肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管內皮生長因子表達及相關性

肺腺癌中MEL-18、DESTRIN和血管內皮生長因子表達及相關性

王再紅

(秦皇島市海港醫院呼吸內科，山東秦皇島066000)

摘要〔〕目的檢測肺腺癌中MEL-18、細胞骨架蛋白(DESTRIN)和血管內皮生長因子(VEGF)表達，探討三者表達的關系及臨床意義。方法肺腺癌的組織及臨床資料99例作為觀察組，收集距腫物邊緣>5 cm的正常肺組織70例作為對照組。采用免疫組化方法檢測兩組中MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達。結果觀察組中MEL-18表達的陽性率明顯低于對照組，而DESTRIN和VEGF表達的陽性率均明顯高于對照組，觀察組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達的陽性率與腫瘤的最大徑、淋巴結轉移、脈管內癌栓、臨床分期、Ki67的表達均密切相關。相關性分析顯示觀察組中MEL-18和VEGF的表達具有負相關性，而DESTRIN和VEGF 的表達具有正相關性。結論肺腺癌中MEL-18低表達、DESTRIN和VEGF高表達，三者具有協同作用，共同促進腫瘤的發生和進展。MEL-18具有抑制血管生成的作用，DESTRIN可能具有促進血管生成的作用，二者的作用可能均通過介導VEGF的作用實現。

關鍵詞〔〕肺腺癌；(MEL)-18；DESTRIN；血管內皮生長因子(VEGF)；免疫組化

中圖分類號〔〕R734.2〔

第一作者：王再紅(1973-)，女，副主任醫師，主要從事呼吸內科疾病研究。

肺腺癌具有腺樣分化或有黏液產生，表現為腺泡樣、乳頭樣、細支氣管肺泡樣，具有黏液形成的實性巢或者以上述形態混合生長的惡性上皮性腫瘤常見于中老年人〔1〕。肺腺癌在發展過程中多種蛋白表達失常〔2〕。MEL-18屬于PCG家族的成員，可以抑制C-myc的表達，引起腫瘤的衰老和凋亡，抑制腫瘤的形成〔3,4〕。DESTRIN在正常組織中表達極少，在腫瘤中的表達升高，對細胞的遷移、黏附和形態改變有重要價值〔5,6〕。血管內皮生長因子(VEGF)對腫瘤和新生組織中的血管形成有重要價值〔7,8〕。本實驗對肺腺癌中MEL-18、細胞骨架蛋白(DESTRIN)和VEGF的表達進行檢測，關注其相關性。

1資料與方法

1.1一般資料2011年1月至2013年12月我院行肺腺癌根治手術的患者99例作為觀察組，男45例，女54例；年齡53～80歲，中位年齡68歲。收集距腫物邊緣>5 cm的正常肺組織70例作為對照組，男35例，女35例；年齡54～79歲，中位年齡67歲。兩組一般臨床資料無明顯差別，具有可比性。

1.2MEL-18、DESTRIN和VEGF的檢測方法MEL-18和VEGF蛋白的濃縮液均購自北京博奧森生物技術公司，DESTRIN蛋白的濃縮液購自美國ABCAM公司。MEL-18、DESTRIN和VEGF在正式實驗前進行預實驗，選擇最理想表達的濃度用于正式實驗。MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達應用免疫組化En Vision 二步法，DAB染色。嚴格按說明書操作，均由病理科技師操作完成，嚴格質量控制，減少誤差。

1.3MEL-18、DESTRIN和VEGF表達的判定方法MEL-18的陽性表達部位是細胞核，DESTRIN和VEGF陽性表達部位是細胞質和(或)細胞膜，計數5個400倍視野，取平均值，以陽性率≥5%為陽性，<5%為陰性。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2結果

2.1觀察組和對照組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達陽性率的比較與對照組比較，觀察組中MEL-18低表達、DESTRIN和VEGF高表達(P<0.000 1)。見表1。

表1兩組中MEL-18、DESTRIN和VEGF表達陽性率的比較〔n(%)〕

組別nMEL-18DESTRINVEGF觀察組9930(30.30)73(73.74)80(80.81)對照組7065(92.86)11(15.71)15(21.43)χ2值65.189355.223458.7405P值<0.0001<0.0001<0.0001

2.2觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達陽性率與臨床病理特征的關系觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達陽性率與腫瘤的最大徑、淋巴結轉移、脈管內癌栓、臨床分期和Ki67的表達均密切相關。見表2。

表2觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達陽性率與臨床病理特征的關系〔n(%)〕

分組nMEL-18DESTRINVEGF最大徑 <5cm4820(41.67)31(64.58)34(70.83) ≥5cm5110(19.61)42(82.35)46(90.20) χ2值5.69694.03195.9777 P值0.01700.04460.0145臨床分期 Ⅰ+Ⅱ5221(40.28)33(63.46)37(71.15) Ⅲ+Ⅳ479(19.15)40(85.11)43(91.49) χ2值5.27115.97246.5827 P值0.02170.01450.0103脈管內癌栓 無7126(36.62)48(67.61)53(74.65) 有284(14.29)25(89.29)27(96.43) χ2值4.74264.87396.1426 P值0.02940.02730.0132Ki67表達 <253918(47.50)22(56.41)25(64.10) ≥256012(20.00)51(85.00)55(91.67) χ2值8.48539.976411.5796 P值0.00360.00160.0007淋巴結轉移 無5924(40.68)38(64.41)43(72.88) 有406(15.00)35(87.50)37(92.50) χ2值7.44216.56485.9162 P值0.00640.01040.0150

2.3觀察組MEL-18、DESTRIN和VEGF表達的相關性觀察組MEL-18和VEGF(r=-0.54，P=0.013 2)的表達具有負相關性，DESTRIN和VEGF (r=0.50，P=0.019 6)的表達具有正相關性。

3討論

肺腺癌為氣道上皮或肺泡上皮來源的腫瘤，在形成腫瘤中常經歷表型轉換，使同一腫瘤內部常可以見到多種形態和結構〔9,10〕。在此過程中，多種基因和蛋白進行調節。MEL-18基因位于17號染色體長臂1區2帶，其編碼的蛋白質包含3個功能域，即位于氨基酸末端的環指結構、中間部位的HTH螺旋結構和羧基末端的富含脯氨酸和絲氨酸的PS結構域〔11,12〕。研究顯示MEL-18可以直接抑制CylcinD2的活性，抑制CyclinD2與CDK復合物結合，阻止細胞周期由G1期向S期轉化〔13〕。也有觀點認為MEL-18對HOX基因有明顯的轉錄阻遏作用〔14〕。還有觀點認為MEL-18可能對干細胞活性有一定抑制作用，進而抑制干細胞的繁殖和分化，使腫瘤細胞的增生停滯，發揮抑制腫瘤的作用〔15〕。因此MEL-18可能是一個多向性抑癌作用，能通過不同通路發揮作用〔16〕。DESTRIN基因定位于20p12.1，是肌動蛋白的結合蛋白，在一定條件下可以調節actin的解聚和重構，引起腫瘤細胞遷移能力增加〔17,18〕。也有研究顯示DESTRIN可以引起上皮細胞的過度增殖和新生血管的形成〔19,20〕。VEGF是最常見的血管生成促進因子，其引起血管新生的能力強，作用迅速。在腫瘤中，血管生成是其生長中的一個重要事件，不僅可以直接引起腫瘤的生長，還對脈管播散有重要作用。目前研究認為VEGF的影響因素研究較多，也說明VEGF在作用過程中不是單獨進行調節的，而是形成的強大的級聯反應，血管生成在此調節過程中形成動態平衡〔21,22〕。

本實驗結果提示MEL-18、DESTRIN、VEGF三者異常表達均為促進腫瘤發生的重要因素；三者表達失調是腫瘤快速生長的重要因素；三者均為促進腫瘤淋巴道遷移的重要因素；三者異常表達后引起細胞增殖失調，此時腫瘤惡性程度明顯升高，增殖活躍，細胞的異型性大，預后差。由于脈管內癌栓、臨床分期和Ki67的表達均與患者的預后相關，因此聯合檢測MEL-18、DESTRIN和VEGF的表達可能對判斷預后有一定幫助。三者以VEGF為中心，具有一定的協同作用。MEL-18、DESTRIN在調節腫瘤進程的過程中對VEGF的表達有影響，因此MEL-18、DESTRIN可能是調節血管生成的重要因子。MEL-18對腫瘤的抑制作用與對VEGF的作用具有相似性，這使MEL-18的機制更復雜。DESTRIN在促進腫瘤發生及遷移過程中引起血管生成，使腫瘤的體積增大更迅速，腫瘤的異型增生更強。DESTRIN和VEGF在作用過程中均可以促進腫瘤的增殖，使腫瘤細胞活化，失控性增生明顯，細胞處于高繁殖期，腫瘤生長快。

4參考文獻

1Piperdi B,Merla A,Perez-Soler R.Targeting angiogenesis in squamous non-small cell lung cancer〔J〕.Drugs,2014；74(4):403-13.

2Kim JW,Koh Y,Kim DW,etal.Clinical implications of VEGF,TGF-β1,and IL-1β in patients with advanced non-small cell lung cancer〔J〕.Cancer Res Treat,2013;45(4):325-33.

3王尉,胡衛列,呂軍,等.MEL-18在前列腺癌中的臨床意義〔J〕.實用癌癥雜志,2011;26(2):115-8.

4何汀,陳明,章宜芬,等.MEL-18在人膀胱尿路上皮腫瘤組織中的表達及意義〔J〕.現代醫學,2010;38(3):212-6.

5Desmarais V,Yamaguchi H,Oser M,etal.N-WASP and cortactin are involved in invadopodium-dependent chemotaxis to EGF in breast tumor cells〔J〕.Cell Motil Cytoskeleton,2009;66(6):303-16.

6Horita Y,Ohashi K,Mukai M,etal.Suppression of the invasive capacity of rat ascites hepatoma cells by knockdown of Slingshot or LIM kinase〔J〕.J Biol Chem,2008;283(10):6013-21.

7Fu L,Chen W,Guo W,etal.Berberine targets AP-2/hTERT,NF-κB/COX-2,HIF-1α/VEGF and cytochrome-c/caspase signaling to suppress human cancer cell growth〔J〕.PLoS One,2013;8(7):e69240.

8Tang XP,Li J,Yu LC,etal.Clinical significance of survivin and VEGF mRNA detection in the cell fraction of the peripheral blood in non-small cell lung cancer patients before and after surgery〔J〕.Lung Cancer,2013;81(2):273-9.

9Zhang L,Ge W,Hu K,etal.Endostar down-regulates HIF-1 and VEGF expression and enhances the radioresponse to humanlung adenocarcinoma cancer cells〔J〕.Mol Biol Rep,2012;39(1):89-95.

10Rohrer Bley C,Orlowski K,Furmanova P,etal.Regulation of VEGF-expression by patupilone and ionizing radiation in lung adenocarcinoma cells〔J〕.Lung Cancer,2011;73(3):294-301.

11張振偉,蔣仲敏.MEL-18 mRNA在食管鱗癌中的表達及其臨床意義〔J〕.山東大學學報(醫學版),2012;50(2):78-81.

12陸有為,郭偉劍,李進.MEL-18 mRNA在胃癌中的表達及其臨床意義〔J〕.中國癌癥雜志,2009;19(6):423-5.

13鄒艷芳,田永,徐峰.BMI-1和MEL-18基因在大腸癌組織中的表達及意義〔J〕.世界華人消化雜志,2013;21(5):397-402.

14田永,鄒艷芳,徐峰.大腸癌組織中MINA53和MEL-18蛋白的表達〔J〕.鄭州大學學報(醫學版),2013;48(6):780-2.

15Guo BH,Zhang X,Zhang HZ,etal.Low expression of Mel-18 predicts poor prognosis in patients with breast cancer〔J〕.Ann Oncol,2010;21(12):2361-9.

16Lee JY,Jang KS,Shin DH,etal.Mel-18 negatively regulates INK4a/ARF-independent cell cycle progression via Akt inactivation in breast cancer〔J〕.Cancer Res,2008;68(11):4201-9.

17蘇堅,顏鴻飛,周鈺娟,等.結腸癌中DESTRIN表達及臨床病理學意義〔J〕.臨床與實驗病理學雜志,2013;29(7):713-5.

18吳勇軍,唐儀,李爭,等.DESTRIN在胃癌中表達的臨床病理意義〔J〕.中國醫學工程,2011;19(7):6-8.

19蘇堅,史玲,周鈺娟,等.DADS通過RAC1-ADF/COFILIN1通路抑制結腸癌SW480細胞遷移與侵襲〔J〕.中國腫瘤臨床,2013;40(14):815-8.

20Cursiefen C1,Ikeda S,Nishina PM,etal.Spontaneous corneal hem- and lymphangiogenesis in mice with destrin-mutation depend on VEGFR3 signaling〔J〕.Am J Pathol,2005;166(5):1367-77.

21Margaritescu C,Cernea D,Georgescu CC,etal.VEGF,CD105 and α-SMA immunoexpression study in lips squamous cell carcinomas and associated dysplastic lesions〔J〕.Rom J Morphol Embryol,2014;55(1):35-41.

22Cha N,Lv M,Zhao YJ,etal.Diagnostic utility of VEGF mRNA and SP1 mRNA expression in bronchial cells of patients with lung cancer〔J〕.Respirology,2014;19(4):544-8.

〔2013-09-08修回〕

(編輯苑云杰)