食用菌液體制種污染的原因分析及解決辦法

白胡木吉力圖，白福林，刁亞娟，哈申圖力古爾，錢(qián)丹珠（通遼職業(yè)學(xué)院化工系，內(nèi)蒙古通遼 028000）

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食用菌液體制種污染的原因分析及解決辦法

白胡木吉力圖，白福林，刁亞娟，哈申圖力古爾，錢(qián)丹珠
（通遼職業(yè)學(xué)院化工系，內(nèi)蒙古通遼 028000）

摘要：食用菌液體制種技術(shù)現(xiàn)已廣泛運(yùn)用于生產(chǎn)當(dāng)中，此技術(shù)不同于傳統(tǒng)的制種技術(shù)，其操作過(guò)程當(dāng)中對(duì)操作人員的要求非常高，如對(duì)操作過(guò)程不重視，就不可避免的出現(xiàn)各種雜菌污染問(wèn)題，影響生產(chǎn)，造成損失，文章根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出了液體制種過(guò)程中常見(jiàn)的污染原因，同時(shí)也總結(jié)出了解決辦法。

關(guān)鍵詞：液體菌種 污染 辦法

液體菌種栽培是生物深層發(fā)酵技術(shù)與傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)相結(jié)合的生產(chǎn)方式。要求操作人員在生產(chǎn)中嚴(yán)格管理，具有較強(qiáng)的無(wú)菌意識(shí)，如管理粗放，就不可避免的出現(xiàn)各種雜菌污染問(wèn)題，造成很大的損失。

1　菌種生產(chǎn)設(shè)施及環(huán)境不符合要求引起污染

（1）液體菌種生產(chǎn)車(chē)間，接種室，養(yǎng)菌室要求在300 m之內(nèi)不能有雞、豬舍及其它污染源，如生產(chǎn)車(chē)間建在雞豬等畜禽舍、垃圾處理廠、磚瓦廠等周?chē)鷷r(shí)，由于灰塵、砂土、及大量雜菌漂浮在空中，菌種菌袋（瓶）污染的機(jī)會(huì)就會(huì)增加，生產(chǎn)室內(nèi)要求為干燥、潔凈，具有良好的通風(fēng)照明條件，地面、墻面、頂棚光滑不存灰，室內(nèi)不要堆放各種雜物。

（2）水源要清潔無(wú)污染。如水源有污染或重金屬含量過(guò)大，會(huì)造成菌種不萌發(fā)，菌球難以形成或菌種接到培養(yǎng)基時(shí)菌種不吃料、培養(yǎng)基感染雜菌。

（3）電源保證在220±20V，如電壓不足或不穩(wěn)，容易使控制系統(tǒng)不能正常工作，影響制種。如經(jīng)常停電，同時(shí)又不能及時(shí)保壓，也容易使罐壓降到零或負(fù)壓，引起空氣倒流污染。

2　培養(yǎng)基制作及滅菌過(guò)程中污染

（1）培養(yǎng)基中存在大顆粒物質(zhì)，主要原因是：一是在刷罐的時(shí)候未刷干凈，在罐內(nèi)存留一些菌塊、菌球、菌皮，加熱棒上糊料。加熱棒在培養(yǎng)過(guò)程中，若實(shí)際溫度低于設(shè)定溫度時(shí)，控制柜會(huì)自動(dòng)啟動(dòng)加熱棒而加熱，而在培養(yǎng)后期隨著菌球濃度的增加，菌液的粘度會(huì)越來(lái)越大，這樣就造成高粘度的菌液會(huì)有少量粘附在加熱棒上，這種情況是正常的，便如果粘附情況比較嚴(yán)重，可以將加熱棒取下單獨(dú)進(jìn)行清理后再正常使用。二是培養(yǎng)基在過(guò)濾的時(shí)候紗布太少，使培養(yǎng)料中的一些顆粒透過(guò)紗布進(jìn)入到培養(yǎng)基中。這些顆粒堆積罐底造成滅菌死角。

（2）在液體培養(yǎng)基的配制過(guò)程中一般不需要調(diào)解pH值，自然即可，一般pH值6～7，如人為提高pH值，易造成雜菌（特別是芽孢桿菌）耐熱性能提高，造成滅菌不徹底。

（3）未加入消泡劑或加入的消泡劑量小，在培養(yǎng)基滅菌時(shí)，如果未加入消泡劑，會(huì)產(chǎn)生大量的泡沫，氣泡能產(chǎn)生隔熱層，如雜菌存在其中會(huì)造成滅菌不透。

（4）排料不規(guī)范，排料的主要目的是排除閥門(mén)處的生料，同時(shí)對(duì)閥門(mén)進(jìn)行滅菌，如不排料或排料時(shí)間短少，都會(huì)導(dǎo)致滅菌不徹底。排料的方法是滅菌時(shí)要求我們?cè)谟?jì)時(shí)開(kāi)始的前、中、后（0 min、25 min、55 min）接種閥和進(jìn)氣閥各排料3～5 min，3次共排料3～5 L。排料時(shí)只要閥門(mén)有少量料液和氣體排出即可，其作用一是排除閥門(mén)部的生料；二是對(duì)閥門(mén)自身起到消毒的作用。

（5）培養(yǎng)基滅菌不徹底。液體菌種生產(chǎn)過(guò)程中，培養(yǎng)基的滅菌是一個(gè)較為關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，為保證滅菌徹底，需注意計(jì)時(shí)溫度的確定，培養(yǎng)基滅菌一般要求121℃維持60 min，因此無(wú)論在溫度上還是時(shí)間上要求都必須保證，在確定計(jì)時(shí)溫度時(shí)既要看培養(yǎng)器壓力表溫度，又要看溫度計(jì)實(shí)際溫度。如兩者指示不一致時(shí)，應(yīng)以最低指示為準(zhǔn)，另外要注意冷氣要完全排出，保證排氣閥始終處于微開(kāi)狀態(tài)，保證整個(gè)過(guò)程都有活氣排放。在完全排氣的情況下，壓力和溫度是有一定的關(guān)系的。如壓力為0.10MPa時(shí)溫度為121℃，壓力為0.15MPa時(shí)，溫度為126℃，但有時(shí)溫度和壓力的指示不一致，這時(shí)除應(yīng)查出并排除故障外，還應(yīng)以兩者指示的最低者為準(zhǔn)。如壓力表指示為0.15MPa，而溫度計(jì)溫度僅為120℃，這時(shí)應(yīng)以溫度為準(zhǔn)。注意滅菌過(guò)程中絕對(duì)不能掉溫（掉壓），一旦出現(xiàn)掉溫現(xiàn)象，應(yīng)重新計(jì)時(shí)以保證滅菌的徹底，但正常情況下不能隨意延長(zhǎng)滅菌時(shí)間，這樣會(huì)造成營(yíng)養(yǎng)成分大量被破壞而對(duì)培養(yǎng)不利。培養(yǎng)基滅菌結(jié)束后應(yīng)立即通水，在最短的時(shí)間內(nèi)使其溫度降到30℃以下，而絕不能用自然降溫法進(jìn)行降溫。因?yàn)樽匀环ń禍爻掷m(xù)時(shí)間長(zhǎng)，而培養(yǎng)基又處在高溫狀態(tài)，所以其營(yíng)養(yǎng)損失嚴(yán)重，不利于培養(yǎng)的正常進(jìn)行，因而不宜采用自然降溫法進(jìn)行降溫。

3　專用母種在并瓶時(shí)染菌

（1）菌種帶菌。一是專用母種帶菌，一方面是專用種在制作過(guò)程中造成污染；另一方面是在存貯的過(guò)程中造成二次污染，如冰箱未消毒，同其它食物放在一起，環(huán)境過(guò)于潮濕等。二是并瓶時(shí)造成污染，一方面是操作不嚴(yán)格，接種室熏蒸不徹底，火焰不夠大封不住瓶口，接種鉤灼燒不徹底；另一方面，并瓶后未加抑菌劑。

（2）向罐內(nèi)接種時(shí)造成染菌。一是接種時(shí)火焰太小封不住罐口；二是接種時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，罐口長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中；三是在接種過(guò)程中異物掉入罐內(nèi)，如灰塵、棉塞、手套線頭等。

4　菌種在培養(yǎng)過(guò)程中染菌

（1）環(huán)境不合格，培養(yǎng)室要遠(yuǎn)離三廢，室內(nèi)必須清潔無(wú)死角，墻壁房頂光滑無(wú)塵，空氣干燥新鮮，室內(nèi)安裝換氣扇或空調(diào)，無(wú)特殊情況不要開(kāi)窗換氣。

（2）培養(yǎng)過(guò)程泡沫冒頂，消泡劑添加不夠造成，一旦冒頂雜菌會(huì)延泡沫進(jìn)入罐內(nèi)。泡敵（聚氧丙烯甘油）作為一種高效消泡劑，主要起到消除培養(yǎng)料泡沫的作用，一旦泡沫過(guò)多或泡沫冒頂，就會(huì)導(dǎo)致整罐染菌。一般的添加量為0.03%～0.035%，添加的量少，則消泡效果不佳，添加的太多會(huì)抑制菌絲的生長(zhǎng)，所以一般60 l左右的培養(yǎng)料應(yīng)添加20 ml左右。食用油及其它的消泡劑雖也有消泡作用，但有些消泡作用不及泡敵或有抑菌作用，因此不可亂用。

參考文獻(xiàn)

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