敵敵畏在蘋果樹上的殘留降解試驗分析

【摘要】目的 為確保敵敵畏的安全使用，評價其在蘋果上的消解趨勢、殘留水平以及對環(huán)境的污染情況。方法 將兩種不同濃度的77.5%敵敵畏乳油噴灑在蘋果樹上，分別測定不同時期蘋果的殘留動態(tài)及最終的殘留量，進(jìn)行降解趨勢分析。結(jié)論 77.5%敵敵畏乳油，用于蘋果樹防治小卷葉蛾和蚜蟲，施藥濃度387.5～484.4 mg/kg（1600～2000倍液），最多使用2次，安全間隔期14 d。

【關(guān)鍵詞】敵敵畏；蘋果；殘留降解；檢測技術(shù)

敵敵畏，英文通用名：dichlorvos，化學(xué)名稱：O，O-二甲基-O-（2，2-二氯乙烯基）磷酸酯，化學(xué)分子式：C4H7Cl2O4P，它是一種無色液體，水中溶解度約8 g/L（25℃），與芳香烴類，醇類，氯化烴完全混溶，其對咀嚼式和刺吸式口器害蟲防效好。因其具有殺蟲效果廣，價格低廉等優(yōu)點，被廣泛用于蔬菜、水果的種植與生產(chǎn)。但它具有中毒性，故在使用過程中應(yīng)對使用劑量進(jìn)行有效控制。為確保食品安全事故的發(fā)生，所以對其殘留降解的試驗分析很有必要。通過對蘋果樹種植過程中施加兩種不同濃度的敵敵畏乳油，分別測定不同時期的殘留量，了解其殘留情況及降解規(guī)律，為其使用的有效性、安全性提供理論依據(jù)。

1、田間試驗

1.1 試驗農(nóng)藥：敵敵畏77.5%乳油，湖北仙隆化工股份有限公司。

1.2 試驗作物：蘋果樹。蘋果品種為“紅富士”。

1.3 試驗地點：河北省石家莊五七路大馬莊園

1.4 試驗方案

消解動態(tài)試驗：于蘋果長至直徑約3 cm時施藥，施藥劑量為726.6 mg/kg（1067倍液），應(yīng)保證用于動態(tài)試驗的果實及樹冠均勻著藥。施藥后1 h、1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d采集蘋果樣本。另設(shè)清水空白對照。

最終殘留試驗：設(shè)兩個施藥濃度：低濃度和高濃度。低濃度為484.4 mg/kg（1600倍液），高濃度為726.6 mg/kg（1067倍液）。各設(shè)2次施藥和3次施藥兩個處理，施藥間隔期為10 d，于蘋果長至直徑3 cm時開始第一次施藥，距最后一次施藥14、21、28、35 d采集蘋果。另設(shè)清水空白對照。

2、實驗室樣品制備與保存

田間樣本在采集后，8 h內(nèi)運回實驗室，并立即制備成實驗室樣品，新鮮樣品在3～5 ℃下貯存并盡快檢測，如不能立即檢測，則盡快保存在-20 ℃冰柜中待測。樣品制備方法，蘋果樣品切碎，混勻縮分至250 g，檢測時用組織搗碎機搗碎或加溶劑勻漿。

3、檢測方法

方法原理：樣品用甲醇提取，二氯甲烷萃取，弗羅里硅土柱凈化，氣相色譜儀火焰光度檢測器檢測。

3.1 儀器設(shè)備與試劑

Agilent 6890N氣相色譜儀帶火焰光度檢測器（FPD-P）和色譜工作站；均質(zhì)器（T 25，IKA公司）、搖床、超聲波清洗器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器、常規(guī)玻璃儀器、固相萃取儀、氮吹儀，二氯甲烷、氯化鈉、甲醇、無水硫酸鈉、石油醚等分析純試劑；甲醇，色譜純；弗羅里硅土（130℃烘干2 h以上，加5%水脫活，靜置過夜）。

敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)品：99.5%+0.05%，國家農(nóng)藥檢測中心（沈陽）提供。

3.2 分析步驟

3.2.1 提取

準(zhǔn)確稱取25.0 g樣品，加入80 mL甲醇，勻漿，抽濾，濾液中加入100 mL 10%氯化鈉溶液，依次用40、30、30 mL二氯甲烷萃取。二氯甲烷萃取液經(jīng)無水硫酸鈉脫水，40℃減壓濃縮至5 mL左右，加入5 mL石油醚繼續(xù)減壓濃縮至近干，再用5 mL石油醚溶解殘留，待弗羅里硅土柱凈化。

3.2.2 凈化

玻璃層析柱，下塞脫脂棉，自下而上依次裝填1 g無水硫酸鈉、5 g弗羅里硅土和1 g無水硫酸鈉，敲實備用。

層析柱分別用5 mL乙酸乙酯、10 mL石油醚預(yù)淋，待柱內(nèi)液面降至頂部無水硫酸鈉以下時，將樣品上柱，流速控制在1 mL/min左右，加入10 mL石油醚涮洗燒瓶上柱，棄去。用100 mL石油醚/乙酸乙酯（20：80，v/v）淋洗，收集洗脫液，40℃水浴減壓濃縮至近干，用甲醇定容至5 mL。

3.2.3 分析測定

Agilent 6890N氣相色譜儀帶火焰光度檢測器（FPD-P）和色譜工作站；色譜柱：HP-5（30 m×0.53 mm×1.0 μm）；進(jìn)樣口溫度220℃，不分流進(jìn)樣；柱溫：80℃，2 min，10℃/min升至240℃，5 min；載氣：N2，99.999%；柱流速：1 mL/min；

尾吹：59 mL/min；氫氣：75 mL/min；空氣：100 mL/min；進(jìn)樣量：1.0 μL。

4、定性與定量分析

用外標(biāo)法，根據(jù)相對保留時間進(jìn)行定性分析。用甲醇做溶劑，將敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)品配制成100 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，再稀釋成0.01、0.05、0.1、0.5、1 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，在上述儀器條件下進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對峰面積作圖，繪制敵敵畏的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=6916.6X-79.589，相關(guān)系數(shù)r = 0.9992；其中Y為敵敵畏峰面積，X為標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，根據(jù)測得樣品峰面積，對應(yīng)曲線計算出樣品濃度C，并計算出敵敵畏的殘留量。

為了保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，分別在空白蘋果中添加3種濃度的敵敵畏標(biāo)樣，添加結(jié)果見表1。根據(jù)添加回收率實驗，敵敵畏在蘋果、土壤中的最低檢出濃度為0.01 mg/kg，回收率的范圍為81%～102%，RSD分別為5.6%，7.8%，4.9%。

5、試驗結(jié)果

5.1 消解動態(tài)

施藥當(dāng)天敵敵畏在蘋果上的原始沉積量為3.68 mg/kg，殘留量按C =2.69e-0.770 T降解，相關(guān)系數(shù)r = -0.9407，半衰期為0.90 d，消解動態(tài)結(jié)果詳見表1。

5.2 最終殘留

按敵敵畏推薦最高濃度484.4 mg/kg以及1.5倍劑量726.6 mg/kg，施藥2次、3次，采樣間隔期為14d、21d、28d、35d，殘留量均<0.010 mg/kg。

6、結(jié)論

6.1 敵敵畏在蘋果中的消解速率評價

不同濃度的敵敵畏在蘋果中的殘留動態(tài)表明，敵敵畏的消解半衰期為0.90 d，詳見表2消解動態(tài)曲線。

6.2 施藥因子與殘留量相關(guān)性分析

從試驗結(jié)果看出，敵敵畏在作物和環(huán)境中容易降解，按照設(shè)計的采樣間隔采樣，樣品中均未檢出敵敵畏殘留，也就是說，其最終殘留量與施藥劑量和施藥次數(shù)相關(guān)性不大。

6.3 合理使用建議

我國國家標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2005《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中規(guī)定敵敵畏的ADI值為0.004 mg/kg 體重（1993年），在原糧、蔬菜、水果中的MRL值分別為0.1、0.2、0.2 mg/kg，故建議77.5%敵敵畏乳油，在蘋果果樹中的施藥濃度387.5～484.4 mg/kg（1600～2000倍液），最多使用2次，安全間隔期14 d。