建立慈浮細(xì)胞系的影響，結(jié)果表明愈傷組織以生長(zhǎng)10 d時(shí)接種活細(xì)胞率最高，以MS培養(yǎng)基附加ZT 1 mg/L+2，4－D 3 mg/L較好，肌醇以200 mg/L圓形細(xì)胞頻率最高，蔗糖以5%最適。另外，秦永華［17］、朱道圩等［18］、李昌禹等［19］、田新華等［20］、劉長(zhǎng)江等［21］、樸一龍等［22］、牛曉林［23］等也報(bào)道了軟棗獼猴桃組織培養(yǎng)成功的例子。

3 軟棗獼猴桃良種選育存在問(wèn)題及對(duì)策

軟棗獼猴桃在我國(guó)分布較廣，東北三省的資源最為豐富，是東北的優(yōu)勢(shì)資源。其果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，可生食亦可做成果醬、果酒等，同時(shí)還具有一定的藥用價(jià)值。另外，其樹體具有觀賞價(jià)值。所以，軟棗獼猴桃是很有開發(fā)利用前景的野生漿果類果樹。然而，軟棗獼猴桃良種選育進(jìn)程遲緩，嚴(yán)重制約了軟棗獼猴桃產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。

(1)資源豐富，但是遺傳資源收集和保存力度不夠。軟棗獼猴桃在我國(guó)分布范圍廣，資源豐富，但是對(duì)其遺傳資源保護(hù)和利用的研究少。因此，應(yīng)對(duì)資源進(jìn)行全面系統(tǒng)調(diào)查，建立品種資源庫(kù)，收集和保存種質(zhì)資源，查明其分布、種類，加強(qiáng)生物多樣性方面的研究。為今后育種打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

(2)良種選育進(jìn)程無(wú)法滿足生產(chǎn)需求。目前，軟棗獼猴桃已經(jīng)選育出一批良種，如“魁綠”、‘8134’、‘遼丹 －34’、‘遼恒－8301’、‘遼清 8301’、‘遼本一蘭 1號(hào)’、‘軟果二號(hào)’、‘81－18’等品種，但是，上述品種大部分是20世紀(jì)80～90年代選育的品種，品種數(shù)量和質(zhì)量已無(wú)法滿足生產(chǎn)上對(duì)品種的多樣性需求。因此，應(yīng)利用資源調(diào)查發(fā)現(xiàn)并篩選優(yōu)良株系，培育新品種。同時(shí)，在進(jìn)行生物多樣性研究的基礎(chǔ)上，利用各種資源設(shè)置雜交組合，培育出優(yōu)良品種。

(3)苗木繁育技術(shù)較單一。目前，軟棗獼猴桃苗木繁育主要依靠扦插進(jìn)行繁殖。雖然在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建立起軟棗獼猴桃的組織培養(yǎng)技術(shù)體系，但是在生產(chǎn)上采用組織培養(yǎng)技術(shù)的仍未見報(bào)道。因此，應(yīng)加強(qiáng)軟棗獼猴桃苗木繁育技術(shù)的研究和推廣工作，使軟棗獼猴桃苗木生產(chǎn)達(dá)到規(guī)模化、設(shè)施化技術(shù)水平，從而滿足生產(chǎn)實(shí)踐對(duì)苗木的需求。

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