老年骨肉瘤術后組織過氧化物氧化還原蛋白－1、C－myc和P53的表達及相關性

老年骨肉瘤術后組織過氧化物氧化還原蛋白-1、C-myc和P53的表達及相關性

祁玉林何秀娟1

(青海省人民醫院骨科，青海西寧810000)

摘要〔〕目的檢測老年人骨肉瘤術后組織中過氧化物氧化還原蛋白(PRDX)-1、人C-myc癌基因產物(C-myc)和突變型P53基因(P53)的表達及臨床意義。方法老年骨肉瘤術后組織68例作為觀察組，49例老年人骨樣骨瘤組織作為對照組，應用免疫組化SP法檢測PRDX-1、C-myc和P53的表達。結果觀察組PRDX-1、C-myc和P53表達陽性率明顯高于對照組，觀察組PRDX-1、C-myc和P53表達與腫瘤最大徑、轉移、分期及脈管浸潤相關。觀察組PRDX-1和P53、C-myc和P53表達具有正相關性。結論老年人骨肉瘤術后組織中PRDX-1、C-myc和P53高表達，不僅可以促進骨肉瘤的惡變進程，還可以使腫瘤處于高度增殖狀態。PRDX-1和C-myc對腫瘤的促進作用可能與對P53的調節有關。

關鍵詞〔〕骨肉瘤；過氧化物氧化還原蛋白(PRDX)-1；C-myc；P53；免疫組化

中圖分類號〔〕R73〔文獻標識碼〕A〔

1武警青海總隊醫院內科

第一作者：祁玉林(1968-)，男，主治醫師，主要從事骨科疾病研究。

老年人的骨及軟組織常伴有一定的退行性改變，因此基因和蛋白的異常表達是促進腫瘤的重要因素〔1,2〕。在機體電子傳遞鏈中，電子有向外脫離并與氧結合的趨勢，使活性氧形成增多〔3〕。而在腫瘤形成過程中常伴有較多的活性氧生成，既可以損傷正常細胞，也可以使修復細胞形成腫瘤性增殖〔4〕。過氧化物氧化還原蛋白(PRDX)-1可以對抗活性氧的生成，在保護細胞過程中發揮關鍵作用。目前認為PRDX-1在不同腫瘤中其表達特點不一致〔5〕。人C-myc癌基因產物(C-myc)是機體中存在的原癌基因，對細胞核中的DNA合成及細胞的分化有重要的調節功能。也有研究顯示C-myc高表達可以有效地促進腫瘤細胞的異型增生〔6,7〕。突變型P53基因(P53)與機體自身存在的野生型P53基因不同，主要是由于自身突變后，使P53喪失了對于突變細胞的抑制作用，繼而獲得了癌基因的功能〔8,9〕。本實驗檢測老年人骨肉瘤術后組織中PRDX-1、C-myc和P53的表達。

1資料與方法

1.1一般資料2010年1月至2013年12月我院68例骨肉瘤老年患者的臨床資料和術后組織作為觀察組，均經病理醫師確診，嚴格執行WHO的納入標準。其中男36例，女32例；年齡60～87歲，平均69.8歲。術前均未進行放、化療。選擇同期在我院確診為骨樣骨瘤老年患者49例作為對照組，其中男26例，女23例；年齡60～78歲，平均68.7歲。兩組一般資料無顯著差異。

1.2PRDX-1、C-myc和P53的檢測選擇PRDX-1、C-myc和P53的濃縮液進行實驗。PRDX-1、C-myc和P53均按不同比例稀釋后進行預實驗，選取最理想的配比濃度用于正式實驗。PRDX-1、C-myc和P53正式實驗的檢測應用免疫組化SP法，嚴格按說明書操作，做好質控。

1.3PRDX-1、C-myc和P53結果判定PRDX-1和C-myc均以細胞質中出現棕黃色為陽性，P53以細胞核中出現棕黃色為陽性。計數腫瘤細胞集中的區域的5個高倍視野(400倍)，計算陽性細胞百分率。陽性率≥5%為陽性，<5%為陰性。

1.4統計學方法應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2結果

2.1兩組PRDX-1、C-myc和P53表達的比較觀察組PRDX-1、C-myc和P53的表達明顯高于對照組(P<0.000 1)。見表1。

表1　兩組PRDX-1、C-myc和P53陽性表達的比較〔 n(%)〕

2.2觀察組PRDX-1、C-myc和P53在不同分組中的比較觀察組中PRDX-1、C-myc和P53的表達與腫瘤的最大徑、轉移、分期及脈管浸潤相關。見表2。

表2　觀察組PRDX-1、C-myc和P53陽性表達在

2.3觀察組中PRDX-1、C-myc和P53表達相關性觀察組PRDX-1和P53(r=0.47，P=0.047 8)、C-myc和P53(r=0.53，P=0.029 3)的表達均呈正相關。

3討論

骨肉瘤是一種原發于髓內的高級別惡性腫瘤，腫瘤性細胞可以產生骨樣基質，約30%的病例發生在中老年人。老年患者常伴有骨及軟骨的退行性改變、骨組織常表現為骨質疏松，因此其發生過程可能具有不同特點〔10〕。有研究顯示老年患者常伴有腫瘤前期的病變，如骨的Paget病等〔11〕。骨肉瘤好發于四肢骨骼的長骨，最常見于干骺和骨干。腫瘤進展過程中多種蛋白表達失調。PRDX-1具有抗氧化的作用，可以清除機體內的氧化介質，調節細胞的H2O2，同時參與氧化信號通路的調節過程〔12,13〕。但是相關研究顯示PRDX-1在腫瘤進展中具有雙重調控作用，即可以阻斷活性氧的作用引起細胞的惡性轉化，又可以降低活性氧誘導的腫瘤凋亡過程〔14,15〕。由于PRDX-1在腫瘤中的不確定性，使PRDX-1在骨肉瘤中的表達尚不清楚。C-myc是一種原癌基因，也是一種核內基因，由3個外顯子和2個內含子組成，C-myc基因既是一種可易位的基因，也是一種受多種物質調節的基因〔16〕。正常機體中C-myc基因表達極低。而C-myc蛋白高表達與機體的多種惡性腫瘤發展過程相關。也有研究認為C-myc的內在結構較為復雜，發揮作用時可以與DNA的結構進行有效結合，引起腫瘤轉錄因子的改變〔17〕。有學者認為C-myc可以調控細胞周期，如C-myc作為從G0/G1期進入S期的開關等等，因此C-myc可能具有多元性機制〔18〕。P53分為野生型和突變型，野生型在實驗中極難檢測到，因此臨床檢測到的均為突變型P53，有研究認為P53是細胞凋亡的調控因子〔19,20〕，在多種腫瘤中高表達，不僅引發腫瘤細胞增殖，還可以促進腫瘤進展〔21,22〕。多種調控因子可以通過P53發揮生物學作用〔8〕。

本實驗結果提示PRDX-1、C-myc和P53三種蛋白高表達是促進腫瘤發展的重要因素。PRDX-1、C-myc均與P53的調節具有協同作用，即PRDX-1、C-myc高表達時可以誘導機體P53高表達，啟動P53介導的蛋白級聯反應，有效促進腫瘤性增殖過程。PRDX-1、C-myc在腫瘤進展中還參與多種生物學過程，如多肽與蛋白質激素的合成與分泌、膜受體的成熟過程及血漿蛋白前體的激活等〔23〕。C-myc還可能具有促進骨肉瘤間質血管生成的作用，使腫瘤生長更快，侵襲血管更直接，易于播散。C-myc基因被激活后使p62過度表達，引起細胞獲得活化，當其與P53等基因協同作用后使細胞形成迅速的惡性轉化。本實驗結果提示PRDX-1、C-myc和P53高表達參與腫瘤的生長、血管侵犯和遠隔器官的播散。有研究認為C-myc和P53可以調節細胞的惡性轉化及過程，同時加速腫瘤細胞的侵襲和播散〔24〕。因此C-myc和P53促進腫瘤進展機制可能更復雜，需要更多基礎實驗證實。

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〔2014-03-19修回〕

(編輯苑云杰)