急性腦梗死患者TNF-α和TNF-β的含量變化及相關因素分析

廖慶紅　付建輝★　汪　飛　陳詩莉

急性腦梗死患者TNF-α和TNF-β的含量變化及相關因素分析

廖慶紅付建輝★汪飛陳詩莉

目的 探討急性腦梗死患者腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、腫瘤壞死因子-β（TNF-β）的含量變化及其相關因素的分析。方法 選取65例腦梗死患者為觀察組，同期健康體檢人群40例為對照組，檢測TNF-α及TNF-β水平。結果 觀察組TNF-α與TNF-β水平均明顯高于正常對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平與神經功能缺損評分、腦梗死面積呈明顯正相關（P均＜0.01）。評分越高，腦梗死面積越大，TNF-α和TNF-β水平增高越明顯。TNF-α與TNF-β水平呈明顯正相關（r=0.455，P＜0.01）。結論 TNF-α與TNF-β參與了腦梗死早期發病過程。TNF-α與TNF-β水平與腦梗死病情的嚴重程度及預后有關。

TNF-α TNF-β 腦梗死

腫瘤壞死因子（TNF）作為一種具有廣泛生物效應的炎性細胞因子，分為TNF-α和TNF-β兩種。研究顯示，發生急性腦梗死時，TNF-α在病灶周圍及血漿中濃度增高［1］。TNF-α被認為是腦梗死疾病病理生理機制中的關鍵介質，參與腦梗死的炎癥免疫過程。目前大多數研究集中于TNF-α在心腦血管疾病中的作用機制，而TNF-β與腦梗死的關系并未引起重視。本文就TNF-α和TNF-β與腦梗死發生的相關性作進一步探討，旨在了解急性腦梗死患者血清中TNF-α和TNF-β含量變化，探討其在急性腦梗死中的作用及臨床意義。報道如下。

1　臨床資料

1.1一般資料 連續收集2012年6月至2014年6月腦梗死患者65例為觀察組，男43例，女22例；年齡39～86歲，平均年齡（58.3±7.3）歲。同時隨機抽取門診健康人群40例為對照組，男28例，女12例；年齡45～80歲，平均年齡（55.9±6.7）歲。納入標準：（1）均符合WHO腦梗死診斷標準。（2）發病48～72 h內經頭顱MRI/CT檢查，明確梗死灶。（3）患者均知情同意，自愿參加。排除標準：（1）有房顫、感染性心內膜炎等可致心源性腦栓塞疾病。（2）近期有急性感染性疾病。（3）嚴重心、肝、腎功能障礙或造血系統疾病，腫瘤等。（4）近期服用糖皮質激素或免疫抑制劑以及溶栓治療者。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2分組 腦梗死組根據第四屆全國腦血管病學術會議通過的腦卒中患者神經功能缺損評分標準中“改良愛丁堡-斯堪的那維亞卒中量表”進行分組，輕型組0～15分，中型組16～30分，重型組31～45分。根據評分標準分為輕型23例、中型24例、重型18例。根據頭顱CT或MRI所示病灶大小，將腦梗死分為大面積腦梗死（病灶直徑＞4cm）亞組15例，中等面積腦梗死（病灶直徑1.5～4.0cm）亞組28例，小面積腦梗死（病灶直徑＜1.5cm）亞組22例。

1.3方法 （1）標本采集：所有觀察對象清晨抽取空腹肘靜脈血5ml，標本用無菌生化抗凝試管留取，以3000r/min離心10min后分離血清，置于-20℃冰箱內保存待測。（2）TNF-α和TNF-β檢測：采用ELISA法檢測，試劑盒購自美國TPI公司，儀器為FJ-2008型自動γ免疫計數儀檢測。操作嚴格按試劑盒使用說明書進行。此外，甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-c）檢測。TC、TG用酶法，HDL-c、LDL-c用直接法測定。

1.4統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件包。計量資料以 （x±s）表示，組間比較采用單因素方差分析及兩兩比較的SNK法測定，不同面積組間血清中TNF-α和TNF-β含量比較采用成組的t檢驗，并且進行方差齊性檢驗。TNF-α和TNF-β之間相關性采用Pearson相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1腦梗死組與對照組一般資料比較 腦梗死組患者的年齡、性別構成與對照組相比差異無統計學意義（P＞0.05），而TG、TC、LDL-c濃度均明顯高于對照組（P＜0.05），但HDL-c濃度則明顯低于對照組（P＜0.05）。2.2 腦梗死組與對照組TNF-α和TNF-β含量變化 有臨床神經功能缺損的各組腦梗死患者TNF-α和TNF-β水平均分別明顯高于對照組（P＜0.05）；重型組血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、輕型組（P＜0.01）；中型組TNF-α和TNF-β水平均高于輕型組（P＜0.05）。

2.3梗死面積不同的腦梗死患者TNF-α和TNF-β測定結果 大面積組患者血清TNF-α和TNF-β明顯高于中等面積組和小面積組（P＜0.01）。中等面積組明顯高于小面積組，差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.4腦梗死組血清TNF-α和TNF-β水平與梗死面積、神經功能缺損評分的關系 血清TNF-α和TNF-β呈直線正相關（r=0.328，P＜0.05）。TNF-α和TNF-β水平分別與梗死面積、臨床神經功能缺損程度呈正相關（P均＜0.01）。

3　討論

研究發現TNF-α具有促進修復以及造成腦組織缺血再灌注損傷的雙重作用［2］。體外實驗中，給予神經元興奮性、代謝性及氧化應激性損傷刺激后，TNF-α具有促使軸索再生的保護作用［3］。在腦梗死炎癥反應中，TNF-α通過損傷血管內皮細胞、增加血管壁通透性，釋放多種炎性介質誘導產生炎癥，以及增加興奮性氨基酸、一氧化氮及自由基等的產生和釋放，產生神經毒性，從而加重腦梗死后組織損傷的作用。有研究表明TNF-α表達與細胞凋亡呈正相關，表達水平下降，神經細胞凋亡下降，從而減輕了炎癥反應［4］。

TNF-β主要是由Th1分泌，可誘導活化B細胞和巨噬細胞。TNF-β可引起核酸內切酶和caspase家族的級聯反應促使細胞凋亡［5］。TNF-β在心腦血管疾病發病過程中的機制尚不清楚。TNF-β基因多態性與腦梗死密切相關，TNF-β基因高表達導致腦卒中發生的幾率增大［6］。在基因水平上炎性細胞因子的變異可能會導致患者患腦卒中危險性增高。本資料發現腦梗死患者血清中TNF-α、TNF-β水平明顯高于正常對照組，說明急性腦梗死患者發病早期即出現TNF-α、TNF-β升高現象。在梗死面積方面，大面積組患者血清TNF-α和TNF-β水平明顯高于中等面積組和小面積組，中等面積組明顯高于小面積組。在神經功能缺損評分方面，重型組血清TNF-α和TNF-β水平均高于中、輕型組（P＜0.05）；中型組的血清TNF-α和TNF-β水平均高于輕型組（P＜0.05）。血清TNF-α和TNF-β水平分別與梗死面積、臨床神經功能缺損程度呈正相關，說明兩者之間存在密切的關系。表明腦缺血后過度表達的TNF-α和TNF-β可以加重缺血再灌注損傷。隨著梗死面積及神經功能缺損的加重，血管內皮完整性受到破壞，內皮功能損傷越嚴重，越加劇炎癥反應，TNF-α和TNF-β表達越高，因此，推測TNF-α和TNF-β的水平在一定程度上反映了患者病情的輕重程度。

此外，本資料顯示血清中TNF-α和TNF-β呈直線正相關。兩者在腦梗死的發生發展過程中起到正反饋的聯合作用。因此如何有效降低TNF-α和TNF-β水平，對于減輕炎癥反應，神經功能的恢復，改善預后具有重要意義，這也為治療腦梗死提供了新的方法。本資料不足之處在于實驗樣本量小、干擾因素較多，一定程度上實驗結果會產生偏倚，因此需要長期、大樣本量、多中心、多因素的隨機雙盲對照研究。

1 Trenkmann M，Brock M，GayRE，et al.Tumor necrosis factor alphainduced microRNA-18a activates rheumatoid arthritis synovial fibroblasts through a feedback loop in NF-kappa B signaling.Arthritis Rheum，2013，65（4）：916～927.

2 Chu WM. Tumor necrosis factor.Cancer letters，2013，328（2）：222～225.

3 Mattson MP，Barger SW，Furnkawa K，et al.Cellular signaling roles of TGF beta TNF alpha and beta App in brain injury responses and Alzheimers disease.Brain Res Rev，1997，23（1～2）：47～61.

4 Chen J，Wu X，Shao B，et al. Increased expression of TNF receptorassociated factor 6 after rat traumatic brain injury. Cell Mol Neurobiol，2011， 31（2）： 269～275.

5 張全云，丁月東，汪允珍.氯胺酮對兔全腦缺血-再灌注海馬細胞凋亡及TNF-β和IL-10的影響.臨床麻醉學雜，2012，28（12）：1226～1229.

6 Szolnoki.Lymrphotoxin-alpha gene 2526 allelie variant is a risk factor for large-vesel-associated ischemic.Stroke，2005，27（2）：205～211.

314100 浙江省嘉善縣第一人民醫院神經內科（廖慶紅汪飛 陳詩莉）

200040 上海復旦大學附屬華山醫院神經內科（付建輝）