阿侖膦酸鈉聯合辛伐他汀對雌性去勢大鼠骨質疏松的影響

阿侖膦酸鈉聯合辛伐他汀對雌性去勢大鼠骨質疏松的影響

許大勇

(河南省中醫院脊柱科，河南鄭州450002)

摘要〔〕目的觀察阿侖膦酸鈉聯合辛伐他汀對雌性去勢大鼠骨質疏松(OP)的影響。方法50只雌性SD大鼠隨機分為模型組(n=40)與假手術組(n=10)，模型組完整摘除雙側卵巢組織，假手術組僅切除卵巢周圍部分脂肪組織，建模成功后，將模型組再隨機分為對照組，阿侖膦酸鈉組，辛伐他汀組和聯合用藥組。假手術組和對照組給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀組給予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，聯合用藥組給予阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1+辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，療程均為8 w。比較各組血漿堿性磷酸酶(ALP)、鈣離子(Ca2+)、血清無機磷(P3+)水平以及骨密度和應力試驗。結果①各組大鼠血清Ca2+、P3+比較無統計學差異(P>0.05)，與假手術組相比對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯合用藥組血清ALP均顯著提高(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組和聯合用藥組血清ALP顯著低于對照組和辛伐他汀組(P<0.05)；②與假手術組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯合用藥組股骨密度均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯合用藥組股骨密度較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組股骨密度與對照組比較無統計學差異(P>0.05)；③與假手術組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯合用藥組應力試驗均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯合用藥組應力試驗較對照組顯著增加(P>0.05)，辛伐他汀組應力試驗與對照組比較無統計學差異(P>0.05)。 結論辛伐他汀抗OP需在阿侖膦酸鈉應用的前提下充分發揮，但他汀類藥物不能起到很好的抗OP作用。

關鍵詞〔〕骨質疏松；阿侖膦酸鈉；辛伐他汀；去勢

中圖分類號〔〕R56〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：許大勇(1973-)，男，碩士，主治醫師，主要從事脊柱外科方面的研究。

骨質疏松(OP)好發于絕經后婦女及老年人〔1〕。阿侖膦酸鈉是骨代謝調節劑，具有抑制破骨細胞活性，抑制骨吸收的作用，被臨床上用于絕經后婦女OP的治療〔2〕。研究發現〔3〕，他汀類藥物除具有調節血脂功能外，還具有促進成骨細胞增殖及分化的作用，為OP治療提供了新的方向。本研究觀察阿侖膦酸鈉聯合辛伐他汀對雌性去勢大鼠OP的影響，旨在為OP的治療提供理論依據。

1材料與方法

1.1材料 雌性SD大鼠50只，8～10周齡，體重220～240 g，平均(232±5)g，由河北醫科大學實驗動物中心提供；常溫低速離心機；全自動生化分析儀(Sysmex Chemix-180型)；雙能X線骨密度儀(DEXA，Discovery-Wi型，美國Hologic公司生產)；萬能材料試驗機(太原理工大學生物力學研究所提供)；阿侖膦酸鈉(揚子江藥業集團有限公司)，辛伐他汀(杭州默沙東制藥有限公司)，青霉素鈉。

1.2動物模型的復制與實驗分組50只SD雌性大鼠隨機分為模型組(n=40)與假手術組(n=10)，在適應性喂養1 w后建模，模型組給予2%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉，經背部中線第二腰椎水平做縱行切口，充分顯露卵巢，完整摘除雙側卵巢組織，假手術組僅切除卵巢周圍部分脂肪組織。喂養8 w后將模型組隨機分為對照組，阿侖膦酸鈉組，辛伐他汀組和聯合用藥組，每組10只，各組隨機選取2只大鼠，處死后進行左側股骨密度測定，確定是否造模成功。確定成功后剩余大鼠腹腔麻醉，左側大腿外側行2～3 cm縱行切口，分離股骨中段，小鋼鋸鋸斷后應用克氏針髓內固定，術后常規應用青霉素預防感染。假手術組和對照組給予生理鹽水5 ml·kg-1·d-1灌胃，阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1灌胃，辛伐他汀組給予辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，聯合用藥組給予阿侖膦酸鈉0.5 mg·kg-1·d-1+ 辛伐他汀20 mg·kg-1·d-1灌胃，療程均為8 w。

1.3觀察指標用藥治療8 w后2%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉，快速心臟取血8 ml，3 000 r/min離心10 min，分離上清液，應用全自動生化分析儀測定血漿堿性磷酸酶(ALP)、鈣離子(Ca2+)、血清無機磷(P3+)。拔除克氏針，取左側股骨，應用雙能X線骨密度儀測定股骨中段骨折部位上下3 mm區域骨密度。將股骨置于萬能材料試驗機，進行三點彎曲，最大破壞負荷試驗，加載速度2 mm/min。

1.4統計學方法應用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析和SNK法。

2結果

2.1各組大鼠血清ALP、Ca2+、P3+比較表1可見，各組大鼠血清Ca2+、P3+比較無統計學差異(P>0.05)，與假手術組相比，對照組、阿侖膦酸鈉組、辛伐他汀組、聯合用藥組血清ALP均顯著提高(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組和聯合用藥組血清ALP顯著低于對照組和辛伐他汀組(P<0.05)。

表1　各組大鼠血清ALP、Ca 2+、P 3+比較

與假手術組比較：1)P<0.05；與對照組比較：2)P<0.05；與辛伐他汀組比較：3)P<0.05

2.2各組大鼠股骨密度比較與假手術組〔(0.197±0.006)g/cm2〕相比，對照組〔(0.144±0.008)g/cm2〕、阿侖膦酸鈉組〔(0.158±0.007)g/cm2〕、辛伐他汀組〔(0.149±0.006)g/cm2〕、聯合用藥組〔(0.170±0.010)g/cm2〕股骨密度均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯合用藥組較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組與對照組比較無統計學差異(P>0.05)。

2.3各組大鼠股骨生物力學比較與假手術組〔(183.17±8.28)N〕相比，對照組〔(153.28±7.45)N〕、阿侖膦酸鈉組〔(166.23±7.07)N〕、辛伐他汀組〔(156.16±6.67)N〕、聯合用藥組〔(174.45±8.01)N〕應力試驗均顯著降低(P<0.05)，阿侖膦酸鈉組、聯合用藥組較對照組顯著增加(P<0.05)，辛伐他汀組與對照組比較無統計學差異(P>0.05)。

3討論

阿侖膦酸鈉是一種穩定的無機焦磷酸鹽類似物，與骨內羥磷灰石有強親和力。能進入骨基質羥磷灰石晶體中，當破骨細胞溶解晶體，藥物被釋放，能抑制破骨細胞活性，并通過成骨細胞間接起抑制骨吸收作用，從而使骨密度增加〔4〕。但由于在骨轉換過程中阿侖膦酸鈉也同時抑制了成骨細胞活性，可能影響骨折愈合〔5〕。另有研究表明〔6〕，阿侖膦酸鈉口服吸收后主要在小腸內吸收，但吸收程度很差，生物利用度約為0.7%，且食物和礦物質等可顯著減少其吸收，故臨床效果有限。

近年來有研究顯示，他汀類藥物能夠促進嚙齒類動物骨痂形成，提高骨密度，在OP防治上具有廣闊的應用前景〔7，8〕。一項英國的研究報道〔9〕，長期應用他汀類藥物可以使骨折危險性顯著降低。美國新澤西州的一項病例對照研究顯示〔10〕，他汀類藥物可以使使用者髖部骨折發生率降低0.37。但Nakashima等〔11〕研究發現他汀類藥物并不能阻止去勢大鼠骨量的丟失，只對骨轉換和骨代謝有刺激作用。本研究結果支持Nakashima等〔11〕的研究報道，表明辛伐他汀對去勢大鼠骨量的丟失的阻止作用有限，但聯合阿侖膦酸鈉則對骨轉換和骨代謝有刺激作用。從各組大鼠股骨密度和應力試驗結果比較來看，也支持上述觀點。筆者認為他汀類藥物具有促進骨形態蛋白2基因表達的作用，通過促進骨細胞分化影響骨的形成，而這種作用可能在阿侖膦酸鈉應用的前提下充分發揮，僅他汀類藥物不能起到很好的抗OP作用〔12，13〕。另外，阿侖膦酸鈉聯合辛伐他汀抗骨質疏松作用較單獨應用阿侖膦酸鈉更佳，這可能與兩種藥物的協同機制有關，對OP的臨床治療具有一定意義〔14〕。

4參考文獻

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〔2015-01-19修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

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