益母草堿對梗死后心衰大鼠的實驗研究※

徐玉平 錢海兵

（1凱里學院化學與材料工程學院，凱里556011；2貴陽中醫學院基礎醫學院，貴陽550002）

益母草堿對梗死后心衰大鼠的實驗研究※

徐玉平1，2錢海兵2*

（1凱里學院化學與材料工程學院，凱里556011；2貴陽中醫學院基礎醫學院，貴陽550002）

目的研究益母草堿對心衰后左心室結構及心功能的影響。方法采用冠狀動脈結扎法制備長期心梗致心衰模型。雄性SD大鼠隨機分為5組：假手術組，模型組，益母草堿高、低劑量組（30mg·kg-1·d-1、15mg·kg-1·d-1）和卡托普利陽性對照組（30 mg·kg-1·d-1）。灌胃給藥6周后，行心臟超聲學檢查EF、FS、LVPW和LVAW等指標，觀察心功能改變，計算心重指數和肺重指數。結果益母草堿高劑量能明顯降低HW、LungW eight、Lung W eight/BW，與心衰模型組比較有統計學意義。結論益母草堿通過降低心重、肺重及肺重指數以減輕心衰大鼠的心臟肥大和肺淤血，對心衰后的心功能有一定保護作用。

益母草堿；慢性心力衰竭；心功能；左心室結構；實驗研究；大鼠

益母草堿為益母草的主要有效成分之一，具有保護腦缺血、保護心肌缺血、保肝等藥理作用［1-2］。本課題組前期研究發現，益母草堿對急性心肌梗死造成的心肌缺血和心肌細胞損害具有良好的預防性保護作用，但并未對長期梗死所致的心衰作用以及作用機制進行研究，因此，本研究將在前期研究的基礎上，采用整體動物實驗，觀察益母草堿對心衰大鼠左心室結構及心功能的影響，并初步探討其改善梗死后心衰的作用機制。本研究的完成將為益母草堿在心血管疾病方面的進一步開發奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試藥與動物卡托普利片（中美上海施貴寶制藥有限公司）；益母草堿（復旦大學提供純度大于98%）。雄性SPF級SD大鼠，體重180～220 g，由復旦大學藥學院動物中心提供。（證書編號:2008001616687）。

1.2 儀器小動物呼吸機（DHX-I50成都儀器廠）；臺式高速冷凍離心機（306110700 Thermo）；全套手術器械（醫用縫合針線、氣管插管、開胸器等）。

1.3 方法

1.3.1 大鼠心梗致心衰模型制備，參照Zhu［3］等方法雄性SD大鼠，180～220 g，7%水合氯醛（0.5 m l/100 g）腹腔麻醉動物后，用膠圈將大鼠四肢仰面固定于手術臺，接小動物呼吸機，氣管插管。自左側3～4肋間隙逐層打開胸腔，6～0號絲線于左心耳下方約2～3 mm處永久性結扎冠脈左前降支，結扎后如見心尖變白、左心室壁被動跳動，心臟出現因缺血而致的顏色改變認為手術成功。在此模型成功的基礎上，不做任何其它操作，自然、常規飼養6周，存活下來的動物采用超聲心動圖檢測，證明為梗死后心衰模型成功的用在后續實驗中。

1.3.2 實驗動物分組及給藥冠脈結扎48 h后存活下來的大鼠，隨機分為以下5組：1）心衰模型組（CHF）；2）益母草堿高劑量組（leonurine 30 mg·（kg·d）-1）；3）益母草堿低劑量組（leonurine 15 mg·（kg·d）-1；4）陽性藥卡托普利組（Captopril 30 mg·（kg·d）-1；5）假手術組（sham）。術后各自進行藥物干預，除心衰模型組和假手術組給予生理鹽水外，其余各組按相應劑量灌胃給藥，每日一次，連續6周。

1.3.3 一般情況觀察每隔兩天稱一次體重，記錄下數據，連續3天腹腔注射青霉素以防傷口感染死亡，同時注意觀察大鼠的行動、毛發，進食和飲水量以及精神狀態，有無死亡等情況。

1.3.4 心臟超聲檢查藥物干預6周后，1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉動物，超聲心動圖檢測心衰大鼠LVPW、LVAW、EF及FS等指標。

1.3.5 心重指數及肺重比測定處死大鼠后，迅速取出心臟，生理鹽水清洗，濾紙吸干，天秤稱量全心重（HW）、肺重（Lung Weight），計算心重指數［全心重/體重（HW/BW）］和肺重比（LungWeight/BW）。

1.3.6 統計學分析采用SPSS17.0統計軟件處理實驗數據。所有數據用（x±s）表示。

2 結果

2.1 一般情況觀察心衰模型制備成功后，各組大鼠出現心悸氣喘、水腫、呼吸微弱、四肢爪甲紫黯、毛色無光等癥狀，與臨床充血性心力衰竭的癥狀相似。藥物干預治療6周后，給藥組上述癥狀較心衰模型組有改善，而單純手術組總體上有加重趨勢。

2.2 益母草堿對心衰大鼠心功能的影響與假手術組相比，冠脈結扎后6周模型組LVPW、LVAW、EF、FS等指標顯著降低（P＜0.05），提示心衰后大鼠心室壁拉長、變薄、左心收縮功能受損，藥物干預后各指標沒有明顯變化，說明益母草堿以及陽性藥卡托普利均很難改善長期心梗所致心衰后大鼠的心臟結構和功能。結果見圖1、表1。

圖1 各組大鼠心超圖片比較

表1 各組大鼠超聲心動圖檢測指標（x±s）

2.3 益母草堿對心衰大鼠肺淤血的影響結果表明，冠脈結扎6周后，各組間大鼠體重并無明顯變化。而心衰組心重指數與假手術組比較顯著上升。這個上升趨勢在急性期可能與心肌梗死后引發的炎癥和水腫有關，而在慢性期則可能是心臟發生肥大和擴張有關，而益母草堿雖然沒有明顯降低該指數但卻顯著降低了全心重量（P＜0.05）。心衰組肺重相對假手術組明顯升高，這可能與心衰后引起肺淤血有關，益母草堿30mg/kg明顯減輕肺淤血和降低肺重指數。結果見表2。

表2 各組大鼠心重指數和肺重比（x±s）

3 討論

心室重構是心力衰竭最重要的特征之一，它不僅會導致心衰的發生，并在很大程度上增加了心力衰竭的致殘率和死亡率。心室重塑發生后，機體的病理生理過程也隨之改變，其中尤為重要的表現是心室重量和心室容量的增加，以及心室結構的改變，但是心臟肥厚的代償功能不可能持久，因此心肌的受損程度難逃進一步惡化的命運，隨著持續時間的不斷延長，最終導致左室整體功能下降［4］。本研究使用超聲心動圖檢測心衰大鼠左心室結構和心功能，其中射血分數（EF）和左室短軸縮短率（FS）是評價左心室收縮功能的指標參數，FS≤25%為異常，EF≤40%被認為是心力衰竭的客觀依據。實驗結果提示冠脈結扎6周后心衰大鼠心室壁拉長、變薄、左心收縮功能受損，益母草堿干預治療后各指標沒有明顯變化，表明心衰后藥物對心衰的治療并不能恢復心臟結構及功能，因而在臨床上我們應該把改善心功能和預防心室重構作為治療慢性心衰的關鍵環節。同時由實驗結果可知，心衰模型組大鼠心重指數較假手術組顯著上升，這個上升趨勢在急性期可能與心肌梗死后引發的炎癥和水腫有關，而在慢性期則可能是心臟發生肥大和擴張有關，益母草堿雖然沒有明顯降低該指數但卻顯著降低了全心重量和肺重指數，提示益母草堿能明顯減輕水腫和肺淤血，對心衰后的心功能有一定保護作用，其具體作用機制值得深入研究。

［1］阮金蘭，杜俊榮，曾慶忠，等.益母草的化學藥理和臨床研究進展［J］.中草藥2003，34（11）:15-18．

［2］趙彩霞，蔡長春，張增巧，等.益母草的藥理作用及臨床應用研究進展［J］.臨床誤診雜志，2011，24（2）:82-84.

［3］Zhu YZ，Zhu YC，LIJ，et al.Effects of losartan on haemodynamic Parameters and angiotensin receptormRNA levels in ratheartaftermyocardial Infarction［J］. JRenin Angiotensin AldosteroneSyst2000l（3）:257-262.

［4］Cutler MJ，Rosenbaum DSDunlap ME.Structural and electrical remodeling as therapeutic targets inheart failure［J］.JElectrocardiol200740（6Suppl）:S1-7.

Experim en ta l Stud y o f Leonu rine on Rats w ith Heart Failu re after M yo card ial In farction

XU Yuping1，2，QIANHaibing2
（1.School of ChemistryandMaterialsEngineering，KailiUniversity，Guizhou，Kaili556011，China；2.School of BasicMedicalSciences，GuiyangCollege of TraditionalChineseMedicine，Guiyang550002，China）

Ob jective To study the effects of leonurine on left ventricular structure and cardiac function after heart failure.M ethods Establishing themodel of ratswith heart failure by ligation of the left anterior descending coronary artery.Male SD ratswere randomly divided into five groups:sham operated control group，modelgroup，leonurine high-dose group（30mg·kg-1·d-1），leonurine low-dose group（15mg·kg-1·d-1），and captopril positive control group（30 mg·kg-1·d-1）.Drugs were chronically administered to animals for 6 weeks，E－chocardiography，EF，FS，LVPW and LVAW index were checked，heart function was observed，and heartweight index and pulmonary weight index were calculated.Results The leonurine（30 mg·kg-1·d-1）can significantly declined HW，Lung Weight and Lung Weight/ BW，comparing withmodel group，the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion The leonurine had certain protective effect on heart failure after cardiac function，and it can alleviate cardiac hypertrophy and pulmonary congestion of rats with heart failure by reducing HW，LungWeight and LungWeight/BW.

leonurine；chronic heart failure；heart function；left ventricular structure；experimental research；rat

10.3969/j.issn.1672-2779.2015.11.073

1672-2779（2015）-11-0144-02

：張文娟本文校對：戴貴東

2015-04-17）

貴州省國際科技合作項目（No：黔科合外G字［2010］7012）

*通訊作者：279753407@qq.com