六神曲發酵機理研究方向的思考△

陳彥琳，王云庭，杜杰，金峰，周旭，任玉珍

(中國中藥公司，北京 102600)

·專題·

六神曲發酵機理研究方向的思考△

陳彥琳，王云庭，杜杰，金峰，周旭，任玉珍

(中國中藥公司，北京102600)

目的：整理歸納古代本草對于六神曲文獻記載及現代研究成果，思考六神曲發酵機理研究方向，為六神曲工藝規范化研究提供思路。方法：按照年代梳理六神曲古代文獻，并參考當時的農藝等雜項書籍作為佐證，梳理六神曲名稱、制備方法、藥物功效等記載，追溯六神曲出現的背景，從六神曲名稱的由來推測其炮制原意，進而結合現代研究文獻，對六神曲的發酵機理研究提出自己的推論和思考。結果：通過文獻整理，認為六神曲來源于古代酒曲，其“神”字由其釀酒效率高而來，由于用途不同，其制法逐漸脫離酒曲，微生物種類變化和鮮藥材的加入，都與增強消食療效有關。

六神曲;發酵;研究方向

經凈制或處理后的藥物，在一定的溫度和濕度條件下，由于霉菌和酶的催化分解作用，使藥物發泡、生衣的方法稱為發酵法。發酵是中藥炮制技術中極具中國特色的一項技術。長期以來，由于發酵中藥發酵原理不夠清晰，與藥效相關聯的質量控制指標未能確定，以及國家和地方標準中缺乏發酵中藥的質量標準，造成了發酵類中藥特別是發酵中藥飲片的發酵工藝及質量控制研究不夠充分和深入，部分品種由于產量小，工藝復雜，逐步消失，部分品種則由于沒有明確的質量控制指標，長期處于“修合無人見”的狀態，質量良莠不齊，其中以六神曲最具代表性。

六神曲為苦杏仁、赤小豆、青蒿、蒼耳草、辣蓼等藥加入面粉(或麥麩)混合后經發酵而成的曲劑。具有健脾和胃，消食調中的功效。用于治療飲食停滯，胸痞腹脹，嘔吐瀉痢，小兒腹大堅積。性味甘、辛，溫。入脾、胃經。2010版藥典和部頒標準中共收載了6種不同的六神曲炮制品，其中生六神曲健脾開胃，并有發散作用。炒六神曲健脾和胃作用增強，發散作用減弱，麩炒六神曲具有甘香氣，以醒脾和胃為主。用于食積不化，脘腹脹滿，不思飲食，腸鳴泄瀉。焦六神曲消食化積力強，以治食積泄瀉為主。

六神曲的發酵機理研究與物質基礎研究開始于20世紀80年代，從檢測六神曲中淀粉酶和蛋白酶活力[1]開始探討六神曲發酵機理與質量控制方法，之后的研究則主要圍繞工藝和酶活力檢測進行，對于其機理的探討主要集中在藥效方面，發現六神曲能較好地促進胃的分泌功能和增強胃腸的推進功能，并對腸道菌群和微生態有調節作用[2-5]。通過對目前六神曲研究文獻的整理和分析歸納，得出以下推論：

1 六神曲發源于古代酒曲，其“神”字的起源與釀酒效率有關

唐《本草綱目》認為六神曲“蓋取諸神聚會之日造之，故得神名”。但是清代章穆《調疾飲食辨》認為“醫非巫覡，安用六神醫方治病”，認為“六神”之名，屬于制藥之人附會牽扯所致[6]。那么，六神曲之名到底從何而來，我們采用追溯文獻的方式進行了系統梳理。既然“六神”之名并不可靠，那文獻追溯就從“曲”開始。曲的古字為“麴”，能夠找到“曲”記載可以追溯到商周時代，如《尚書·說命》“若做酒醴，爾惟曲蘗”，《禮記·月令》中有“秫稻必齊，曲蘗必時，湛熾必潔，水泉必香，陶品必良，火齊必得”[7]，可見古代的曲即為造酒之曲。神曲之名，則首見于北魏《齊民要術》[8]，其中載3種制備神曲的方法。這時的神曲，為小麥粉進行蒸、炒等處理后，與生小麥粉進行混合后發酵制成，制神曲的主要目的還是釀酒，《齊民要術》記載神曲一斗，釀酒可以耗米三石，相對笨曲一斗，耗米六斗，從發酵能力來說，神曲是笨曲的5倍。雖然《齊民要術》所載制神曲過程中，有的方法是要立“曲人”和“曲王”、對東南西北中五方神靈祝禱，有一定的迷信因素，但是并非所有神曲組方都需要設“曲神”、“曲神”數量也并非限定六個，且并無“六神”之名，造曲時間基本上是陰歷七月，與后代文載六月制曲也不相同，因此，我們認為，《齊民要術》中“神曲”之名除去神化的因素以外，很可能是由于其釀酒效率高而得。

唐代《藥性論》首次載入神曲作為藥名[9]，本書作者甄權生于公元540年，卒于公元643年，而賈思勰《齊民要術》著作時間大約在北魏末年(公元533-544年)，其年代相去不遠，因此，推測此時入藥的神曲應與制酒的神曲為同一物。從本草記載來看，在《藥性論》之后，唐代《外臺秘要》記載了“六月六日曲”；到了宋代，晚于釀酒專著《北山酒經》的本草著作《寶慶本草折衷》載神曲制法：“以六月六日取河水和面作堅塊，如磚樣，紙裹，掛于風勁處，經月可用。或作小團，不裹，或以紅印印其上。而今諸處亦以七月七日依此法造之者”[10]，元代《養陰論》也記載了以白面、消水和生姜制神曲的方法[11]，這個制法已經與《北山酒經》所載釀酒所用酒曲的制備方法有較大差距[12]，至此，可認為，早期入藥的六神曲即為古代酒曲，但經過長期入藥使用，其制法逐漸脫離酒曲，功效逐步轉為藥用。

2 六神曲的發酵機理與其治療目的有關，與酒曲既有區別又有聯系

唐根據上述文獻的分析，六神曲發源于古代酒曲，因此，推測古代酒曲的功效應與六神曲相同，明《本草經疏》云：“古人用曲，即造酒之曲，其氣味甘溫，性專消導，行脾胃滯氣，散臟腑風冷。神曲乃后人專造，以供藥用，加倍于酒曲”，可見早期六神曲與酒曲功效相近，且六神曲功效強于酒曲，這個區別是由其用途決定的。

古代酒曲主要用于釀制米酒，是直接以未經發芽糖化的谷物作為原料來進行米酒的釀制[13]。從現代對于酒曲的發酵機理研究結果來看，米酒曲中主要菌群為霉菌和酵母菌，酵母菌不能直接利用淀粉進行繁殖，而是需要霉菌在發酵早期產生多種淀粉酶將淀粉分解為糖，在糖化作用過后，酵母菌才能利用分解得到的單糖和低聚糖大量繁殖[14]。研究結果表明，采用傳統米酒曲發酵，這個霉菌糖化過程可能持續60h以上，而發酵到第6d，則是釀酒酵母占主導地位，霉菌基本消失[15]。因此，傳統的酒曲則兼有糖化和酒化兩種作用，其目的是通過微生物和酶的作用將淀粉轉化為乙醇，完成其釀造的任務。

六神曲則主要做藥用，宋代唐慎微《證類本草》云：“曲，療臟腑中風氣，調中下氣，開胃消宿食。主霍亂，心膈氣，痰逆，除煩，破癥結及補虛，去冷氣，除腸胃中塞，不下食，令人有顏色，六月作者良，陳久者入藥，用之當炒令香，六畜食米脹欲死者，煮曲汁灌之立消，落胎并下鬼胎。又，神曲，使，無毒。能化水谷宿食癥氣，健脾暖胃”[16]。這里已經將酒曲與神曲并作一條，以開胃、消宿食為主要功效。從現代對于六神曲的研究來看，六神曲中菌群包含了細菌、酵母菌和真菌三類，其中，以真菌種類和鑒別的研究較多，不同研究者報道了在六神曲成品中分離出不同種類的多種真菌，可見真菌類在六神曲成品中是主導菌群；從酵母菌的分類鑒別報道來看，市售六神曲中報道有釀酒酵母，而實驗研究自行發酵六神曲中則未報道有釀酒酵母[17-22]，這個結果與酒曲的微生物分析結果是有很大區別的。分析原因，不排除市售部分樣品中按照某些地方規范添加酒曲的可能性。除去釀酒酵母外，也分離出其他酵母菌，而這些酵母菌數量明顯少于霉菌。因此，推測六神曲可能是以糖化作用為主，完成開胃消食的主要任務。

3 六神曲發酵機理推測與研究方向的思考

根據上述推理、歸納古代文獻和現代實驗研究成果，對于六神曲發酵機理和研究方向，形成以下3個推測：

3.1對于藥效物質基礎的推測

對六神曲的研究發現，經過發酵過程，六神曲中淀粉含量降低，單糖和低聚糖總量增加[23]，結合上述假說分析，六神曲的發酵過程有可能是通過真菌代謝產物和酶的雙重作用，一部分是由微生物產生的酶直接作用于米面食物本身，使其在適宜的環境中進行分解、液化，一部分是由真菌分解淀粉酶產生的低聚糖類，這類成分有良好的整腸作用，可以調整菌群結構，維持腸道正常環境，調節腸道功能[24-25]，這些功能能夠在一定程度上達到“消宿食”的療效，與六神曲的功效有一定的相關性，而六神曲的機理研究也可從這兩個方向入手，進行藥效部位的篩選，并采用離體或整體動物實驗的方法，驗證不同酶活力和不同低聚糖含量的六神曲樣品功效是否有所差別。

3.2對于微生物種類及作用的推測

關于六神曲中微生物的作用，推測其發酵過程應似酒曲，前期由真菌起主要作用，分解淀粉，但其發酵時間短于酒曲，是由于神曲不需要像酒曲一樣繼續讓釀酒酵母等主要利用糖的微生物大量繁殖，消耗糖類產生乙醇，而是需要由部分能夠直接利用淀粉的細菌在此過程中與真菌協同產生單糖和低聚糖，發揮其治療功效。

3.3對于加入鮮藥材作用的推測

至于加入的青蒿、辣蓼、蒼耳草等成分，有可能是對釀酒酵母的產生有抑制作用，所以被古代制藥者利用，最終附會而成“六神”。現代研究已經表明，蒼耳葉揮發油對釀酒酵母有抑菌活性[26]，其他倆種藥材是否也是如此，可以在后續研究過程中設計相關實驗來進行證明。

[1] 黃國能.神曲,等.藥曲中消化酶的檢測與質量標準的探討[J].中成藥研究，1981，(5)：18-20.

[2] 胡靜，楊旭東，夏清平,等.中藥“神曲”中有益菌在腸道微生態調節作用的實驗研究[C].全國微生態第八屆學術研討會論文集.大連：中國微生態學雜志編輯部，2002，435.

[3] 胡靜，楊旭東，夏清平,等.中藥“神曲”對脾虛小鼠腸道菌群調整及腸保護作用研究[J].牡丹江醫學院學報，2004，(25)2：19-20.

[4] 莊彥華，楊春輝，楊旭東,等.中藥“神曲”對腸易激綜合征患者腸道菌群的調節和臨床療效的研究[J].中國微生態學雜志，2005，17(1)：41-43.

[5] 郭麗雙，楊旭東,等.中藥“神曲”對腸道菌群失調小鼠調整和保護作用的觀察[J].中國微生態學雜志，2005，(17)3：174-175.

[6] 鄭金生主編.中華大典·醫藥衛生典·藥學分典[M].四川出版集團巴蜀書社(成都)2013：第八卷：993.

[7] 薛愚主編.中國藥學史料[M].人民衛生出版社(北京)1984年第1版：25.

[8] 賈思勰著.石聲漢校釋.齊民要術選釋，中華書局(北京)2009：卷七

[9] 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會編.中華本草[M].上海科學技術出版社1998：8·762.

[10] 鄭金生主編.中華大典·醫藥衛生典·藥學分典[M].四川出版集團巴蜀書社(成都)2013：第八卷：986.

[11] 中醫研究院中藥研究所主編.歷代中藥炮制資料輯要[M].

[12] 王慧敏.論《北山酒經》中的制曲及釀酒技術[J].中國釀造2013，32(7)：148-150.

[13] 余華青，張廷皓.漢代釀酒業探討[J].歷史研究1980，(5)：99-116.

[14] 劉婧竟，喬發東.國內外甜酒曲研究進展[J].中國釀造2010，(9)：21-25.

[15] 許磊，羅成，劉華戎,等.醪糟發酵微生物的分離鑒定[J].食品與發酵科技2012，48(2)：65-70.

[16] 宋·唐慎微著.證類本草[M].華夏出版社(北京)1993：593.

[17] 高慧，賈天柱.單一菌種發酵神曲的質量比較研究[J].中國中藥雜志2008，33(20)：2323-2325.

[18] 張麗霞，高文遠，王海洋.六神曲中酵母菌的鑒定[J].中國中藥雜志2012：37(13)：1928-1931.

[19] 蘆艷卿，王志紅，季蘭芳.含六神曲的中成藥衛生標準的研究[J].中醫藥研究1993，(4)：59.

[20] 鄔吉野，李瑩，王德馨,等.六神曲的發酵菌種分離及純種發酵考察[J].中國實驗方劑學雜志2013，19(16)：12.

[21] 陳娟，焦曉林，楊春勇,等.分離培養方法結合PCR-SSCP技術分析六神曲中的真菌類群[J].中國中藥雜志2014，(21)：.

[22] 王秋紅，蘇陽，王荔慧,等.六神曲中真菌的分離與鑒定[J].中國實驗方劑學雜志2014，20(7)：122-127.

[23] 劉燕.六神曲發酵過程分析及消食機理初探[D].華南農業大學2011碩士學位論文..

[24] 金其榮.低聚糖及根霉低聚糖的生理功能[J].食品科學1994，169(1)：5-7.

[25] 吳昊，楊思行，張艷杰.功能性低聚糖的開發現狀及在食品中的應用[J].中國乳品工業2001，29(3)：41-45.

[26] 肖家軍，王云，戴仕奎,等.蒼耳葉揮發油的提取及抑菌和抗氧化性研究[J].食品工業科技2011，32(7)：115-118.

HypothesisofResearchonFermentationMechanismofShenqu

CHENYanlin，WANGYunting，DUJie，JINFeng，ZHOUXu，RENYuzhen

(ChinaNationalTraditionalChineseMedicineCorp.，Beijing102600，China)

AncientShenquliterature and modern studies were summarized.Considering preparation method，drug efficacy records，tracing the background ofShenqu，it is proposed，that firstly，Shenqusource is the ancient distiller's yeast of high efficiency，secondly，variation of microbial species and fresh herbs join inShenqu，and enhance the efficacy of digestion.The two hypotheses will give a clue as to the direction of the research on fermentation mechanism ofShenqu.

Shenqu；fermentation mechanism；hypothesis

10.13313/j.issn.1673-4890.2016.7.002

2016-03-30)

國家中醫藥管理局中醫藥行業科研專項中藥類項目“六神曲等7種中藥發酵技術及規范化應用研究”(項目編號201507004-03)

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任玉珍，主任藥師；研究方向：中藥炮制與中藥飲片質量控制；Tel：(010)61252955，E-mail：renjl@163.com