馬鈴薯葉片基因組DNA提取方法比較研究

李建武，鞏迎春

（1.甘肅省農業科學院馬鈴薯研究所，甘肅 蘭州 730070；2.農業部西北旱作馬鈴薯科學觀測實驗站，甘肅 渭源 748201；3.甘肅農業大學生命科學技術學院，甘肅 蘭州 730070）

馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）是茄科（Solanaceae）茄屬（Solanum）馬鈴薯組（Tuberarium）雙子葉草本植物，可一年一季或一年兩季栽培，普通馬鈴薯是馬鈴薯亞組中能形成地下塊莖的一年生草本四倍體作物。由于受到同源四倍體遺傳復雜性的限制，馬鈴薯遺傳規律極為復雜，常規雜交育種效率較低，近年來在分子水平方面開展了大量的研究。DNA的分離提取是進行植物分子生物學研究工作的基礎，DNA的提取效率和純度嚴重影響分子生物學實驗的結果，因此快速提取得到高純度的DNA，是分子生物學實驗成敗的關鍵因素之一［1］。目前，普通植物DNA提取方法已經非常成熟，常用的有十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）［2］，十二烷基苯磺酸鈉（SDS）法［3］，尿素法［4］、試劑盒法提取基因組DNA［5］。其中，CTAB法是植物提取的經典方法，提取效果好，但步驟繁瑣、試劑組成復雜、易污染［5-6］；SDS法較為簡易、產量高，但有蛋白污染可能［3］；尿素法具有產量高、快速省時、可常溫操作、成本耗用低等優點［4］；試劑盒法操作簡便、快速省時、污染少、提取的DNA純度高，但其成本比較高［4］。我們采用CTAB和試劑盒2種不同的DNA提取方法，以常規種植馬鈴薯植株葉片為實驗材料，探索了適合批量高效的馬鈴薯葉片基因組DNA提取方法。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試材料為8份馬鈴薯品系，均為普通栽培種。植物基因組DNA提取試劑盒（DP305-2）購自天根生化科技（北京）有限公司。……