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綿羊支原體性肺炎防治措施

2016-02-01 21:39:01王興和
中國動物保健 2016年10期
關鍵詞:檢測方法

王興和

(內蒙古通遼市科爾沁區動物疫病預防控制中心內蒙古通遼028000)

綿羊支原體性肺炎防治措施

王興和

(內蒙古通遼市科爾沁區動物疫病預防控制中心內蒙古通遼028000)

綿羊支原體性肺炎俗稱綿羊傳染性胸膜肺炎是由綿羊肺炎支原體(Mycoplasma ovipneumoniae,Movi)引起的在綿羊和山羊中普遍流行的接觸性傳染病。該病在世界多個國家和地區都有報道,我國多個省市也有此病的發生。本病以高熱、咳嗽、肺間質增生性炎癥、肺和胸膜發生漿液性和纖維素性炎癥為病變特征。本病傳播能力強,感染羊群發病率高,患羊呈漸進性消瘦且羔羊死亡率較高,給養羊業造成了巨大的經濟損失。

1 病原學

綿羊肺炎支原體是介于病毒與細菌之間能夠進行自我復制,菌體直徑在200 nm左右,無細胞壁的原核微生物。Movi革蘭氏染色呈陰性,不易著色;姬姆薩染色時呈現藍紫色或淡紫色。我們知道大多數支原體在固體培養基上培養時形成的菌落形態呈“煎荷包蛋狀”,而Movi在固體培養基上培養時形成的菌落形態呈獨有的“桑葚狀”不具備大多數支原體菌落典型的“煎荷包蛋狀”特征。1963年Mackay等人首次從患病的綿羊體內成功分離到該支原體,直到 1972年才證明了其致病性,由Carmicheal等人提議將該支原體命名為綿羊肺炎支原體[1,2]。Movi不僅對綿羊有致病性,而且對山羊也有同樣致病性。1979年Linvingston等[3]首次從安哥拉山羊肺中分離出Movi,并報道其對山羊的致病性。

2 流行病學

支原體在自然界分布廣泛,人、動物、植物和昆蟲等都可攜帶支原體,在土壤和污水中也可檢測到支原體的存在。在我國綿羊支原體性肺炎夏末和秋季最為常見,舍飼羊一年四季都可發生。解慧梅等[4]對江蘇泰州地區36家羊場開展支原體性肺炎流行病學調查,結果發現各羊場羊都存在不同程度的發病,其中湖羊的發病率在30%左右,病死率達到60%。2011年寧夏靈武市一養殖戶養山羊119只,綿羊32只,全部發病,山羊死亡率27%,綿羊死亡率22%,經確診為支原體性肺炎[5]。本病在我國內蒙古、新疆、四川、甘肅等地均有報道,其傳播性強,感染率高,嚴重威脅著我國養羊業的發展。

3 臨床癥狀及病理變化

綿羊肺炎支原體感染羊只后根據病程和臨床癥狀,可將該病劃分為最急性型、急性型和慢性型三種類型[6]。

最急性型:病羊初期體溫急劇升高,可達41~42℃,目光呆滯,食欲廢絕,呼吸急促,咳嗽,流漿液性鼻液,聽診肺泡呼吸音減弱、消失;病羊常不能站立,臥地不起;可視黏膜發紺,病程一般為4~5 d,有時甚至不足1 d就死亡。

急性型:大多數患羊臨床癥狀屬于此種類型,病羊初期體溫升高,出現短而濕的咳嗽,呼吸困難,精神萎靡,食欲下降,有時伴有腹瀉癥狀,患病母羊多數流產;患羊病程一般為7~14 d。

慢性型:多發生于夏季,癥狀較輕,高熱不退,背毛雜亂,機體免疫力較低,容易出現并發癥從而導致死亡。

患羊病變部位主要在胸腔,心包和胸腔積液呈現淡黃色,有漿液性、纖維素性胸膜炎變化,胸膜、肋膜、心包粘連。肺臟纖維素化,初期炎性充血、水腫,后期發生肝變,但通常是一側肺葉發生肝變,很少發現兩側肺同時肝變的癥狀。

4 支原體性肺炎的診斷方法

4.1病原的分離培養

人們通常認為病原分離和體外培養的檢測結果最確實可信,然而支原體不能合成自身所需的多種營養物質,在分離培養時對營養的需求較為苛刻,而且代謝速率比細菌低,生長緩慢,所需實驗技術和操作方法復雜,在培養過程中很容易被雜菌污染,分離成功率低,因此不適合應用此方法做支原體病的常規檢查。

4.2電鏡觀察

應用電鏡檢測支原體是一種快捷簡便的方法,可根據各支原體獨特的形態結構,對各類支原體加以區分。然而電鏡設備價格昂貴,且需要專業的技術人員操作,因此不適合基層臨床疾病的檢測應用。

4.3血清學檢測方法

應用血清學方法進行診斷,要比病原分離方便快捷很多,可節約大量的時間,其主要包括酶聯免疫吸附試驗、間接血凝試驗和補體結合方法等。候相山等[7]利用綿羊肺炎支原體國際標準株Y-98,制備抗原,建立了一種間接ELISA方法,對幾個羊場進行了血清學調查,檢測結果與間接血凝試驗結果相比更加敏感、檢出率更高。宋蓉[8]利用自己建立的綿羊肺炎支原體固相競爭ELISA抗體檢測方法對46份支原體陰性血清和83份陽性血清進行檢測,檢出陰性血清44份,陽性血清全部檢出。趙萍等[9]應用IHA方法檢測65份陽性血清和60份陰性血清,結果陽性血清檢出率達100%,陰性血清陽性檢測率為0??梢娧鍖W檢測有較高的特異性和檢出率,對綿羊支原體性肺炎的診斷和疫情監測具有重要的意義。

4.4分子生物學檢測方法

目前,分子生物學檢測方法是實驗室檢測支原體常用的方法之一。聚合酶鏈式反應(PCR)技術比常規病原分離培養法快得多,比血清學方法更可靠,且可對早期病原菌感染的病料進行檢測。對于檢測類似支原體這種特別難培養的微生物來說,應用此方法更為有效。隨著人們對支原體的深入研究,開始根據支原體保守基因序列設計引物檢測支原體。儲岳峰等[10]根據絲狀支原體山羊亞種保守的CAP-21的 195 bp DNA片段和綿羊肺炎支原體16srRNA基因的361 bp DNA片段設計引物,建立了可同時檢測絲狀支原體山羊亞種和綿羊肺炎支原體的雙重PCR方法,其最低檢測限為0.1 ng的絲狀支原體山羊亞種DNA和0.01 ng的綿羊肺炎支原體DNA,能夠實現對這兩種支原體同時快速的鑒定和實驗室診斷。綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌可以導致綿羊出現相似的臨床癥狀,很難從病理剖檢方面進行區分。馮旭飛等[11]根據綿羊肺炎支原體hsp70基因和多殺性巴氏桿菌sp6基因分別設計引物,成功建立了綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌的雙重PCR檢測方法,為臨床上綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌混合感染的快速檢測、鑒定及流行病學調查提供了有利的工具。PCR檢測方法目前被廣泛應用于支原體的檢測,相信隨著分子生物學技術的迅猛發展,更靈敏、更有效,更有實用價值的PCR檢測方法將會在不久的將來出現。

5 綿羊支原體性肺炎的防治

綿羊支原體性肺炎是一種接觸性傳染病,而且在局部范圍內傳播迅速。平時要加強飼養管理,保持圈舍清潔,定期進行消毒,可選擇用1∶200倍稀釋的絡合碘或有機氯消毒劑帶畜進行圈舍消毒。從沒有該病流行的地區購進羊只,且一定要隔離觀察后再混群。由于支原體沒有細胞壁會對作用于細菌細胞壁的抗生素產生抵抗力,所以在治療綿羊支原體性肺炎時應該選擇針對阻礙DNA或蛋白質合成的藥物進行治療,如大環內酯類藥物、喹諾酮類抗生素。李建華等[12]應用酒石酸泰樂菌素注射液和左氧氟沙星注射液對患羊進行治療,取得了一定的治療效果。但長期用藥會使支原體產生耐藥菌株,而且也會影響肉質,所以應用疫苗進行預防接種是首選方法。李新萍等[13]將1%的綿羊傳染性胸膜肺炎滅活苗加入到滅活的組織液中,用于綿羊的免疫,結果取得了較好的免疫效果。韓笑等[14]應用自制的綿羊肺炎支原體滅活疫苗接種羊只,同樣也取得了良好的免疫保護作用。但由于支原體較難培養,菌產量低,成本高,這些都大大限制了傳統疫苗的發展,需要研發新型的支原體疫苗。

6 展望

目前,綿羊支原體性肺炎在我國多個省、市羊群中都有發生,其傳播速度快、發病率高,給我國養羊業造成嚴重的危害。因此,提高養殖戶對該病的認識,研究出快速準確的檢測方法、有效的治療藥物、安全可靠的疫苗是十分必要的。相信隨著分子生物學研究的不斷深入,上述諸多難題將很快攻克?!觯ň庉嫞憾斡拢?/p>

[1]Mackay J M K,Nisbet D I,Foggie A.Isolation of Pleuuropneumonia-like Organisms(Genus Mycolasma)from case of sheep pulmonary adenomatosis.Vet Rec,1963,75(21):550-551.

[2]Carmicheal L E,George T D,Sullivan N D.Isolation,Propagation for Proliferative Interstitial Ppneumonia.Comell Vet,1972,62(4): 654-679.

[3]Linvingston C W.Isolation of Mycoplasma Ovipneumoniae from Gosts.Amer.J Vet Rec,1979,40(3):407-408.

[4]解慧梅,蘇志國,任寶波.泰州地區羊支原體肺炎流行病學調查[J].江蘇農業科學,2015,43(3):194-195.

[5]高蓉,胡永文,馮春梅等.羊支原體肺炎的調查[J].中國畜牧獸醫文摘,2012,28(9):97.

[6]陸承平.獸醫微生物[M].中國農業出版社,2001,360-363.

[7]候相山,王建昌,張永寧等.羊群綿羊肺炎支原體抗體間接ELISA檢測方法的建立[J].中國畜牧獸醫,2006,33(6):4-5.

[8]宋蓉.綿羊肺炎支原體固相競爭ELISA抗體檢測方法的建立[J].科研畜牧獸醫,2015,(10):279.

[9]趙萍,逯忠新,儲岳峰等.綿羊肺炎支原體間接血凝診斷方法的建立[J].甘肅農業大學學報,2008,43(1):29-32.

[10]儲岳峰,高鵬程,趙萍等.應用雙重PCR方法檢測羊支原體肺炎病原[J].畜牧與獸醫,2009,41(12):23-26.

[11] 馮旭飛,劉霜,張賢寧等.綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌雙重PCR檢測方法的建立及應用 [J].中國獸醫科學,2013,43(12):1257-1261.

[12]李建華,方超,丁國杰.羊支原體肺炎的臨床癥狀和防治措施[J].現代畜牧科技,2016,(6):88.

[13]李新萍,陶岳,林為民等.綿羊支原體肺炎滅活疫苗的研制及其免疫效果的初步觀察[J].現代畜牧獸醫,2007,35(8):47-48.

[14] 韓笑,岳華,王遠微等.綿羊肺炎支原體滅活疫苗的研制[J].中國畜牧獸醫,2011,38(11):181-183.

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.10.019

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