鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育作用研究

向秋玲 蔣銳 姜海斌

鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育作用研究

向秋玲 蔣銳 姜海斌

目的 研究鹿藿水提取物的抗雄性小鼠生育作用的影響。方法雄性小鼠分為4組，給藥，然后與雌鼠合籠交配，觀察雌鼠給藥70 d、停藥20 d妊娠率。結果 用藥70 d作用較明顯。停藥20 d，與陰性對照組結果非常接近。結論 鹿藿水提取物具有良好的抗生育作用，停藥后不影響后續生育能力。

鹿藿水提取物；抗生育作用；附睪；精子

鹿藿（Rhynchosia Volubilis Lour）是我國避孕經驗方中的一味主藥。王建剛等[1]用鹿藿根4種提取物對大鼠灌胃進行實驗，發現對雄性大鼠有抗生育及抗菌作用。本實驗深入研究鹿藿根水提取物的抗生育作用，為將其開發為新型外用避孕藥提供實驗依據。

1 材料

1.1 藥品與試劑

鹿藿根（購于湖南懷化，由吉首大學陳功錫教授鑒定）；醋酸棉酚（北京中棉紫光生物技術有限責任公司，批號061116）。

1.2 動物

成年雌、雄性小鼠（湖南斯萊克景達實驗動物有限司提供，動物許可證號：SCXK（湘）2013-0004，動物合格證號：NO43004700006140）。

2 方法

2.1 提取及實驗用藥的配制

干燥鹿藿根10 kg，粉碎，加入30 L純凈水，60℃浸泡24 h，提取2次，過濾，減壓蒸餾濃縮，制得鹿藿水提取物浸膏，保存備用，實驗時用生理鹽水稀釋成4%的溶液。

2.2 抗生育實驗

70 d雄性小鼠80只，體重（28.2±1.4）g左右，分為4組：陰性對照組（生理鹽水），陽性對照組給予醋酸棉酚450 mg/（kg·d），鹿藿水提取物低、高劑量的水浸膏150，450 mg/（kg·d）組，每組20只，給藥組每次0.01 ml/g，灌胃，陰性對照組給予相同劑量的生理鹽水灌胃，每天1次，連續給藥70 d。

2.3 妊娠率和妊娠抑制率

雄鼠給藥20 d后與雌性小鼠1：1合籠，合籠期間繼續給雄鼠灌藥，以雌鼠陰道涂片檢查出精子為妊娠第1天，70 d后分籠，解剖雌鼠，計算妊娠率、平均活胎數、死胎數和著床點數。根據以上方法，記錄給藥70 d、停藥10 d時實驗結果。

2.4 統計學方法

所得數據使用SPSS15.0統計學軟件進行分析，計量數據采用（均數±標準差）±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用%表示，采用χ2檢驗，P＜0.05，差異具有統計學意義。

3 結果

3.1 用藥后對雌鼠妊娠抑制的結果

用藥70 d后，藥物組抑制妊娠效果較用藥20 d時降低，但仍很明顯，尤其是高劑量組。見表1。

3.2 停藥后對雌鼠妊娠抑制的結果

停藥20 d后，妊娠率與生理鹽水組接近，尤其是低劑量組，與生理鹽水組比較，P＞0.05，差異不具有統計學意義。見表2。

4 討論

精子的發生主要包括精原細胞的增殖分化，精母細胞的減數分裂和精子細胞的發育過程。而精子的成熟則依賴于附睪微環境[2]，抗生育藥物可作用于以上任一環節。從上述結果可看出，連續用藥后，鹿藿水提取物即能抑制妊娠率，尤其是連續用藥20 d后，雌鼠妊娠率降低，說明鹿藿水提取物對雄性小鼠具有抗生育作用[3]。用藥后小鼠生育率降低，精子總數減少，可以推測鹿藿跟水提取物能夠抑制睪丸精子的產生。從實驗結果又可以看出用藥后精子活動受到影響，說明鹿藿抗雄性小鼠生育在也附睪部位，影響了精子的成熟。研究發現[4]，β-甲基2，4-二甲氧基-吡喃巖藻糖苷可能在附睪即與巖藻糖苷轉移酶或巖藻糖苷酶結合，繼而干擾在雌鼠體內的精卵結合。同時不排除鹿藿其他成分的作用或多種成分共同作用[5]。對用藥后睪丸及附睪組織進行觀察，發現鹿藿水提取物對睪丸及附睪僅有輕微影響，且從停藥后的各項數據可知，鹿藿抗生育作用維持時間短，易恢復。因此，停藥后不會影響雄性小鼠的生育能力。

綜上所述，鹿藿水提取物抗雄性小鼠生育能力強，毒性小，對睪丸影響很弱，不會影響生育能力，是安全有效的抗雄性生育能力的藥物，且試驗證明鹿藿提取物對生殖道常見致病微生物也有較好的抑制作用[6]。對于鹿藿抗生育作用的深人研究及化學成分的進一步分析，有可能發現比較理想的男性避孕藥。

表1 用藥70 d對小鼠妊娠的影響

表2 停藥20 d對小鼠妊娠的影響

[1]徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學[M].北京：人民衛生出版社，2003：1572-1573.

[2]唐運革，唐立新，王奇玲，等.廣東地區男性精液質量的流行病學調查[J].廣東醫學，2014（9）：1402-1404.

[3]黃世興，孟天慶，王驍，等.鹿藿正丁醇提取物體外殺精作用及機制探討[J].中國計劃生育和婦產科，2013，5（2）：35.

[4]胡廉，熊承良.中藥鹿藿的抑菌實驗研究[J].天然產物研究與開發，2006，18（3）：435.

[5]王建剛，熊承良，王學廷,等.鹿藿醇提取物的體外殺精及抗菌作用[J].時珍國醫國藥，2007，18（10）：2388.

[6]伏曉敏，勵千里，金愛華.氯已定醋酸鹽的體外殺精效果及抑菌作用的研究[J].中國現代應用藥學雜志，2003，20（2）：97-99.

The Study of Rhynchosia Volubilis Water Extract Anti-male Mice Fertility

XIANG Qiuling JIANG Rui JIANG Haibin Changde Vocational Technical College Medicine Department，Changde 415000，China

Objective To study the anti-fertility effects of rhynchosia volubilis water extract anti-male fertility in mice.Methods Anti-fertility experiment，mice male were administered continuously，then mated with females，females pregnancy rate was observed.Results Continuously medicate rhynchosia volubilis water extract for 70 days，the effect was still evident.drug withdrawal for 20 days，the results are very close to the negative control group.Conclusion Rhynchosia volubilis water has a good anti-fertility effect，after the drug withdrawal，it does not affect subsequent fertility.

Rhynchosia volubilis water extract，Anti-fertility effect，Epididymis，Sperm

R364.7

B

1674-9308（2015）29-0031-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.29.022

415000常德職業技術學院醫學系

湖南省普通高等學校科學研究項目（No：11C0164）