楊治平,孫華棟
(1.山西省動物疫病預防控制中心,太原 030012;2.山西省農業規劃設計研究院,太原 030002)
山西省2015年部分地區羊口蹄疫疫病的血清學調查
楊治平1,孫華棟2
(1.山西省動物疫病預防控制中心,太原 030012;2.山西省農業規劃設計研究院,太原 030002)
目的:為了解山西省2015年度羊口蹄疫集中免疫效果。方法:從山西省11個市14個縣40個規模場和17個散養戶采集1 010份羊血清樣品。采用酶聯免疫法吸附試驗方法。結果:山西省11個市1 010份羊血清樣品的O型口蹄疫血清抗體平均合格率為77.72%,亞洲Ⅰ型口蹄疫血清抗體平均合格率為79.21%。結論:山西省11個市調查的羊口蹄疫免疫抗體全部符合農業部要求,但仍需加強相關免疫,防止重大疫病發生。
羊口蹄疫病 血清學檢測 調查
口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒引發的一種急性發熱性和傳播極為迅速的接觸性傳染病,在偶蹄獸中發生。被侵染的動物顯著特征為蹄、乳頭、乳房、口腔黏膜等處形成水皰[1]。口蹄疫的病毒主要是通過消化道、呼吸道等進行傳染,病毒的潛伏期比較長,羊的發病時間主要是在春秋兩季,尤其春季風和回歸的候鳥都是病毒傳播的主要原因[2]。該病傳播速度快,感染率高,一旦發病,很難控制和消滅,還會造成巨大的經濟損失和政治影響。故OIE將其列為A類傳染病之首,我國也將其列為一類動物傳染病[3]。為了解山西省口蹄疫集中免疫效果,給預防和控制口蹄疫疫病提供科學依據,筆者于2015年全年對全省11個市進行了口蹄疫病血清學調查,現報告如下。
1.1 被檢血清
2015年在山西省11個市14個縣通過現場采集和送樣的方式,隨機抽取了40個規模場和17個散養戶共1 010份血清樣品(其中規模場羊血清800份、散養戶血清210份)。
1.2 器材
酶標儀(美國伯騰ELX800)、洗板機、微量移液器、溫箱等儀器設備。
1.3 操作步驟
O型和亞洲I型抗體檢測方法如下。
(1)配洗液:將50 ml洗液加純化水稀釋至1 000 ml,充分搖勻后備用。
(2)編號:每次試驗應在包被板上設空白對照孔1孔,陰性對照孔2孔,陽性對照孔2孔,其余為待檢樣品孔。
(3)加樣品稀釋液:用加樣器在包被板的待檢樣品中加入樣品稀釋液,每孔100μl;空白對照孔、陰性對照孔及陽性對照孔不加樣品稀釋液。
(4)加樣:分別于各待檢樣品孔加入待檢樣品10μl,陰性對照孔加入陰性對照血清100μl,陽性對照孔加入陽性對照血清100μl;空白對照孔不加樣。
(5)溫育:充分混勻,貼上封板膜,37℃溫箱溫育30 min。
(6)洗板:洗板機洗或手洗,方法如下。
手洗:傾去內容物,用洗液注滿反應孔,靜置15~30 s后吸去或棄去,在毛巾或吸水紙上拍干。如此洗板重復5次。
洗板機洗:洗板次數為5次,每次洗液在孔中滯留時間為15~30 s,洗液應注滿反應孔,確保每次吸凈無殘留,全部洗完后在毛巾或吸水紙上拍干。
(7)加酶標結合物:除空白對照孔以外,各孔中加入酶標結合物100μl。
(8)溫育:貼上封板膜,37℃溫箱溫育30 min。
(9)洗板:方法同上洗板。
(10)加顯色劑:每孔加入A顯色劑50μl,全部加完后再在每孔中加入B顯色劑50μl,混勻,封板。
(11)溫育:37℃溫箱顯色10 min。
(12)終止:顯色完畢后立即于每孔加50μl終止液,混勻測定。
(13)測定:終止后應在10 min內完成判讀。對空白對照調零,用酶標儀在450 nm波長處測定吸光值。或使用雙波長測定吸光值,測定波長為450 nm,參考波長可選630 nm或655 nm。
根據說明書進行結果判定。
總體檢測結果,對隨機抽取的40個規模場17個散養戶的1 010份羊血清樣品進行O型和亞洲I型抗體檢測,口蹄疫O型抗體合格數為785份,平均合格率77.72%;口蹄疫亞洲I型抗體合格數800份,平均合格率79.21%。也可以看出O型和亞洲I型抗體全部達到農業部要求,山西省羊的口蹄疫O型和亞洲I型免疫抗體全部合格。
(1)該血清學調查結果表明,山西省11個市羊口蹄疫O型和亞洲I型達到農業部要求,但規模場優于散養戶,散養戶合格率O型為64.29%,亞洲I型為66.67%,處在一個較低水平,這與各散養戶的衛生環境、管理水平、防疫措施、飼養觀念、疫苗免疫劑量、免疫時間及疫苗存儲條件等因素有關。預防和控制本病任務仍很艱巨。
(2)羊口蹄疫O型與亞洲I型合格率低的原因主要是這些羊場在日常管理方面存在漏洞;部分散養戶在引進種公(母)羊時未按規定程序嚴格檢疫,導致引進帶病的種公(母)羊。沒有及時進行O型與亞洲I型雙價疫苗補免,部分散養戶消毒工作不到位,存在死角和盲角,個別散養戶存在人畜、多畜同在一個院現象。
(3)預防和控制該病,認為預防口蹄疫的有效辦法是接種疫苗,及時建立有效的免疫屏障,防止病毒侵入。加大疫苗預防口蹄疫的宣傳力度,讓散養戶認識到疫苗預防的重要性。在日常管理中要嚴格按照國家規定的口蹄疫免疫計劃進行免疫。必須做到“鄉不漏村、村不漏戶、戶不漏畜、畜不漏針”。對免疫不合格的羊要及時補免。切實加強流通環節的監管力度,尤其是產地檢疫和屠宰場的檢疫。加強飼養管理,尤其對散養戶要求減少混群放牧,經常消毒有助于羊群生長發育,提高農民的經濟收入。
[1] 阿依古麗.瑪納斯縣六戶地鎮羊口蹄疫疫病的血清調查.中國畜牧獸醫文摘,2013,29(12):87~88
[2] 徐桂平.如何做好牛羊口蹄疫防治工作.中國動物保健,2014.16(7):36~37
[3] 迪力拜爾.阿木提.口蹄疫的防控研究進展.中國獸醫雜志,2011,47(4):61~63