規模化豬場豬瘟、豬藍耳病抗體檢測結果分析

（河南省諸美種豬育種集團有限公司，河南 駐馬店 463612）

規模化豬場豬瘟、豬藍耳病抗體檢測結果分析

霍金耀，鄭逢梅

（河南省諸美種豬育種集團有限公司，河南 駐馬店 463612）

為了解豬瘟、豬藍耳病的免疫狀況、評價免疫效果、制定合理免疫程序與防控措施。筆者于2014年分4次對某規模化豬場采血進行豬瘟、豬藍耳病抗體檢測。結果顯示該場母豬的豬瘟、豬藍耳病抗體水平合格；產房仔豬豬瘟抗體水平合格，豬藍耳病抗體水平較低；保育階段豬瘟和豬藍耳病抗體水平均較低；育肥階段豬瘟抗體水平較低，豬藍耳病抗體水平偏高，且標準差大。結合該場免疫程序，表明仔豬的豬瘟首免日齡應根據抗體消長情況推遲，同時應考慮對仔豬免疫豬藍耳病疫苗。

豬瘟抗體；豬藍耳病抗體；檢測分析

疫苗接種是規模化豬場預防和控制重大傳染病的重要途徑，特別是不同的豬場需要制定一套因地制宜、切實可行的免疫程序以及免疫評價系統。免疫監測是為了監測接種豬群的免疫效果，并根據免疫效果合理地調整免疫接種方案，是指導與制定免疫程序的重要參考依據。豬瘟、豬藍耳病是當前危害養豬生產的重大傳染病，嚴重影響著規模化豬場的豬群健康與成績。為了監測某規模化豬場豬瘟、豬藍耳病的抗體水平，掌握豬場流行病學動態及免疫效果，每季度抽取該豬場血樣120份左右，進行豬瘟、豬藍耳病的抗體水平檢測。

1 材料與方法

1.1 樣品來源及主要試劑和儀器

2014年3、6、9、12月對某規模化豬場進行抽樣調查，每頭采取血樣5 mL，每次采集血樣120份左右。

豬瘟、豬藍耳病抗體ELISA檢測試劑盒均為美國IDEXX公司產品。酶標儀、移液器、臺式離心機（凱達TGL-16）。

1.2 試驗方法

1.2.1 組別分群 該場為養豬一條龍模式生產線，按照豬群所在區域人為劃分為產房階段、保育階段、育肥階段；母豬群劃分為后備母豬、經產母豬。

1.2.2 血樣采集 前腔靜脈采血，標記后置于30～37 ℃孵育30 min，待血液凝固、血清析出，帶回實驗室分離血清。

1.2.3 血清制備 將帶回的一次性采

血注射器室溫靜置30 min后，將析出的血清分別放入對應編號的滅菌EP管中，分組編號，冷凍保存備用。

1.2.4 豬瘟、豬藍耳病抗體檢測方法與結果判定 按照豬瘟、豬藍耳病ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行抗體檢測與結果判定，豬瘟抗體結果為阻斷率%＞40判為陽性，豬藍耳病抗體結果為S/P值＞0.4判為陽性。每組設2個陰性血清對照和2個陽性血清對照。

1.3 豬瘟、豬藍耳病免疫程序調查

對該規模化豬場的豬瘟、豬藍耳病免疫程序進行調查，該場2014年全年免疫程序一致，結果見表1。

表1 豬瘟、豬藍耳病免疫程序

2 試驗結果

2.1 豬瘟抗體檢測結果

結果顯示，1、2、3季度中，均表現為保育豬抗體水平最低，4季度中育肥豬抗體水平最低。1、2、3季度的產房仔豬抗體水平較好，但是4季度的產房仔豬抗體水平偏低。母豬的抗體水平全年均達到90%以上的水平，但是4季度的抗體水平較前3個季度略低。

根據豬瘟抗體平均值結果，前3季度中平均值最低的為保育豬，分別為66.3、46.5和50.2，4季度中平均值最低的為育肥豬的49.4。標準差結果中，保育、育肥的標準差普遍最高，4個季度中標準差最高的階段均為育肥豬，分別是30.4、20.9、24.9、24.8。母豬的抗體平均值均處于較高水平，其中4個季度中后備母豬的標準差均明顯高于經產母豬的標準差。

表2 4個季度各個階段豬瘟抗體檢測結果

2.2 豬藍耳病抗體檢測結果

由表4可以看出，4個季度產房、保育階段豬藍耳病抗體的陽性率較低，育肥、后備母豬、經產母豬的抗體陽性率高。育肥豬在四個季度中抗體陽性率幾乎全部為100%，3、4季度后備母豬的陽性率由1、2季度的100%下降到60%，經產母豬的在前3季度的陽性率達92%以上，4季度下降為75%。

由表5可以看出，第1季度中，豬藍耳病抗體平均值最高的為經產母豬（1.9），2、3、4季度中抗體平均值最高的均為育肥豬（分別為2.0、2.0、1.6）；1、2季度中經產母豬的標準差為同一時期不同階段的最高值，3、4季度中保育豬的標準差為最高值。

表3 4個季度各個階段豬瘟抗體平均值與標準差

表4 4個季度各個階段豬藍耳病抗體檢測結果

3 結果分析

3.1 豬瘟抗體結果分析

4個季度的豬瘟抗體水平總體規律相似，但是仍有一定差異，前3個季度的豬瘟抗體陽性率最低值均在保育，產房階段以及母豬階段的抗體水平均較高，表示該場的仔豬首次免疫時間偏早，該場在20日齡首免豬瘟疫苗，此時產房階段的抗體平均值和陽性率都處于較高水平，免疫豬瘟疫苗之后，部分疫苗毒與體內的部分豬瘟抗體發生中和反應，從而使體內的豬瘟抗體水平下降。

4季度的豬瘟抗體平均值與前3個季度相比偏低，經詢問，該場9月份開始使用與之前同一廠家不同批號的豬瘟疫苗，推測為疫苗批次質量問題（后經送檢證實），9月份之后使用的疫苗抗原含量偏低，導致4季度母豬、產房仔豬的抗體水平下降。但是4季度保育豬的抗體陽性率有所升高，同時4季度抗體陽性率最低的則為育肥豬，推測疫苗抗原含量下降導致豬瘟首免時與疫苗毒中和的抗體數量也大幅度下降，從而使保育豬的抗體陽性率升高，而豬瘟二免時由于疫苗抗原含量低，因此免疫效果不理想，育肥豬的抗體陽性率下降。

4個季度中育肥豬的標準差均為同一時期不同階段豬群的最高值，表示育肥豬階段為豬瘟抗體最不穩定時期，這與該場的實際情況有著密切關系，該場為種豬場，因挑選后備、測定后備等程序的影響，使得育肥周期偏長，育肥前期豬瘟抗體水平較高，但是育肥后期豬瘟抗體逐漸消減，使得整個育肥階段的抗體水平變化較大。

3.2 豬藍耳病抗體結果分析

1季度中豬藍耳病抗體陽性率最低值在保育階段，2、3、4季度的陽性率最低值均在產房階段，這與仔豬不免疫豬藍耳病疫苗有密切關系。產房仔豬由于不免疫豬藍耳病疫苗，因此產房仔豬的抗體水平與經產母豬的抗體水平密切相關，4個季度相互對比，發現經產母豬抗體陽性率升高時產房仔豬的抗體陽性率也升高，反之亦然。

產房、保育、育肥3個階段的豬藍耳病抗體陽性率基本上呈遞增趨勢（1季度產房陽性率比保育略高，應該與同一時期母豬抗體水平也最高相關），由于沒有免疫疫苗，表示保育和育肥豬藍耳病抗體的升高是野毒感染造成的。保育的抗體陽性率升高，到育肥階段豬藍耳病抗體陽性率均達到或接近100%，且育肥豬的抗體平均值在同一時期的不同階段中幾乎全部為最大值，表示保育階段豬群幾乎全部被豬藍耳病野毒感染。

表5 4個季度各個階段豬藍耳病抗體平均值與標準差

1、2季度母豬的豬藍耳病抗體平均值和標準差均處于較高程度，表示1、2季度母豬的豬藍耳病抗體也不太穩定，說明母豬群中也存在豬藍耳病野毒的感染。3、4季度母豬的抗體平均值有所下降，標準差也有所降低，表示下半年母豬群的豬藍耳病野毒活躍程度降低，抗體值與理論情況下疫苗免疫的抗體值較為接近。

4 討論

4.1 豬瘟防控策略

近年來豬瘟的發生和流行特征以慢性、非典性、溫和性、隱性等類型為主，公豬、基礎母豬多表現為隱性感染，仔豬最容易經過垂直傳播感染，這些感染豬都是能夠持續排毒的傳染源，同時，病豬愈后24～57 d仍有帶毒和排毒現象，這點在飼養管理中必須引起足夠的重視[1，2]。

該場全年豬瘟抗體檢測結果相對穩定，表示疫苗免疫接種水平良好，保育豬的豬瘟抗體水平偏低，應檢測產房仔豬母源抗體的消減規律，根據母源抗體的消減程度，在豬瘟抗體阻斷率40%～45%左右時進行首免，之后，監測首免后抗體消長規律，在抗體值下降過程中，選擇抗體阻斷率在40%～45%時進行二免。而不能一味的照搬使用傳統20+60日齡免疫程序，應根據自身豬場的實際抗體檢測情況制定免疫程序。育肥階段由于生產周期較長，可適當在育肥中后期加強免疫一次，從而使育肥后期抗體維持較高水平。

針對疫苗批次差異產生的影響，在購進疫苗前一定要對疫苗的抗原含量進行檢測，推薦使用TCID50檢測病毒效價或者使用熒光定量RT-PCR檢測疫苗中核酸含量，選擇效價高或抗原含量高的疫苗批次。

4.2 豬藍耳病防治對策

對河南大中型、規模化豬場豬藍耳病感染情況調查，絕大多數豬場屬于豬藍耳病陽性穩定場，生產管理水平直接決定著豬藍耳病的防控效果[3]。豬場中存在豬藍耳病野毒時，豬群容易造成隱性感染且不表現臨床癥狀，當感染的豬藍耳病病毒毒力較強或病毒活躍期以及一旦飼養管理失當、飼養條件變化等不穩定因素存在，極易引起豬藍耳病的暴發，因此，疫苗免疫以及配套的抗體檢測顯得尤為重要。

通過抗體檢測結果，發現該場的保育階段為豬藍耳病最為活躍階段，因此加強保育階段的飼養管理與群防群控為該場防控豬藍耳病的關鍵點。育肥階段豬藍耳病均已感染，因此要格外注意育肥階段是否有類似于豬藍耳病臨床癥狀出現，如高熱稽留、呼吸道疾病等，若有疑似豬藍耳病例應立刻采樣進行豬藍耳病病原檢測，同時大群投藥治療，確診為豬藍耳病后應加強病豬隔離，防止傳染給健康豬只，感染豬藍耳病的豬群不再留作種用。

該場仔豬未免疫豬藍耳病疫苗，建議檢測產房、保育仔豬的母源抗體消減規律，制定合理的豬藍耳病免疫程序，主動免疫能夠降低感染性野毒在接種動物體內的復制效率，減少發病病例，保護豬群健康[4，5]。

4.3 豬場綜合防控措施與生物安全體系建設

規模化豬場穩定生產與持續發展是以種豬的健康穩定為前提，豬場豬瘟和豬藍耳病控制的好壞直接關系到整個種豬群的健康狀況。種豬群攜帶豬瘟、豬藍耳病病毒或機體免疫受到抑制，仔豬先天性感染豬瘟或者豬藍耳病，或者仔豬得不到母源抗體的充分保護，很容易感染各種病原，成為豬場的隱患。

規模化豬場應建立完善的衛生防疫與生物安全體系，避免病原自外界傳入與病原在豬場內部傳播是疫病防控的出發點與著力點。定期進行血清學監測，根據檢測結果及時調整免疫程序，對可疑豬隔離治療，對確診為重大傳染病豬只立刻上報疫情或無害化處理。

有條件的種豬場，在做好抗體檢測的同時應做好病原檢測，尤其是種用后備公母豬引種之前以及引種后的隔離期應該分2次逐頭檢測重大動物疫病病原，如豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病毒、口蹄疫病毒，對病原陽性的后備種豬應堅決淘汰處理，以免病毒傳染給豬場其他豬群，對于經產母豬也應定期采樣，檢測重大動物疫病病原，建立健全疫病監測監督機制，對病原陽性的經產母豬也應做淘汰或不做種用處理。商品豬場也應該定期進行病原檢測，了解本場疫病感染情況，有助于制定合理的防疫程序與防范措施，若發生疫情時也有助于采取對應措施。

[1] 李嬌，沈志強，祖立闖，等.間接ELISA在豬瘟抗體檢測上的應用[J].動物醫學進展，2012，33(6)：126-129.

[2] 劉建，湯德元，李春燕，等.我國豬瘟流行新趨勢與防控措施[J].中國豬業，2013(2)：37-39.

[3] 謝偉濤，梁躍，喬松林，等.豬場藍耳病檢測結果與案例分析[J].今日養豬業，2015(3)：72-73.

[4] 吳億春.豬繁殖與呼吸綜合征疫苗研究新進展[J].中國畜牧獸醫，2011，38(11)：191-194.

[5] 于桂芳，王國良，溫富勇.高致病性豬藍耳病免疫抗體監測分析報告[J].當代畜牧，2011(4)：14-15.

2015-05-20）