HPV-DNA聯合TCT檢查對于診斷宮頸疾病的價值及其病理分型研究

孫茂春，康曉琳

(煙臺東方醫院婦產科，山東 煙臺，264000)

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HPV-DNA聯合TCT檢查對于診斷宮頸疾病的價值及其病理分型研究

孫茂春，康曉琳

(煙臺東方醫院婦產科，山東 煙臺，264000)

[摘要]目的研究HPV-DNA聯合薄層液基細胞學(thin prep cytologic test，TCT)檢查對于診斷宮頸疾病的價值及其病理分型，為慢性宮頸炎的防治及宮頸癌的早期干預提供依據。方法選擇2012年9月至2015年12月在煙臺東方醫院婦科門診就診的女性患者761例為研究對象，采用HPV-DNA聯合TCT對患者進行篩查，同時進行宮頸組織病理活檢，比較不同篩查方法的價值。結果761例患者TCT檢查結果中正常或炎癥反應565例(74.24%)，TCT檢查結果異常者196例(25.76%)，其中包括ASCUS者97例(49.49%)、LSIL者56例(28.57%)、HSIL者41例(21.43%)，SCC者2例(1.02%)。761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。761例患者中，TCT結果顯示細胞學陽性196例，陽性率為25.76%；HPV-DNA結果顯示HPV-DNA陽性214例，陽性率為28.12%，HPV-DNA檢測方法陽性率略高于TCT，但兩種檢測方法陽性率比較無顯著性差異(χ2=1.082，P>0.05)。對于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查，病理學診斷結果提示HPV-DNA檢測敏感度及特異度均稍高于TCT檢測方法，兩種方法聯合檢測敏感度及特異度均最高。結論TCT和HPV-DNA聯合檢測在宮頸病變篩查中的廣泛應用，可在很大程度上降低宮頸癌的漏診率，提高診斷效率。

[關鍵詞]薄層液基細胞學檢查；人乳頭瘤病毒檢測；宮頸癌；診斷價值；病理分型

1資料與方法

1.1研究對象

選擇2012年9月至2015年12月在煙臺東方醫院婦科門診就診的女性患者761例為研究對象，患者年齡23～59歲，平均37.16±3.44歲，就診原因包括婦科查體、白帶增多、陰道不規則出血、月經失調、同房后出血等，所有患者均進行TCT和HPV-DNA檢查，對于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查。排除標準：①有陰道鏡檢查及宮頸活檢禁忌癥者；②既往有宮頸切除病史及手術史；③既往有盆腔放射治療史者；④任一檢測方法陽性但不同意進行陰道鏡檢查者。所有患者均知情同意并自愿參加本次研究。

1.2薄層液基細胞學檢測

選擇月經干凈后3～7天檢查(絕經者無時間要求)，取材前48小時禁止性生活，檢查前3d禁止沖洗陰道、使用陰道內藥物。將TCT專用采樣刷置于宮頸管內并抵住宮頸，旋轉3圈，停留10s，然后將采樣刷置入液基細胞保存液中，專用制片機處理成薄層涂片，巴氏染色后進行鏡檢，細胞學診斷按照國際癌癥協會推薦的(2001)分級系統作為診斷標準，分為正常或炎癥反應、意義不明的不典型鱗狀細胞(atypical squamous cells，ASCUS)、低度鱗狀上皮內病變(low-grade squamous intraepithelial lesions，LSIL)、高度鱗狀上皮內病變(height of squamous intraepithelial lesion，HSIL)、鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。

1.3HPV-DNA檢測

使用羅氏-Lightcycler全自動熒光定量PCR檢測儀，使用HPVl6/18型核酸檢測試劑盒。設臨界值對照、陰性對照、強陽性模板經稀釋成103、104、105、106、107，用于做標準曲線，陽性者檢測結果≥500拷貝。檢測13種HPV分型，其中分為高危型和低危型兩大類，高危型HPV分型包括8種：HPV16、18、31、33、45、53、56和58；低危型HPV分型包括5種：HPV6、11、42、43和44，高危型HPV病毒合并低危型病毒感染為混合感染。

1.4病理學檢查

對337例患者中TCT、HPV-DNA任一檢測方法陽性及雙陽性者進行陰道鏡檢查，若陰道鏡未發現病灶或圖像不清晰者，在宮頸3、6、9、12點處取材活檢，若陰道鏡圖像異常者在病灶最嚴重部位或可疑部位取材活檢，按照2003年WHO《乳腺與女性生殖系統腫瘤病理與遺傳學》診斷標準，結果分為：慢性炎癥、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌。

水云天蘇醒過來，臉上已經顯出辭世的倦容。老人睜開眼睛，顯現出生命跡象，深情地望著林志。林志坐在床前，輕輕地說：“老師，您有什么事，吩咐我啊！”

1.5觀察指標

觀察TCT細胞學檢測結果、HPV-DNA檢測結果，對任一檢測方法陽性者經陰道鏡宮頸活檢進行病理診斷，比較兩種檢測方法單獨檢測及聯合檢測的靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值。

1.6統計學方法

所有數據均使用SPSS 18.0統計軟件進行分析，計數資料的比較方法采用卡方檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1薄層液基細胞學檢測結果

761例患者TCT檢查結果中正常或炎癥反應565例(74.24%)，TCT檢查結果異常者196例(25.76%)，其中包括ASCUS者97例(49.49%)、LSIL者56例(28.57%)、HSIL者41例(21.43%)，SCC者2例(1.02%)。與病理檢查結果對照后發現，196例TCT檢查結果異常者87例(44.39%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ58例(29.59%)，見表1。

2.2HPV-DNA檢查結果

761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。與病理檢查結果對照后發現，214例HPV-DNA陽性者121例(56.54%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ50例(23.36%)，見表2。

2.3薄層液基細胞學檢測與HPV-DNA檢查效果比較

761例患者中，TCT結果顯示細胞學陽性196例，陽性率為25.76%；HPV-DNA結果顯示HPV-DNA陽性214例，陽性率為28.12%，其中TCT及HPV-DNA雙陽性者178例(23.39%)。HPV-DNA檢測方法陽性率略高于TCT，但兩種檢測方法陽性率比較無顯著性差異(χ2=1.082，P>0.05)，見表3。

2.4不同檢測方法敏感度、特異度、陽性預測值及陰性預測值等比較

對于TCT和HPV-DNA檢查任一陽性者共247例進一步行陰道鏡和組織活檢病理檢查，病理學診斷結果：炎癥128例，CINⅠ61例，CINⅡ29例，CINⅢ24例，宮頸癌5例，HPV-DNA檢測敏感度及特異度均稍高于TCT檢測方法，兩種方法聯合檢測敏感度及特異度均最高，見表4。

3討論

3.1薄層液基細胞學檢測在宮頸疾病篩查中的應用

宮頸癌的發生發展是一個較為漫長的過程，其早期可無癥狀，當出現接觸性出血或者陰道異常流血流液時，多數患者已經到中晚期，宮頸癌的手術或放化療給女性的身體及心理造成極大傷害。因此，對宮頸癌前病變和早期癌的及時高效篩查是預防和治療宮頸癌，提高患者生存率，降低其死亡率的關鍵[4]。臨床研究表明，從CIN發展到浸潤癌大約需經過8～12年的時間，在未經治療的CINⅡ-CINⅢ患者中，約有5%～30%可發展為浸潤癌，但接近10%～40%的病變可發生逆轉，而HPV感染后大約經過20年左右才可能致癌[5]。本研究結果發現，761例患者TCT檢查結果中異常者196例(25.76%)，其中最常見為ASCUS者(97例)，其次為LSIL和HSIL，與病理檢查結果對照后發現，196例TCT檢查結果異常者87例(44.39%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ58例(29.59%)。而單用TCT檢查敏感度和特異度分別為86.65%和62.47%，宮頸相關疾病的診斷中，采用TCT篩查已經比較普遍，但是若將其作為單一檢測手段，可能因為操作等原因造成假陽性或者假陰性的出現。因此，不能將TCT作為確診宮頸癌的唯一診斷依據。

3.2HPV-DNA檢測在宮頸疾病篩查中的應用

HPV是一組DNA病毒，高危型HPV主要有16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68 型，不同的類型致癌率也有一定的差異。HPV感染好發于年輕女性，大多數是一過性的，可自行消退，僅大約3%患者感染HPV后轉為持續狀態[6]。HPV感染持續存在1～2年可引起宮頸輕微病變，高危型HPV感染持續存在10～15年部分患者可發展為宮頸癌，因此，HPV篩查對預防宮頸癌有重要意義。本研究結果發現，761例患者中HPV-DNA陽性者214例(28.12%)，其中高危型HPV-DNA陽性者149例(69.63%)，低危型HPV-DNA陽性者65例(30.37%)。與病理檢查結果對照后發現，214例HPV-DNA陽性者121例(56.54%)為慢性宮頸炎，其次為CINⅠ50例(23.36%)，單用TCT檢查敏感度和特異度分別為82.32%和58.44%。高危型 HPV 檢測在預防宮頸癌的方案中越來越受到醫務工作者的重視，加上HPV的取材簡單方便，在臨床上被廣泛應用。有研究顯示，在宮頸癌患者中，16、18 型的檢出率就高于其他型[7]。 因此，高危型 HPV 分型檢測對病情的追蹤、監測、評價及預后有指導作用。但單獨用于宮頸癌的篩查有一定局限性，可能存在假陽性或假陰性，且不能從中知道是否處于持續感染或宮頸是否已致病變及病變輕重。

3.3薄層液基細胞學聯合HPV-DNA檢測在宮頸疾病篩查中的價值

文獻報道，單獨使用TCT或HPV-DNA在診斷宮頸疾病篩查中均有一定的局限性，而兩者聯合應用可提高宮頸癌篩查的價值，王愛春等[8]研究TCT及HC2-HPV-DNA檢測對絕經后婦女宮頸癌篩查的應用價值評估，可提高診斷篩選的陽性檢出率、診斷符合率、敏感性，有效降低漏診。本文以宮頸活檢病理檢查為金標準來判斷兩種檢測方法單獨使用或聯合應用的價值，結果發現兩種方法聯合檢測敏感度及特異度均最高，提示TCT和HPV-DNA 聯合篩查可以互補不足，提高宮頸疾病的檢出率及篩查準確程度，其漏診率低，在臨床上適宜大力推廣，實現早診斷、早治療、早預防宮頸癌的發生。

[參考文獻]

[1]韓歷麗,趙同香,鄧小紅.宮頸癌篩查工作評價指標的比較研究[J].中華婦幼臨床醫學雜志(電子版),2014,10(6):757-761.

[2]Pimple S,Muwonge R,Amin G,etal.Cytology versus HPV testing for the detection of high-grade cervical lesions in women found positive on visual inspection in Mumbai India[J].Int J Gynaecol Obstet,2010,108(3):236-239.

[3]付玉梅,張曉坤,梁惠芬,等.HC2-HPV-DNA聯合TCT篩查宮頸癌早期及癌前病變的臨床分析[J].實用醫學雜志,2012,28(11):1823-1825.

[4]Wang S Y,Yang H W,Zhang H T,etal.A surface plasmon resonance-based system to genotype human papillomavirus[J].Cancer Genet Cytogenet,2010,200(2):100-105.

[5]Dahlstr?m L A,Ylitalo N,Sundstr?m K,etal.Prospective study of human papillomavirus and risk of cervical adenocarcinoma[J].Int J Cancer,2010,127(8):1923-1930.

[6]McAdam M,Sakita J,Tarivonda L,etal.Evaluation of a cervical cancer screening program based on HPV testing and LLETZ excision in a low resource setting [J].PLoS One, 2010, 5(10): e13266.

[7]徐興云,趙蔚,李桂軍,等.細胞學聯合人乳頭瘤病毒雜交捕獲檢測在宮頸上皮內瘤樣病變篩查中應用[J].中華醫學雜志,2012,92(35):2 503-2 505.

[8]王愛春,顧依群,王軍,等.TCT及HC2-HPV-DNA檢測對絕經后婦女宮頸癌篩查的應用價值評估[J].現代腫瘤醫學,2011,19(1):133-135.

[專業責任編輯：安瑞芳]

Value of HPV-DNA combining TCT in diagnosis of cervical disease and pathological typing

SUN Mao-chun, KANG Xiao-lin

(Department of Gynecology and Obstetrics, Yantai Dongfang Hospital, Shandong Yantai 264000, China)

[Key words]thin prep cytology test (TCT); human papilloma virus (HPV) test; cervical cancer; diagnostic value; pathological type

[Abstract]Objective To study the value of HPV-DNA combining TCT examination in diagnosis of cervical disease and pathological types, so as to provide basis for prevention of chronic cervicitis and early intervention of cervical cancer. Methods During the period of September 2012 to December 2015 totally 761 female patients visiting the outpatient department of gynecology in Yantai Dongfang Hospital were selected as research objects, and HPV-DNA combining TCT was used for screening. Meanwhile, cervical biopsy was performed to compare different methods. Results Among 761 patients TCT examination results of 565 cases (74.24%) were normal or inflammatory, and those were abnormal in 196 cases (25.76%), including 97 cases (49.49%) of ASCUS, 56 cases (28.57%) of LSIL, 41 cases (21.43%) of HSIL, and 2 cases (1.02%) of SCC. There were 214 cases (28.12%) with positive HPV-DNA results, including 149 cases (69.63%) of high risk type and 65 cases (30.37%) of low risk type. Of 761 patients, TCT results showed positive cytology in 196 cases (25.76%). HPV-DNA results showed that HPV-DNA was positive in 214 cases and the positive rate was 28.12%. The positive rate of HPV-DNA testing method was slightly higher than that of TCT, but two methods were not significantly different in positive rate (χ2=1.082,P>0.05). A total of 247 cases were positive for TCT or HPV-DNA examination, and they further accepted colposcopy and biopsy pathologic examination. Pathological diagnosis results suggested HPV-DNA detection had higher sensitivity and specificity than TCT detection method, and the sensitivity and specificity of combining two methods were highest. Conclusion Combined detection of HPV-DNA and TCT is widely used in cervical lesions screening, and it reduces missed diagnosis rate of cervical cancer to great extent and improves diagnostic efficacy.

[收稿日期]2016-05-17

[作者簡介]孫茂春(1964-)，女，主治醫師，主要從事婦女保健方面的工作。

[通訊作者]康曉琳，副主任技師。

doi:10.3969/j.issn.1673-5293.2016.05.033

[中圖分類號]R711.7

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-5293(2016)05-0647-03