DNA倍體定量分析聯合TCT在宮頸癌篩查中的應用

陳麗艷（云南省曲靖市婦幼醫院病理科，云南 曲靖 655000）

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DNA倍體定量分析聯合TCT在宮頸癌篩查中的應用

陳麗艷
（云南省曲靖市婦幼醫院病理科，云南 曲靖 655000）

【摘要】目的 探討聯合應用DNA倍體定量分析聯合宮頸薄層液基細胞學檢查（TCT）在宮頸癌篩查中的應用價值。方法 回顧性分析我院自2011年8月至2013年12月開展DNA倍體定量分析，5020例患者進行TCT和DNA倍體定量分析，同時進行陰道鏡下取活檢的184例患者為研究對象，以術后病理診斷為金標準，計算兩種方法對宮頸病變的檢出陽性率。結果 DNA倍體定量分析中見異倍體的179例，病理診斷陽性率為54.89%；TCT檢測陽性者140例，病理診斷陽性率為50.54%；TCT結合DNA倍體定量分析，總病理診斷陽性率為56.52%。結論 聯合TCT和DNA倍體定量分析應用于宮頸癌篩查，可提高宮頸病變的檢出率，提高細胞學檢查的質量。

【關鍵詞】DNA倍體定量分析；TCT；宮頸癌

宮頸癌（cervical cancer，CC）是最常見的女性生殖道惡性腫瘤之一，其發病率有逐漸年輕化、增多化的趨勢[1]。我院自2011年8月2013年12月開展DNA倍體定量檢測及TCT檢查對宮頸病變進行檢測，以病理診斷為標準，探討TCT聯合DNA倍體定量分析在宮頸癌篩查中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2011年8至2013年12月進行DNA倍體定量分析及TCT檢查的患者5020例，如DNA倍體定量分析檢測異倍體細胞≥3個或DNA倍體定量分析檢測異倍體細胞1～2個同時TCT診斷ASCUS及以上病變或未發現異倍體細胞而TCT診斷LSIL及以上病變的，再行宮頸多點組織活檢的共184例患者。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑：用麥克奧迪（廈門）全自動細胞圖像分析系統、TDZ5-WS多管架自動平衡離心機、MX-S（F）混勻儀、CJJ78-1磁力加熱攪拌器、電熱恒溫培養箱、保存液、Feulgen染色試劑。

1.2.2 標本采集與處理：婦科臨床醫師使用窺陰器暴露宮頸后，用棉球輕輕擦去宮頸表面分泌物，然后用與標本瓶配套的專用刷從宮頸外口插入宮頸管內旋轉3～5圈取出，再將刷頭放入裝有固定液的標本瓶中，蓋上瓶蓋，貼上標簽送檢。

1.2.3 制片方法：標本確認并編號；排列玻片；添加細胞分散劑；將采集的細胞液在震蕩器上震蕩5 s，倒在離心管中，離心沉淀（離心機轉速1500轉/分鐘）5 min，倒去上清液，稀釋細胞沉淀，轉移細胞懸液，分別滴2張薄片（以便一張進行巴氏染色做常規細胞學診斷（TCT），另一張用Feulgen DNA染色做DNA定量檢測），晾干。

1.2.4 DNA倍體定量檢測：用麥克奧迪（廈門）全自動細胞圖像分析系統，對已進行Feulgen DNA染色玻片上的每一個細胞核進行掃描分析，測量所有宮頸上皮細胞核DNA含量并分析其倍體。判定標準：①正常：正常2倍體細胞為主（DNA指數為1），未見異倍體細胞及異倍體細胞峰。②少量DNA異倍體細胞：出現1～2個DNA指數＞2.5的細胞。③異常：DNA指數＞2.5時，或2倍體與4倍體之間的細胞數超過被測細胞總數的10%時。以②～③為陽性。

1.2.5 細胞學診斷TBS分類：根據1991年美國國家腫瘤研究學會制定的診斷標準為[2]：①正常范圍（NILM），②意義不明確的不典型鱗狀上皮細胞或腺細胞（ASCUS或AGC），③鱗狀上皮內低度病變（LISL）；④鱗狀上皮內高度病變（HSIL）；⑤鱗癌（SCC）/腺癌。以②～⑤為陽性。

1.2.6 病理診斷：①正常范圍（慢性宮頸炎）；②CINⅠ（輕度宮頸鱗狀上皮內瘤樣病變）；③CINⅡ（中度鱗狀上皮內瘤樣病變）；④CINⅢ（重度宮頸鱗狀上皮內瘤樣病變或原位癌）；⑤CA（浸潤性宮頸鱗癌或腺癌），以②～⑤為陽性。

1.2.7 統計方法：數據用SPSS16.0統計軟件分析，計量資料比較采用方差分析，以P＜0.05有統計學意義。

2 結 果

2.1 TCT和DNA倍體定量分析分別與病理診斷的關系：184例研究對象中，DNA倍體定量檢測檢出陽性179例，檢出率97.28%（179/184）；DNA倍體定量分析中見異倍體細胞數量為1～2個的有20例患者中，病理診斷為CIN 和宮頸癌者11例，陽性檢出率為55.0%。DNA倍體定量分析中見異倍體細胞數量≥3個的有159例患者中，病理診斷為CIN和宮頸癌者90例，陽性檢出率為56.6%。其中CINⅠ37例，占23.27%；CINⅡ19例，占11.95%；CINⅢ26例，占16.35%，浸潤癌6例，占3.77%；腺癌2例，占1.26%，正常（宮頸炎）69例，占43.39%，則DNA倍體定量檢測總的病檢陽性率54.89%（101/184）。TCT檢出陽性140例，檢出率為76.09%（140/184），其中ASCUS74例，檢出CIN和宮頸癌42例，占56.76%；LSIL41例，檢出CIN和宮頸癌29例，占70.73%；HSIL17例，檢出CIN和宮頸癌14例，占82.35%。ASC-H4例，檢出CIN和宮頸癌4例，占100%，AGC2例，檢出CIN和宮頸癌2例，占100%，SCC2例，檢出CIN和宮頸癌2例，占100%，則TCT總的病檢陽性率50.54%（93/184）（P＜0.05）。

2.2 聯合TCT和DNA倍體定量分析與病理診斷的關系：DNA倍體定量檢測異倍體細胞≥3個而TCT無改變者44例，病理診斷陽性11例，未能檢出DNA異倍體細胞而細胞學診斷為LSIL者5例，病理診斷陽性2例。而TCT結合DNA倍體定量檢測總病檢陽性率56.52% （93+11/184）（P＜0.05）。

3 討 論

3.1 DNA倍體定量分析在宮頸癌篩查中的作用：DNA倍體定量分析技術作為21本世紀一種新的宮頸癌檢測方法，具有準確度高、敏感性強和重復性好的優點，可作為大規模宮頸癌篩查的一種新方法，主要原理是通過測量細胞核內DNA含量的變化，在形態改變不明顯前即可檢測出那些病變細胞。本研究采用DNA倍體定量分析系統聯合TCT檢查，進行婦女宮頸癌的篩查，以人群自愿參與普查為基礎，共采集宮頸細胞樣本5020份，發現184例需進行陰道鏡下取活檢，這部分人是我們重點調查跟蹤對象。總的病檢陽性率54.89%高于TCT總的病檢陽性率50.54%（有統計學差異P＜0.05）。且當宮頸脫落細胞標本中出現大量的DNA異倍體細胞（異倍體細胞數量≥3個），其CIN和宮頸癌陽性檢出率更高（56.6%）。且在DNA倍體定量分析中見異倍體細胞數量≥3個，病檢陽性90例的患者中，有53例均為高級別上皮內病變，表明DNA倍體異常細胞的數量與CIN和宮頸癌的發生密切相關，對宮頸癌的臨床診斷有重要指導意義。其可以作為宮頸癌篩查的手段之一。

3.2 聯合DNA倍體定量檢測和TCT檢查在宮頸癌篩查中的應用：本組研究顯示，聯合DNA倍體定量檢測和TCT檢查，DNA倍體定量檢測異倍體細胞≥3個而TCT無改變者44例，病理診斷陽性11例，也就是說在本次研究184例患者中，TCT漏診11例，漏診率0.06%（11/184）；且在漏診的11例患者中，有6例CINⅠ，2例CINⅡ，3例CINⅢ，還有1例是鱗癌。這是因為TCT的診斷存在人為經驗不足且帶有主觀判斷標準，還受制片質量、標本本身因素影響。而未能檢出DNA異倍體細胞而細胞學診斷為LSIL者5例，病理診斷陽性2例，則DNA倍體定量檢測漏診2例，漏診率0.01%（2/184）。且病檢結果1例為HPV感染，另1例為局灶CINⅠ。而TCT結合DNA定量檢測總病檢陽性率56.52%，則避免了上述漏診率的存在。因此將TCT檢測與DNA倍體定量分析相結合，能有效減少漏診、誤診，彌補TCT檢查的不足，其陽性率更高。但因本次研究未發現TCT無改變及DNA倍體無異常的患者行陰道鏡取病理組織活檢，因此，對二者聯合篩查宮頸癌未做漏診率統計，有待隨訪完善資料。

因此，應用自動細胞DNA倍體定量分析系統可以對涂片內的所有細胞核進行定量檢測分析，可避免人為疏漏、經驗不足和只從單一的細胞形態改變來診斷的缺陷，能發現肉眼所不能觀察到的細微改變，可彌補細胞學診斷的缺陷，從而提高了診斷技術。而結合液基細胞學檢查和病理活檢可以早期診斷宮頸癌前病變及宮頸癌，對宮頸癌前病變及宮頸癌能減少漏診、誤診，可提高宮頸病變的檢出率，提高細胞學檢查的質量。

參考文獻

[1] 朗景和.子宮頸上皮內瘤變的診斷和治療[J].中華婦產科雜志, 2001,36(5):261.

[2] 顧美皎.TBS系統中異常上皮細胞的診斷和處理[J].中國實用婦科與產科學,2003,19(8):466-467.

中圖分類號：R737.33

文獻標識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）09-0169-02