(上海市奉賢區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,上海 201400)
口腔液在豬病檢測(cè)上的應(yīng)用
衛(wèi)秀余
(上海市奉賢區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,上海 201400)
血清中抗體的檢測(cè)在豬病診斷、健康狀況調(diào)查和免疫效果評(píng)估中使用廣泛,特別是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)有重大影響的豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬口蹄疫和豬偽狂犬病抗體每年都要進(jìn)行檢測(cè),以控制疫病的發(fā)生。現(xiàn)有的針對(duì)這些病原產(chǎn)生的抗體檢測(cè)試劑盒都是為了檢測(cè)血清中的IgG,但血清樣品采集費(fèi)時(shí)費(fèi)力、對(duì)豬的應(yīng)激明顯,尤其是對(duì)公、母豬采血時(shí)還會(huì)對(duì)采樣人員的安全造成一定威脅,經(jīng)常采血也不符合動(dòng)物福利的要求。而口腔液的采集比較方便,一般在豬只飼喂前1 h左右、用白色棉紗繩懸掛在豬欄上,讓豬自由咀嚼20~30 min后收集吸附在棉紗繩上的口腔液,冷藏保存送檢。
口腔液是一種唾液和黏膜滲出液的混合物,其中含有來(lái)自血液中的IgG以及黏膜免疫產(chǎn)生的分泌型IgA 和IgG抗體[1]。分泌型 IgA 由唾液腺的漿細(xì)胞分泌[2],而唾液中絕大多數(shù)的 IgG 來(lái)自血清,也有一些IgG 是局部產(chǎn)生的[3]。分泌型抗體的產(chǎn)生對(duì)抗原的中和以及感染狀態(tài)的確定有特別的意義[4]。使用口腔液進(jìn)行疾病診斷和健康評(píng)估在人醫(yī)上已經(jīng)得到已經(jīng)廣泛運(yùn)用,口腔液可以作為麻疹、腮腺炎、肝炎等疾病初步診斷分析的樣品[5]。口腔液在動(dòng)物疾病檢測(cè)和疫病監(jiān)測(cè)的應(yīng)用包括病原檢測(cè)如豬藍(lán)耳病病毒、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒等,抗體檢測(cè)如豬藍(lán)耳病抗體、豬圓環(huán)病毒2型抗體、口蹄疫抗體、偽狂犬抗體、非洲豬瘟抗體、豬瘟抗體檢測(cè)[6-8]等。但是在抗體檢測(cè)中由于口腔液中抗體的含量顯著低于血清中的含量,所以簡(jiǎn)單地直接使用檢測(cè)血清樣品的ELISA試劑盒檢測(cè)口腔液中相應(yīng)的抗體時(shí),往往與血清樣品的檢測(cè)結(jié)果符合率較低。我們經(jīng)過(guò)大量的篩選試驗(yàn),證實(shí)了使用口腔液進(jìn)行豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬口蹄疫和豬偽狂犬等抗體檢測(cè)時(shí),選用的ELISA試劑盒必須匹配是血清稀釋倍數(shù)在20倍以上的,這樣口腔液原液的抗體檢測(cè)結(jié)果與血清抗體檢測(cè)結(jié)果的符合率可以達(dá)到96%以上;如果試劑盒的血清稀釋倍數(shù)要求在40倍以上的,口腔液可以進(jìn)行2倍稀釋后進(jìn)行檢測(cè)。
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2016-06-22)