鐘敏 肖巧請 王玨 趙承兵

硫酸多糖類藥物含量測定方式探析

鐘敏 肖巧請 王玨 趙承兵

本文綜合近幾年國內外研究的結果和資料,分析和闡述硫酸多糖類藥物含量的測定方式。以5個不同批次的硫酸軟骨素為例,對比和闡述部頒標準法與間苯三酚分光光度法在測定硫酸軟骨素含量上所產生的不同結果。

硫酸多糖類；含量；測定方式；準確性

硫酸多糖類型的藥物內含天然提取的糖胺聚糖以及硫酸多糖等,其中主要涉及到肝素和甘糖酯等［1］。根據我國相關衛生部門的藥品檢測標準,其內部含量的主要檢測方式為將其中的酸水解形成氨基己糖成分［2］。除此之外,其在堿性條件之下,在和乙酰丙酮出現反應的過程中,和對二甲氨基苯甲醛產生顯色性轉變,并作為其中重要的對照品,其中較為常用的含量測試方法為分光光度方法［3］。本文實驗中分析兩種不同檢驗方式在硫酸軟骨素含量測定中的不同效果 ,具體報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 提取軟骨素原料作為研究對象,硫酸軟骨素A為對照品,將五種不同批次的硫酸軟骨素原料分為五組,分別為A、B、C、D、E組。其中氨基葡萄糖的對照品來自于上海試劑藥廠,另外,乙酰丙酮、間苯三酚以及二甲氨基苯甲醛都屬于分析純。對比和分析五組產品在不同檢測方式下的不同效果。運用752型可見紫外分光光度計進行分析。

1.2 方法

1.2.1 形成間苯三酚分光光度法的相關性標準曲線 選取其中經105℃干燥4 h的硫酸軟骨素有關的對照品0.2068 g展開實驗,并將其全部放入10ml量瓶當中,接著添加適量水,使其發生溶效果,添加水使其達到刻度處的位置,并進行均勻搖晃。分別取0.2、0.6、0.4、0.8、1.0ml量放置在10ml的量瓶當中,并加水使其至1ml。另外,增加3ml間苯三酚溶液,并均勻搖晃,放置在沸水當中浴30min,接著拿出,使用冰水冷卻持續5min,添加冰醋酸使其達到刻度,均勻搖晃。另外取出1ml水,運用同樣方法進行操作,用于空白對照。在波長處的558cm處測量其吸收程度,并實現線性回歸。最后得出其標準曲線方程應為A=0.567C+0.110,r=0.9997,而其中的線性范圍應是0.253～1.260mg/ml。

1.2.2 運用間苯三酚分光光度辦法對試驗品的含量進行測驗 提取0.5 g經105℃干燥4 h的硫酸軟骨素試驗品,進行精密稱定。將其放置在50ml的量瓶當中,增加適量水,振動搖晃。放置使其溶,并增加水進行稀釋,使其達到刻度處,均勻搖晃。取出1ml并按照上文所述進行操作,測驗其本身的吸收程度,以標準曲線為準計算出含量。

1.2.3 運用部頒保準法對試驗品進行含量測定 以標準中規定的方式為準,測定其中氨基己糖的有效含量,將其乘以2.82,并最后換算成為硫酸軟骨素的有效含量。將兩種不同辦法得出的含量結果進行對比和分析。

2 結果

運用硫酸軟骨素A組作為其中主要的對照品,表現出線性關系較好。但是,當運用在測驗其中供試品有效含量的過程中,其檢測結果相對部頒標準法明顯更高。見表1。

3 討論

近幾年,硫酸多糖類型的藥物已經逐漸開始運用在臨床治療過程中,其在抗凝血和抗血栓等方面都發揮重要的作用。多糖在作為藥物的情況下,其內部含量的多少直接決定藥效,而因為其結構構成不存在均一性,致使不同測量方式可能導致測量結果存在比較大的差異,且不利于藥物的運用和研究。因此,如何尋找最為準確地硫酸多糖類型藥物含量的測定方式是當前影響相關藥物含量鑒定等的重要問題之一。

硫酸軟骨素主要來自于豬的喉骨以及鼻中骨等軟骨組織當中,屬于一種天然性粘多糖［4］。肝素屬于其中核心五糖,是促使其發揮抗凝活性的重要組成結構。間苯三酚發在多糖類藥物含量測驗當中運用較為普遍,主要原理是多糖物質在有關酸性條件之下,降解成為單糖形式,之后再分解成為糠醛,所得到的產物可和間苯三酚發生反應,并顯示顏色,且能夠在標準波長部位產生紫外吸收情況,間接測驗出其多糖含量［5］。這種測驗方式操作構成比較簡單,且耗費的時間較短,具有操作方面的優勢,受到較大范圍內的歡迎,且經常運用在實驗過程當中。

本文研究結果中發現,當運用硫酸軟骨素A組作為其中主要的對照品的過程中,表現出的線性關系較好。但是,當運用在測驗其中供試品有效含量的過程中,其檢測結果相對部頒標準法明顯更高。出現類似情況的主要原因與硫酸軟骨素相關部頒標準有關,其主要憑借氨基葡萄糖展示其內部含量。因此,在實際將其轉變成為硫酸軟骨素含量的過程中,應提前確定該供試藥品的基本單位是硫酸乙酰氨基葡萄糖以及葡萄糖醛酸。但是,硫酸軟骨素的原始材料一般是硫酸軟骨素的A、B組等混合型物品,混合比例相互不一,且其中不同批次的硫酸軟骨素中相對的分子量也存在較大差別。因此,在實際測量過程中可能出現轉換性誤差。

綜上所述,間苯三酚法相對來說操作更加迅速而有效,且比較適合運用在掌握一定規律后的內部質量控制當中。

［1］薛依婷,李春霞,管華詩.硫酸多糖類藥物含量測定方法研究進展.中國藥學雜志,2014(4):271-274.

［2］曾洋洋,韓章潤,楊玫婷,等.海洋糖類藥物研究進展.中國海洋藥物,2013(2):67-75.

［3］隋玉榮.多糖類藥物的研究進展.天津藥學,2013(2):41-43.

［4］馮優,王鳳山,張天民,等.多糖類藥物的研究進展.中國生化藥物雜志,2008(2):129-133.

［5］胡川梅,鄭璐俠,陳鋼.多糖類藥用輔料的應用及其質量分析進展.中國藥品標準,2015(1):31-35.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.07.216

2015-12-10］

518000 深圳市藥品檢驗研究院