一例仔豬大腸桿菌的鑒別和治療

李小勇

(青海省海南州畜牧獸醫工作站青海海南州813000)

一例仔豬大腸桿菌的鑒別和治療

李小勇

(青海省海南州畜牧獸醫工作站青海海南州813000)

目前養豬場最常見和多發的仔豬大腸桿菌病是仔豬黃白痢，其中仔豬黃痢新生仔豬產后2～6 h即可發病，1～6日齡仔豬發病常見，7日齡以上仔豬很少發病，發病率可高達92.28%，死亡率可達68.41%～100%。仔豬黃痢主要臨床表現為病豬肛門失禁、排黃色或黃褐色稀便、精神不振、消瘦等，常于12～48 h內死亡；仔豬白痢7～50日齡仔豬均可發病，尤以15～35日齡仔豬常見，發病率較高，約為87.32%，死亡率較低，為25.31%左右。仔豬白痢主要臨床表現為病豬排乳白或灰白色的漿糊狀糞便、消瘦、行動遲緩、拱背、被毛無光澤等，病豬常于3～7日內康復或死亡[1，2]。

大腸桿菌；分離鑒定；藥敏試驗；診治

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集病料為疑似仔豬大腸桿菌性腹瀉病豬的直腸棉拭子。

1.1.2 實驗材料麥康凱培養基、馬丁肉湯營養瓊脂培養基、革蘭氏染色液、多種藥敏片及細菌生化反應小管、恒溫培養箱，倒置顯微鏡，各種量程的移液器及相應的一次性吸頭，無菌手套及鑷子、手術刀、載玻片等。

1.1.3 供試藥敏片氨芐青霉素、卡那霉素、福利平、頭孢噻肟、阿莫西林、氟苯尼考、復方新諾明、頭孢拉啶、阿奇霉素、慶大霉素、培氟沙星、強力霉素等12種抗生素藥敏片。

1.1.4 試驗動物5只清潔級昆明雌小白鼠與5只清潔級昆明雌雄小白鼠

1.2 試驗方法

1.2.1 病原菌分離培養在滅菌生理鹽水中浸入發病豬場采集的疑似大腸桿菌性腹瀉的發病仔豬直腸棉拭子病料，并且對其進行洗脫。在麥康凱瓊脂培養基上接種獲得的懸浮液劃線，并且將其在37℃的恒溫培養箱中進行24 h的培養，并且將其保存在-4℃的環境之下，將其用來備用。

1.2.2 革蘭氏染色試驗將麥康凱瓊脂培養基上的菌落涂片，在完成了革蘭氏染色之后，要采用油鏡對其進行鏡檢，對分離菌的染色特性以及形態進行認真觀察。

1.2.3 細菌生化反應試驗獲得以上分離菌之后，要對其進行VP試驗、枸櫞酸鹽試驗、糖發酵試驗、吲哚試驗以及MR試驗等生化反應，并且要對其反應的變化情況進行細致觀察。

1.2.4 動物回歸試驗挑取表面光滑的粉紅色單菌落，在馬丁肉湯營養瓊脂培養上對其進行接種，在37℃的環境之下對其進行18 h的培養，并且將存在于平板上的菌落采用無菌生理鹽水洗下來，對其進行研究，將其制作成為細菌懸液。然后再對10只小白鼠進行選取，對其進行分組，將其分為兩個小組，每個小組包括5只小白鼠，其中一組皮下注射菌懸液0.2 mL/只，另一組皮下注射滅菌生理鹽水0.2 mL/只。將死亡小白鼠及時進行剖檢，并取其心血接種于麥康凱瓊脂培養基上，37℃恒溫培養箱培養24 h后，對分離菌株進行鑒定。

2 結果

2.1 細菌分離培養結果分析

在麥康凱瓊脂培養基上對菌落進行培養之后，發現菌落的顏色主要呈現為粉紅色，有整齊的邊緣，其表面呈現出光滑的現象。在馬丁肉湯營養瓊脂培養基上對菌落進行培養之后，發現菌落的顏色主要呈現為灰白色，有整齊的邊緣，其表面呈現出光滑隆起的現象。這兩種菌落和大腸桿菌菌落具有高度相似的形態特征。

2.2 革蘭氏染色試驗結果分析

對菌落進行經革蘭氏染色之后，發現菌株主要的呈現形式為革蘭氏陰性小桿菌，將其放置在油鏡下進行觀察，發現菌落的兩端呈現出鈍圓的形態，并且大部分表現為單個菌落，這和大腸桿菌的染色特性是完全相符的。

2.3 細菌生化反應試驗鑒定結果分析

在完成分離菌株糖發酵試驗之后，從其試驗結果中可以看出這種菌株類型能夠對麥芽糖、甘露醇、葡萄糖以及酵乳糖進行有效發酵，進而能夠產氣產酸。但是這種類型的菌株并不能對蔗糖進行緩慢的發酵。在進行吲哚試驗以及MR試驗之后，其試驗結果均呈現出陽性，對其進行VP試驗以及枸櫞酸鹽試驗之后，其結果顯示出陰性。通過對以上生化反應的試驗結果進行研究分析，可以得出結論：這種分離菌株其實就是大腸桿菌。

3 討論

經細菌分離培養、革蘭氏染色試驗、細菌生化反應試驗及動物回歸致病性試驗等多種實驗研究結果均可證明本次發病的病原菌為大腸桿菌，由此可知該豬場發病豬由于感染了具有較強致病性的大腸桿菌而導致了仔豬大腸桿菌病的發生。■

（編輯：趙曉松）

[1]呂玲.仔豬腹瀉的防控措施[J].中國畜牧獸醫文摘,2014,30（8）: 112.

[2]李連振.仔豬大腸桿菌病及其防治[J].山東畜牧獸醫,2014,35（5）:39.

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.12.025