女性HPV基因型分布與宮頸病變的相關性分析

李紹條 孫蕾蕾 林興園

·流行病學調查·

女性HPV基因型分布與宮頸病變的相關性分析

李紹條 孫蕾蕾 林興園

目的 觀察浙江省蒼南縣女性人乳頭瘤病毒（HPV）基因型的分布特點，并分析其與宮頸病變之間的相關性。方法 采用HybriMax和液基薄層細胞學（TCT）檢測2126例門診體檢婦女。結果 2126例體檢者HPV陽性率為14.91%（317/2126），其中20例為雙重感染，7例為三重感染。除HPV43、HPV44、HPV73等HPV基因亞型未檢出外，其余均被檢出，其中HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發生率最高，是宮頸感染HPV的主要亞型；TCT檢測陽性率為6.63%（141/2126），TCT陽性的HPV感染率為67.38%（95/141），其中慢性炎癥為60.0%（51/85），宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅰ為68.0% （17/25）、CINⅡ為80.0%（12/15）、CINⅢ為91.67%（11/12）、宮頸鱗狀細胞癌（SCC）為100%（4/4）；HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴重程度增加而明顯升高（P＜0.05）。結論 HPV基因分型檢測對HPV感染的流行病學調查、HPV不同基因亞型的感染歷程及HPV感染在宮頸病變發生、發展過程中的作用等均具有十分重要的意義。

人乳頭瘤病毒 流行病學 基因分型 宮頸癌 液基薄層細胞學

宮頸癌的發生率僅低于乳腺癌的女性惡性腫瘤疾病，而導致宮頸癌及其癌前病變發生的重要誘發因素主要為高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續性感染［1，2］。相關文獻報道認為［3］，不同HPV基因型所致感染均有顯著的地域差異性，且致病能力和造成的病情預后情況亦有明顯的差異性。因此本文擬觀察浙江省蒼南縣女性HPV基因型的分布特點，并分析其與宮頸癌、癌前病變之間的相關性。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2126例婦女均為本院門診2013年1月至2014年3月期間行HPV基因分型檢測和液基薄層細胞學檢測（TCT）的體檢者，平均年齡為（37.5±8.7）歲，上述所有婦女均來自浙江蒼南縣地區。

1.2 實驗儀器及試劑 PCR擴增儀（美國ABI 9700型PCR擴增儀），核酸分子快速導流雜交儀（HybriMax）為潮州凱普生物科技有限公司產品，儀器TIB1000液基細胞學制片機（廈門泰普生物有限公司），HPV基因微陣列分型檢測試劑盒（香港凱普公司）。

1.3 HPV基因型檢測方法 采用專用刷收集所有體檢者宮頸移行帶部位的脫落細胞，使用細胞存儲液將上述細胞標本予以保留，3d內采用HybriMax法對HPV基因型進行檢測，可同時檢出23種HPV-DNA亞型基因，其中18種高危型HPV：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV83、HPVMM4；5種低危型HPV：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.4 TCT檢測方法及結果判斷 （1）TCT檢測方法：首先清除干凈體檢婦女宮頸表面的黏液組織，采用專用刷順時針轉動3～5圈以收集宮頸轉化區細胞，立即將上述細胞標本保存在專用保存瓶中，隨后上機行薄片涂片染色，TCT制片結束后均在顯微鏡下由病理醫生閱片予以診斷。（2）TCT結果判斷：根據病理學診斷對宮頸病變予以評判，分為：慢性炎癥；宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸鱗狀細胞癌（SCC）。

1.5 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件。計數資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV檢測結果 2126例體檢者行HPV檢測共檢出317例陽性結果，HPV陽性率為14.91%（317/2126），其中20例為雙重感染，7例為三重感染。除HPV43、HPV44、HPV73等HPV基因亞型未檢出外，其余均被檢出，其中HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發生率最高，是宮頸感染HPV的主要亞型。見表1。

2.2 TCT檢測結果 體檢婦女TCT檢測陽性率為6.63%（141/2126），TCT陽性的HPV感染率為67.38%（95/141），其中慢性炎癥為60.0%（51/85），CINⅠ為68.0%（17/25）、CINⅡ為80.0%（12/15）、CINⅢ為91.67%（11/12）、SCC為100%（4/4）。

2.3 宮頸病變患者與HPV感染的相關性 HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴重程度增加而明顯升高（P＜0.05），見表2。

表1 HPV陽性體檢者中HPV基因亞型分布及其TCT陽性比例

表2 宮頸病變患者與HPV感染的相關性

3 討論

流行病學調查結果顯示，女性人群中HPV感染發生率可＞20%［4］，而行HPV DNA檢測對早期發現宮頸癌前病變、判斷預后情況、早期選擇治療方案和減少疾病發生率、患者病死率等均具有十分重要的意義。但HPV基因型在不同國家和地區宮頸癌婦女的表達存在顯著性差異［5］。

HybriMax技術檢測HPV基因型的作用原理為將針對不同HPV基因型的特異HPV探針固定在芯片膜上，樣本組織PCR擴增產物變性后經負壓導流作用穿過芯片膜，與膜中HPV特異性探針相互結合從而形成復合物，最后使用酶底物與探針中的酶反應顯色對HPV基因型予以檢測，此方法可檢出23種HPV基因型［6，7］。本資料結果顯示，2126例體檢者HPV陽性率為14.91%（317/2126），HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴重程度增加而明顯升高（P＜0.05），提示高危型HPV感染與宮頸病變病理類型程度呈正相關。此外，HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發生率最高，是宮頸HPV感染的主要基因亞型，提示HPV16、HPV58、HPV52均具有較高的危險性和致病性，與我國東南地區相關文獻報道一致［8］，而與國外研究存在較大差異性，進一步證實HPV感染存在較大的地區差異性［9］。因此在宮頸癌早期篩查方面，HPV基因分型具有較高的檢測意義，在TCT檢測結果陰性篩查出高危型HPV感染的人群，有助于病情監控、早期發現和治療宮頸組織病變。可將HPV、TCT檢查結果為陰性者的篩查間隔延長至3年/次。

1 黃珍花．人乳頭瘤病毒感染與宮頸病變關系研究進展．國際檢驗醫學雜志,2011,32(2):221～222．

2 王貴宇,劉春江,彭倩,等．人乳頭狀瘤病毒感染與子宮頸病變的關系探討．中華醫院感染學雜志,2010,20(11):1628～1630．

3 Munoz N, Bosch FX, Sanjose S, et al． Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer．N Engl J Med,2003,348(6):518～5274．

4 Damasus AG,Freeman WT．Human papillomavirus and cervical screening．Current Opinion in Obstetrics and Gynecology,2003,15(6): 473～477．

5 張麗娜,周蓓蓓,陳昕華,等．區域性人乳頭瘤病毒基因型別檢測臨床研究．中國婦幼保健,2010,25(16):1147～1149．

6 廖秦平,趙康．人乳頭瘤病毒分型檢測在臨床工作中的應用．中國實用婦科與產科雜志,2010,26(5):331～333．

7 黃杰,曲守方,包蕾．人乳頭瘤病毒基因分型檢測方法進展．藥物分析雜志,2010,30(8):1562～1566．

8 趙戴君,龔向真．上海市社區子宮頸人乳頭瘤病毒感染現況及危險因素研究．現代預防醫學,2010,37(10):1867～1872．

9 Ronco G, Ghisetti V, Segnan N,et al． Prevlence of human papilliomavirus infection in women in Turin Italy Eur．J Cancer,2005,41(2):297～305．

浙江省蒼南縣科技計劃項目（2013S03）

235802浙江省蒼南縣第二人民醫院病理科