實驗動物微生物國家標準研討會紀要

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實驗動物微生物國家標準研討會紀要

向志光

(中國醫學科學院醫學實驗動物研究所，北京100021)

我國的實驗動物國家標準于1994年制定，其后進行了2次修訂。現行實驗動物微生物國家標準于2011年頒布實施。隨著實驗動物科學及相關學科的發展，我國的實驗動物國家標準需要適時更新。為此中國實驗動物學會2015年11月份在石家莊市召開了實驗動物微生物國家標準研討會，旨在對實驗動物微生物國家標準做充分的研討，為國家標準的修訂做出準備。

此次研討會與會代表分別來自實驗動物的管理機構、實驗動物專業研究機構、高校以及研究所、實驗動物生產單位等，代表覆蓋了實驗動物領域的各個環節。會議邀請了藥明康德的周聰穎博士、清華大學的常在博士、中國醫學科學院醫學實驗動物研究所的秦川教授和魏強教授做了專題報告。

來自藥明康德的周聰穎博士首先就“SPF”級動物的定義以及實驗大小鼠制定健康監測方案時需考慮的因素進行了闡述。周博士熟悉國外實驗動物的管理方式，她介紹無特定病原菌(SPF)名詞意味著排除了對宿主致病的特定的病原菌清單，在國外SPF并沒有一個統一的規定，也沒有統一的標準來遵守。各個不同的實驗動物設施均根據各個設施的實際情況自行制定SPF動物需要排除病原體的清單。被列入SPF列表的病原體基本屬于3個種類：人獸共患病原，引起動物疾病的病原，對研究產生干擾的病原。周博士列舉了引起實驗動物種群病原感染的諸多因素，并對因生物材料移植來源的攜帶病原體進行了較為詳細測闡述。

周博士介紹，在國外最初設定SPF標準的多是實驗動物的生產單位。為了表明自身產品的質量，實驗動物生產廠家將各自的實驗動物健康監測數據對用戶公開，并根據客戶的實際需求對動物產品進行了分類，這種分類多是根據設施來源，比如屏障設施或是隔離包(器)生產的動物，它們的微生物等級因為環境不同，所以控制的項目也有一定差別。客戶可以根據自己的需要選擇合適的實驗動物。某一實驗所用動物是否需要排除某一病原體，或是在某一設施制定自己的SPF標準時，使用者需要自行做出評估。

周博士比較了我國國家標準列出的病原與國外大部分實驗動物生產機構的異同。對于國外監測而未列入我國國家標準的病原體，她列舉了小鼠諾如病毒、螺桿菌屬細菌和牛棒狀桿菌進行了具體分析。是否需要將某一病原列入SPF列表受到具體情況的影響，設施本身的水平、研究的具體內容、所用動物的品系等均是考量因素。

周博士強調了內部監控計劃制定的重要性。各個實驗動物設施需要根據各自的病原感染風險制定監控計劃，動物流動性低的設施檢測頻率可以適當降低，而動物流動性高，感染風險高的設施就應該制定更為嚴格的監控計劃。在具體檢測方式上周博士介紹了采樣的策略，對于感染率不同的病原體，應該制定不同的抽樣數，以保障不漏檢。她對于哨兵動物的實驗也做出了介紹。然而對于陰性檢測報告的理解，也只是表示在動物群中的患病率(陽性動物)低于假設患病率。

最后，周博士闡述了對于動物實驗結果的理解，如，陰性測試結果也并不一定表示動物群里沒有病源。報告結束后與會專家與周博士交流了國外實驗動物排除病原的基礎研究概況。周博士介紹了大多排除病原體對于動物以及動物實驗的影響的研究也并不充分，不同的實驗動物設施也多采用實驗動物供應商提供的病原列表，這種做法是一種保守的處理方式。

清華大學的常在博士就國外部分動物設施小鼠微生物和寄生蟲質量分析進行了報告。清華大學每年從國外不同機構進口多個批次的實驗動物，在進口文件中實驗動物提供方給出了動物清晰的微生物背景。對于實驗動物攜帶的病原體它們并不回避。例如綠膿桿菌、MNV等病原體在進口動物中也多有攜帶。當動物提供方給出清晰的微生物背景資料后，動物接受單位就更清楚該如何處置。如果攜帶病原對于實驗研究沒有明確影響，且該動物不需繁殖，可以在一定區域直接進行實驗，但如果攜帶的某些病原對于其設施是需要排除的，這樣的動物就需要進行凈化處置。

來自中國醫學科學院醫學實驗動物研究所的魏強教授作為現行實驗動物微生物國家標準的起草人之一，對我國的實驗動物微生物國家標準進行了回顧性介紹。魏教授介紹了我國國家標準的制定與修訂，從三次版本來看，第一次版本起到“從無到有”的歷史作用，第二次修訂主要起到精簡、提高作用，第三次修訂起到更規范、更科學、更適用的作用。總體是伴隨著實驗動物整體發展而不斷發展、提高。

國家標準是全國實施的標準，應該是準入性的基本標準，也可以理解為“最低限制”性標準。目前標準既含有就高不就低的原則，又有“要符合中國國情”的成分，比如清潔級動物。結果是，既有國家標準的理念，又有行業、企業標準的痕跡，處于高不成低不就的狀態。

魏教授建議取消現有的實驗動物四個等級劃分：4個等級的劃分不符合所有動物特性和環境要求，也阻止了一些動物作為“實驗動物”的資格，處于“實驗用動物”的狀態，既不科學，也不適用。

建議制定實驗動物微生物、寄生蟲通用標準，即SPF等級標準：將國標回歸到基礎定位，即所謂最低標準。病原檢測項目即排除的病原重點分為3類：引起本動物疾病病原、人獸共患病病原、對實驗明顯有影響的病原。不再包含條件致病菌和環境指標性病原。

秦川教授對標準體系作用和改革方面做了系統闡述。目前實驗動物標準體系建設不健全，局限于質量標準；實驗動物標準化水平不高，存在質量不合格動物；實驗動物標準檢測成本偏高，限制行業發展；實驗動物質量檢測試劑缺乏，增加檢測難度；實驗動物質量重檢測而輕監測，實驗動物標準化研究的投入嚴重不足，對實驗動物標準化重要性認識有待提高，從事實驗動物標準化的人才缺乏，教育培訓不足，這些現狀制約著生命科學和生物醫藥等相關學科和產業的發展。 國家科技部、質檢總局和標準委等有關部門把建成符合經濟社會和科技發展的新型技術標準體系作為改革的主要內容之一，提出要加強強制性標準，完善推薦性標準，培育和發展社會團體標準，改革企業標準備案制度，使強標更強，推標更優，團標更活，企標更高。

迎合國家政府職能改革的契機，實驗動物領域需要進行團體標準制定的工作。團體標準是為滿足市場、科技快速變化及多樣性需求，由專業領域內具有影響力并具備相應能力的社會組織和技術聯盟制定的標準。

團體標準以實驗動物行業發展與市場需求為導向、由中國實驗動物學會主導制定。團體標準是對國家標準的有益補充、后備軍。團體標準成熟以后可以轉化為國家標準。鼓勵團體制定高于政府標準的一般產品與服務的競爭性標準，以體現產業發展需求與技術先進性，凝聚產業鏈、提升產品和服務的競爭力。團體標準應能夠促進產品和服務的交互性，保證不在制定目的或實施效果上給國際或國內貿易制造不必要障礙、阻礙競爭性技術和創新發展。在今后的工作中，中國實驗動物學會倡議專家做好實驗動物標準化體系建設，不僅要維護實驗動物的國家標準，同時也要積極參與到實驗動物團體標準的制定工作中。

之后與會專家就我國的實驗動物微生物國家標準進行了熱烈討論。討論的議題集中在以下幾個方面：

1國家標準中實驗動物微生物等級設立的問題

大部分與會專家認為我國的普通級、清潔級、或是SPF級都選擇性的排除了一些特定的微生物，原則上講都屬于SPF動物。但是作為不同級別再進行分類是由于我國的具體國情決定的。隨著時代變革，一些不合理的問題需要解決。廣東實驗動物監察所的黃韌研究員認為實驗動物的等級標準需要改革，特別是無菌動物這一特殊動物，沒有必要列入國家等級標準。對于改革后可能存在的問題，黃韌研究員列舉了一個很好的例子，猴的質量控制標準中，猴B病毒作為人獸共患病必須排除，但是我國猴群B病毒的感染率在30%~60%。標準在實際應用中存在操作困難。他還建議針對不同動物進行標準的編制，方便標準的動態維護。

來自軍事醫學科學院的范薇教授提出了我國的國家法規規定了實驗動物的四個等級，國家標準作為法規的解釋性文件應依從于法規。秦川教授、魏強教授、岳秉飛研究員介紹目前國家的法規也在修訂過程中，國家標準的再次修改可以配合法規的修訂。

2增加我國實驗動物基本數據的基礎研究的需求問題

孫德明教授表示了對我國實驗動物領域基礎研究的擔憂。他認為我國目前對于實驗動物的基礎研究不重視，很多文件都照搬國外的數據，對于我國實驗動物的基本數據缺乏調查研究。在討論會上，廣東實驗動物監察所的張鈺研究員介紹了他們對于非屏障設施嚙齒動物微生物攜帶情況的調查，而且來自新疆實驗動物中心的廖力夫主任也介紹了中國疾控系統對于野鼠的調查情況，為我國實驗動物的基礎研究提出了思路。秦川教授作為中國實驗動物學會的理事長，介紹了學會設立實驗動物國家標準相關研究的基金支持情況，并在研討會上鼓勵與會專家積極參與實驗動物基礎研究。

3實驗動物必須排除病原項目的選擇問題

對于實驗動物必須排除的病原項目，多數與會專家同意對人獸共患病、動物致病病原以及嚴重干擾科學研究的病原排除的標準。來自中檢院的岳秉飛研究員呼吁將一些在此標準之外的病原列為必要時檢測的項目。來自山東省實驗動物中心的金東慶研究員表達了對于減少檢測項目的擔憂，實驗動物生產企業的動物質量目前更多的是依靠國家標準的強制執行。商業企業的利益驅動下，國家標準中檢測項目的減少有可能會導致實驗動物質量下降。

4教學用動物的使用和管理的問題

多位來自教學單位的專家表達了對于教學中實驗動物使用的困惑。一方面嚙齒類動物不再有普通級動物，而教學示教多在開放的普通設施進行，這類動物實驗該如何界定？而涉及一些未列入國家標準的動物種類，如羊等，由于沒有國家標準，動物的生產單位無實驗動物生產許可證，動物的來源無法進行質量控制。多位專家對這樣狀況進行了討論。與會專家多認為實驗動物并不一定都是列入目前國家標準的動物。對于這些動物的管理，動物的基本防疫法規有借鑒作用。對于教學過程中動物的使用，必須做好風險控制，只要做好風險的評估，并采用有效措施，這些風險就可以在很大程度上避免。

5實驗動物微生物與寄生蟲檢測技術方法的問題

與會人員對于實驗動物的質量檢測結果的認識表達了一些看法。有些人認為某次實驗動物檢測不合格，而再次送樣病原不再檢出，因此懷疑檢測方法的準確性。多位專家解釋了不同檢測方法的靈敏度和特異性的局限性，但是檢測機構的專家表示了它們簽發陽性報告的慎重，陽性結果均需要重復實驗再次證明后才會出具報告。一旦報告陽性，該動物種群就不能排除該類病原體的感染可能性。而沒有檢出卻不能代表這個動物種群沒有該病原的感染。

秦川教授之后也提到了對于從業人員的職業技能培訓的問題，為了提高從業人員的技術水平，從事實驗動物質量檢測的技術人員需要進行職業培訓，以提高質量檢測工作的技術水平。

本次會議收集到各方面專家對于實驗動物國家標準再次修訂的意見和建議，這些意見和建議將會促進我國實驗動物微生物國家標準的完善與提高。

doi:10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.02.010

【中圖分類號】R-33

【文獻標識碼】A

【文章編號】1671-7856(2016) 02-0048-03

實驗動物國家標準論壇