鼻咽癌組織中多聚免疫球蛋白受體的表達及意義

黎騁，鄭裕明 ，郭俊宇，馬麗萍，陸愛英，湯敏中，吳惠惠，蔡永林

(1梧州市紅十字會醫院，廣西梧州543002；2 梧州市衛生系統鼻咽癌病因學及分子機理重點實驗室)

?

鼻咽癌組織中多聚免疫球蛋白受體的表達及意義

黎騁1，鄭裕明2，郭俊宇1，馬麗萍1，陸愛英2，湯敏中2，吳惠惠3，蔡永林2

(1梧州市紅十字會醫院，廣西梧州543002；2 梧州市衛生系統鼻咽癌病因學及分子機理重點實驗室)

摘要：目的觀察多聚免疫球蛋白受體(pIgR)在鼻咽癌組織中的表達變化，并探討其意義。方法采用免疫組化法檢測279例鼻咽癌患者(鼻咽癌組)和30例慢性鼻炎患者(對照組)組織中的pIgR，并分析其與臨床病理特征的關系。結果觀察組和對照組的pIgR陽性表達率分別為15.8%(44/279)、90.0%(27/30)，P<0.05。pIgR表達與鼻咽癌患者年齡、性別、吸煙史、腫瘤病理類型和臨床分期無關(P均>0.05)，與血清EB病毒殼抗原免疫球蛋白A(VCA/IgA)、EB病毒早期抗原免疫球蛋白A有關(P均<0.05)。鼻咽癌組5年總生存率為64.6%，pIgR表達陽性者5年總生存率明顯低于pIgR表達陰性者(χ2=4.714，P=0.030)。多因素分析顯示，僅T分期和N分期與總生存期相關。結論 pIgR在鼻咽癌組織中呈低表達，可能參與鼻咽癌的發生、發展，可作為鼻咽癌患者生存期的預測指標。

關鍵詞：鼻咽癌；多聚免疫球蛋白受體；EB病毒；慢性鼻炎

鼻咽癌是鼻咽部上皮性惡性腫瘤，轉移率較高，EB病毒(EBV)感染、遺傳因素和環境暴露是其主要病因[1]。EBV進入鼻咽上皮的具體機制至今尚未明確，但研究發現多聚免疫球蛋白受體(pIgR)在其中起重要作用[2～5]。pIgR是免疫球蛋白超家族的一員，在機體免疫過程中發揮重要作用。近年來，pIgR在判斷腫瘤臨床分型和患者預后方面的作用成為研究熱點[6, 7]，但在鼻咽癌中少見報道。2013年3月～2014年3月，我們檢測了279例鼻咽癌患者腫瘤組織中pIgR的表達水平，并探討其在鼻咽癌發生、發展中的作用。現報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選取2001年1月～2005年5月我院保留的臨床資料完整的無遠處轉移鼻咽癌患者的組織石蠟標本279例份(鼻咽癌組)，患者中男199例，女80例；年齡21～73歲，平均47歲；均經活檢病理證實為鼻咽癌，取活檢前均未接受放化療等腫瘤?？浦委煟黄渲薪腔憎[狀細胞癌(KSCC) 30例、非角化性癌(NC) 245例、未分化癌(UC) 4例；T1期30例、T2期146例，T3期46例，T4期57例；N0期77例，N1期104例，N2期77例，N3期21例；臨床總分期為Ⅰ期10例、Ⅱ期101例、Ⅲ期97例，Ⅳa期71例；血清EBV殼抗原免疫球蛋白A(VCA-IgA)滴度≥1∶80者108例、EBV早期抗原免疫球蛋白A (EA-IgA)滴度≥1∶40者67例。另取30例份慢性鼻炎患者組織石蠟標本為對照組，其中男21例，女9例；年齡21～73歲，平均46歲。本研究經梧州市紅十字會醫院倫理委員會批準同意。兩組年齡、性別具有可比性。

1.2鼻咽癌組織中pIgR表達檢測采用免疫組化法。切片用二甲苯進行常規脫蠟，梯度乙醇和蒸餾水水化。0.5%H2O2封閉內源性過氧化酶10 min，自來水沖洗接著用蒸餾水沖洗，0.01 mol/L、pH 6.0檸檬酸緩沖液進行高溫修復抗原2 min，冷水降溫后自然冷卻，PBS沖洗。滴加阻斷過氧化物酶RE7102抑制內源性過氧化物酶5 min，PBS沖洗3次，一抗工作液室溫孵育60 min，PBS洗3次；滴加二抗，室溫孵育30 min，PBS洗3次，二氨基聯苯胺顯色5 min，自來水洗，蒸餾水洗，蘇木精復染2 min，自來水洗。脫水，透明，封片。以PBS代替一抗作空白對照。pIgR陽性表達主要定位于細胞質。在高倍鏡下(×400)隨機選取5個陽性細胞數多的視野，計數陽性細胞及總細胞數。陽性細胞百分比≤5%為陰性，6%～25%為弱陽性，26%～50%為中度陽性，≥51%為強陽性。弱陽性、中度陽性、強陽均視為pIgR陽性表達。

1.3統計學方法采用SPSS 13.0統計軟件。各組陽性率比較采用χ2檢驗，兩組間等級資料比較采用Mann-Whitney U秩和檢驗，多組間等級資料比較采用Kruskal-Wallis秩和檢驗；Kaplan-Meier法計算鼻咽癌組5年生存率，用Cox比例風險回歸模型做多因素分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1 兩組pIgR陽性表達率比較觀察組和對照組的pIgR陽性表達率分別為15.8%(44/279)、90.0%(27/30)，P<0.05。

2.2 pIgR的表達與鼻咽癌臨床病理參數的關系 見表1。

表1　pIgR表達與鼻咽癌臨床病理參數的關系

2.3鼻咽癌組pIgR表達與生存期的關系全組中位隨訪時間為60個月(4～70個月)，5年總生存率為64.6%。pIgR表達陽性者的5年總生存率為51.6%，顯著低于pIgR表達陰性者(67.0%)，P=0.030。Cox比例風險回歸模型多因素分析顯示，僅T分期和N分期與總生存期相關(P均<0.05)，見表2。

表2　Cox比例風險回歸模型預后多因素分析結果

3討論

pIgR是一個跨膜蛋白，在其胞外段有3個互補決定區形成配體結合表面以非共價鍵連接IgA二聚體。在轉運過程中，上皮細胞基側膜上的pIgR首先與IgA結合，將受體-多聚免疫球蛋白復合物轉運穿過胞質在細胞頂端。pIgR胞外段水解形成分泌成分，以保護結合的多聚IgA不被蛋白水解酶降解[8]。Ocak等[9，10]認為，肺癌發生早期pIgR表達就已下調，pIgR通過維持細胞分化來抑制腫瘤發生。本研究發現，觀察組和對照組的pIgR陽性表達率分別為15.8%、90.0%，說明鼻咽癌組織中存在pIgR低表達，與Chang等[11]報道一致。有報道稱，pIgR高表達是上消化道腺癌有較低復發風險和更長生存期的獨立預測因子[3]，且與較低侵襲性亞型的上皮性卵巢癌相關[4]。胰腺癌中，腫瘤特異性的pIgR高表達意味著腫瘤分型較好；pIgR低表達預示患者有預后較差[5]。但也有學者持相反意見，Ai等[6]研究發現起源于乙型肝炎的肝癌中高表達的pIgR與轉移潛能大及更差的預后相關。pIgR表達陽性的骨肉瘤總生存時間明顯短于比pIgR表達陰性的骨肉瘤[10]。神經膠質瘤中，pIgR表達陽性與更差的預后相關[7]。但本研究Cox多因素分析并未顯示其可作為獨立預后因素，可能與樣本量較小有關。

上皮細胞感染EBV的機理至今仍不清楚，目前研究普遍認為受體學說是EBV感染細胞的主要機制。pIgR蛋白被發現在鼻咽上皮上作為肺炎球菌受體，該受體亦可調理IgA-EBV復合物的細胞內吞作用和轉吞作用，遞送EBV到腔面[12]。如果上皮細胞丟失極性，或者存在pIgR突變，病毒的轉運過程就可能失敗從而導致EBV感染[13]。我們前期研究顯示，多數鼻咽癌患者中血清EBV-IgA滴度較高，VCA-IgA和EA-IgA檢測可作為篩查鼻咽癌高危人群的重要指標[14, 15]。研究發現，pIgR表達與鼻咽癌患者年齡、性別、吸煙史、腫瘤病理類型和臨床分期無關，與血清VCA-IgA、EA-IgA有關，也間接提示pIgR在鼻咽癌的發生、發展中起重要作用。幾乎所有鼻咽癌活檢組織中均包含EBV[16]，但腫瘤細胞中pIgR表達降低，因此鼻咽上皮細胞中pIgR介導的EBV感染可能發生在早期pIgR表達下調之前。分析pIgR與鼻咽癌臨床病理特征的關系顯示，pIgR表達與患者的年齡、性別及吸煙史無關，與腫瘤病理類型和臨床分期亦無相關性；本研究發現，血清VCA-IgA、EA-IgA滴度越高，pIgR陽性表達率越高。綜上所述，pIgR在鼻咽癌組織中呈低表達，可能參與鼻咽癌的發生、發展。

參考文獻：

[1] 莫祥蘭, 黃永塔. 鼻咽癌遠處轉移分子機制研究進展[J]. 山東醫藥, 2015,55(8):103-105.

[2] Khattar NH, Lele SM, Kaetzel CS. Down-regulation of the polymeric immunoglobulin receptor in non-small cell lung carcinoma: correlation with dysregulated expression of the transcription factors USF and AP2[J]. J Biomed Sci, 2005,12(1):65-77.

[3] Fristedt R, Gaber A, Hedner C, et al. Expression and prognostic significance of the polymeric immunoglobulin receptor in esophageal and gastric adenocarcinoma[J]. J Transl Med, 2014,12(4):83.

[4] Berntsson J, Lundgren S, Nodin B, et al. Expression and prognostic significance of the polymeric immunoglobulin receptor in epithelial ovarian cancer[J]. J Ovarian Res, 2014(7):26.

[5] Fristedt R, Elebro J, Gaber A, et al. Reduced expression of the polymeric immunoglobulin receptor in pancreatic and periampullary adenocarcinoma signifies tumour progression and poor prognosis[J]. PLoS One, 2014,9(11):112728.

[6] Ai J, Tang Q, Wu Y, et al. The role of polymeric immunoglobulin receptor in inflammation-induced tumor metastasis of human hepatocellular carcinoma[J]. J Natl Cancer Inst, 2011,103(22):1696-1712.

[7] Niu H, Wang K, Wang Y. Polymeric immunoglobulin receptor expression is predictive of poor prognosis in glioma patients[J]. Int J Clin Exp Med, 2014,7(8):2185-2190.

[8] Asano M, Komiyama K. Polymeric immunoglobulin receptor[J]. J Oral Sci, 2011,53(2):147-156.

[9] Ocak S, Pedchenko TV, Chen H, et al. Loss of polymeric immunoglobulin receptor expression is associated with lung tumourigenesis[J]. Eur Res J, 2012,39(5):1171-1180.

[10] Wang X, Du J, Gu P, et al. Polymeric immunoglobulin receptor expression is correlated with poor prognosis in patients with osteosarcoma[J]. Mol Med Rep, 2014,9(6):2105-2110.

[11] Chang Y, Lee TC, Li JC, et al. Differential expression of osteoblast-specific factor 2 and polymeric immunoglobulin receptor genes in nasopharyngeal carcinoma[J]. Head Neck, 2005,27(10):873-882.

[12] Kaetzel CS. The polymeric immunoglobulin receptor: bridging innate and adaptive immune responses at mucosal surfaces[J]. Immunol Rev, 2005，20(6):83-99.

[13] Gan YJ, Chodosh J, Morgan A, et al. Epithelial cell polarization is a determinant in the infectious outcome of immunoglobulin A-mediated entry by epstein-barr virus[J]. J Virol, 1997,71(1):519-526.

[14] 鄧洪,曾毅,梁建平,等.488683人鼻咽癌普查基本方案分析[J].腫瘤,2005,25(2):152-154.

[15] 李軍,湯敏中,陸愛英,等.鼻咽癌患者治療過程中血清EB病毒抗體水平動態變化與近期療效的關系[J].腫瘤,2013,33(7):624-628.

[16] 饒潔,趙利容,羅泊濤,等.上皮-間質轉化及其在鼻咽癌中的作用研究進展[J].山東醫藥,2014,54(15):92-95.

收稿日期：(2015-09-07)

通信作者：蔡永林

基金項目：廣西自然科學基金項目(2012GXNSFAA053136)。

中圖分類號：R739.6

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2015)46-0072-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.46.032