2009至2015年度遼寧省錦州市流感樣病例和病原學(xué)特征分析

尤佳，單穎

(1.遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121000;2.錦州市疾病預(yù)防控制中心，遼寧錦州121000)

2009至2015年度遼寧省錦州市流感樣病例和病原學(xué)特征分析

尤佳1，2，單穎1*

(1.遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121000;2.錦州市疾病預(yù)防控制中心，遼寧錦州121000)

了解遼寧省錦州市2009至2015年度流感流行特征及優(yōu)勢(shì)毒株的分布情況，為流感的預(yù)警和防治提供依據(jù)。統(tǒng)計(jì)錦州市2009至2015年度流感樣病例(ILI)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)及病原學(xué)結(jié)果，分析ILI百分比(ILI%)、病毒分離率及各亞型的變化規(guī)律。共監(jiān)測(cè)ILI 51 277例，ILI%為2.28%，主要集中于0～15歲年齡段，占56.72%;采集8 254份ILI咽拭子標(biāo)本，其中陽(yáng)性467份，病毒分離率為5.66%，其中新甲型H1N1型192份、季節(jié)性H3型186份、B型Yamagata系37份、B型Victoria系52份。2009年和2013年以新甲型H1N1 (55.73%，83.33%)為主，2011年以BY(74.42%)為主，其他年份以季節(jié)性H3型為流感優(yōu)勢(shì)毒株，BV在人群中流行趨勢(shì)減弱，新甲型H1N1、BY在人群中偶有檢出。2010至2015年各月份ILI%均顯著低于2009年，提示2009年后流感病毒活動(dòng)相對(duì)穩(wěn)定;ILI%與病毒分離率呈正相關(guān)(rs=0.347;P=0.039)，ILI%的變化能夠較好地反映當(dāng)?shù)亓鞲胁《镜幕顒?dòng)情況。新甲型H1N1型、季節(jié)性H3型、B型混合存在，季節(jié)性H1型消失。

流感;流感樣病例;流感病毒分離率;監(jiān)測(cè)

流行性感冒(influenza)簡(jiǎn)稱流感，是流感病毒引起的急性呼吸道疾病，具有傳染性強(qiáng)、傳播速度快等特點(diǎn)，是世界上第一個(gè)實(shí)行全球監(jiān)控的傳染病［1］。流感病毒的流行主要取決于毒株抗原性及類型的變異、人群的免疫程度、環(huán)境及社會(huì)因素等［2］。遼寧省錦州市在2005年開(kāi)展了流感監(jiān)測(cè)工作，2009年納入國(guó)家流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)，現(xiàn)對(duì)2009至2015年度錦州市流感樣病例(influenza-like illness，ILI)時(shí)間分布和人群分布的監(jiān)測(cè)，分析錦州市流感樣病例的變化特征，為流感的防控提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 資料來(lái)源

數(shù)據(jù)來(lái)源于遼寧省錦州市疾病預(yù)防控制中心和錦州市中心醫(yī)院、遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院的流感監(jiān)測(cè)工作。由“中國(guó)疾病預(yù)防控制信息系統(tǒng)”中的“中國(guó)流感監(jiān)測(cè)信息系統(tǒng)”直接導(dǎo)出資料，含錦州市2009至2015年度流感流行病學(xué)和病原學(xué)數(shù)據(jù)。哨點(diǎn)醫(yī)院上報(bào)ILI 51 277例，門(mén)診和急診就診總數(shù)2 248 991例，實(shí)驗(yàn)室分離467株流感病毒。

1.2 監(jiān)測(cè)內(nèi)容與方法

1.2.1 器材和試劑CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡，H1、H3、B型流感病毒的抗血清，H1、H3、B型流感病毒的標(biāo)準(zhǔn)抗原，0.25%EDTA-胰酶，含10%胎牛血清DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液。

1.2.2 ILI監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院的發(fā)熱門(mén)診、內(nèi)科診室和感染性疾病科開(kāi)展監(jiān)測(cè)工作。按照ILI定義:體溫≥38℃，伴咳嗽或咽痛之一者，而缺乏其他實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù)的急性呼吸道感染病例。每天按科室登記各年齡組的ILI數(shù)和病例就診總數(shù)，根據(jù)各診室的登記表錄入“中國(guó)流感監(jiān)測(cè)信息系統(tǒng)”。

1.2.3 標(biāo)本采集兩家哨點(diǎn)醫(yī)院在每年4至9月采集5～15份/月ILI病例標(biāo)本，10月至次年3月采集10～15份/周ILI病例標(biāo)本。ILI病例標(biāo)本采集呼吸道標(biāo)本(多為咽拭子)。采集時(shí)，醫(yī)生左手持壓舌板壓病人舌頭，右手用拭子擦咽扁桃體及咽后壁，后放于采樣液中，反復(fù)擠壓拭子頭部，折斷拭子尾部。標(biāo)本采集后在4℃條件下48 h內(nèi)送市CDC流感網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室。

1.2.4 病毒的分離實(shí)驗(yàn)室收到樣品后分裝成3份，用于MDCK細(xì)胞接種、雞胚接種、－80℃保存待復(fù)核。用犬腎傳代細(xì)胞(MDCK)進(jìn)行病毒分離:用移液管吸去細(xì)胞培養(yǎng)瓶中Hank’s液。吸疑似標(biāo)本1 mL于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。搖動(dòng)數(shù)次后放于37℃5%CO2培養(yǎng)箱中吸附1～2 h。倒出液體，用6 mL Hank’s液清洗細(xì)胞2遍，再向細(xì)胞培養(yǎng)瓶中加入6 mL生長(zhǎng)液。置于33～35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。細(xì)胞出現(xiàn)75%～100%病變時(shí)收獲細(xì)胞培養(yǎng)物。再進(jìn)行血凝試驗(yàn)方法(HA):對(duì)于HA≥8的細(xì)胞培養(yǎng)液，采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)對(duì)病毒進(jìn)行分型。

1.2.5 病毒的鑒定將收獲的細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行血凝試驗(yàn)(HA)。將微量板橫向放置:垂直A1～H1為第1列，平行A1～A12為A行。8道加樣器加樣，吸取PBS 50 μL加入微量板第2列，依次加入至最后一列。待檢病毒液100 μL加入第1列對(duì)應(yīng)的孔中。用8道加樣器從第1列取50 μL病毒液，加到第二列相應(yīng)各孔，混勻。依此倍比稀釋法。最后加50 μL 1%的紅細(xì)胞懸液于微量板中，混合。室溫30～60 min，觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。以出現(xiàn)完全凝集的最高稀釋度為終點(diǎn)，其倒數(shù)即為病毒HA滴度。對(duì)于HA≥8的細(xì)胞培養(yǎng)液，采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)對(duì)病毒進(jìn)行分型。紅細(xì)胞凝集素抗原與特異性抗體(抗A(H1N1)亞型、抗A(H3N2)亞型、抗B Yamagata、抗B Victoria)結(jié)合抑制病毒引起的紅細(xì)胞凝集。HI效價(jià)是指抑制紅細(xì)胞凝集的最高稀釋度倒數(shù)。

1.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)Excel 2003和SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 流感監(jiān)測(cè)概況

2009至2015年兩家哨點(diǎn)醫(yī)院共監(jiān)測(cè)ILI51 277例，占門(mén)急診就診總數(shù)比例(ILI%)2.28%。2011至2015年度ILI%變化趨勢(shì)較為平穩(wěn)。2009至2015年度ILI%差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.079，P=0.799)，見(jiàn)表1。

2.2 ILI年齡構(gòu)成特征

2009年0～14歲年齡組ILI比例為34.10%，而其他各年度均在60.00%左右;15～24歲年齡組比例為40.87%，是2009年ILI的主要構(gòu)成人群，而其他各年度均在8.00%左右;2009～2015年度25歲以上人群構(gòu)成比例差異不大。見(jiàn)表2。

表1 2009至2015年度錦州市ILI發(fā)病數(shù)及ILI%情況Table 1The ILI incidence and case ILI%in Jinzhou from 2009 to 2015

表2 2009至2015年度錦州市ILI年齡分布Table 2The age distribution of case ILI%in Jinzhou from 2009 to 2015

2.3 流感季節(jié)性分布特征

對(duì)2009至2015年度按周ILI%差異進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=234.32，P =0.000)。2009年41至48周ILI%較高，其中第42周的ILI%為9.3%;2011至2015年度各月份ILI%較比2010年呈下降趨勢(shì)，提示2011至2015年度的流感病毒活動(dòng)較2010年有所減弱。見(jiàn)圖1。

圖1 2009至2015年度錦州市ILI%周次分布Fig.1The Weekly distribution of ILI%in Jinzhou from 2009 to 2015

2.4 實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢測(cè)情況

2009至2015年度錦州市流感監(jiān)測(cè)網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室共檢測(cè)ILI標(biāo)本8 254份，分離出流感病毒467株，陽(yáng)性率為5.66%，其中新甲型H1N1型192份，占41.11%;季節(jié)性H3型186份，占39.83%; B型Yamagata系37份，占7.92%;B型Victoria系52份，占11.13%。2009年和2013年以新甲型H1N1(55.73%，83.33%)為主，2011年以BY (74.42%)為主，其他年份以季節(jié)性H3型為流感優(yōu)勢(shì)毒株，BV在人群中流行逐漸減弱，新甲型H1N1、BY在人群中偶可檢出。見(jiàn)表3、圖2、圖3。流感病毒分離陽(yáng)性率峰值出現(xiàn)在每年11月至次年2月份，與ILI%高峰期相符合，兩者呈正相關(guān)(rs=0.347;P=0.039)。

表3 2009至2015年度錦州市流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果及分型Table 3The pathogenic results and classification of influenza monitoring in Jinzhou from 2009 to 2015

圖2 2009至2015年度各年錦州市流感病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果Fig.2The pathogenic results of influenza monitoring in Jinzhou from 2009 to 2015

圖3 2009至2015年度各月錦州市流感病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果Fig.3The pathogenic results of influenza monitoring each month in Jinzhou from 2009 to 2015

3 討論

國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，癥狀監(jiān)測(cè)依據(jù)特定臨床癥候群進(jìn)行非特異監(jiān)測(cè)，此監(jiān)測(cè)方式不依賴特定的診斷，具有敏感度高和實(shí)時(shí)性強(qiáng)等特點(diǎn)。目前，應(yīng)用最為廣泛的癥狀監(jiān)測(cè)方法是流感樣病例監(jiān)測(cè)［3］。Vanhems等［4］研究表明流感樣病例監(jiān)測(cè)較實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測(cè)結(jié)果，可提早2周預(yù)測(cè)出流感的流行。

本研究結(jié)果顯示，錦州市2009和2010年度ILI%較高，2011至2015年度ILI%變化趨勢(shì)較為平穩(wěn)。2009年ILI%的波動(dòng)范圍較大，為1.0%～9.3%。從數(shù)據(jù)中分析可知，2009年10月流感在錦州市處于強(qiáng)勢(shì)活動(dòng)期，ILI%超過(guò)歷年同期水平。2010年ILI數(shù)較多主要是受到2009年新甲型H1N1流行的余波影響。2011至2015年ILI%在0.8%～4.3%范圍內(nèi)波動(dòng)，且各周ILI%較2010年呈下降趨勢(shì)，提示2011至2015年度的流感病毒活動(dòng)較2010年有所減弱。2009年流感病例主要集中于15～24歲組，與2011至2015年度相比年齡構(gòu)成發(fā)生了變化，其以0～15歲人群為(56.72%)。此結(jié)果與李靜等［5］、蘇楊等［6］報(bào)告數(shù)據(jù)基本相同。這與兒童年齡小，機(jī)體免疫力較差，多為在校學(xué)生或托幼機(jī)構(gòu)兒童，容易發(fā)生交叉感染有關(guān)。結(jié)果提示15歲以下兒童是流感預(yù)防的主要人群，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行重點(diǎn)監(jiān)測(cè)。史恒越［7］對(duì)遼寧省阜新市2010至2014年度流行性感冒監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，0～4歲幼兒是流感的高發(fā)人群，其次是15歲以下的兒童。

每年的ILI季節(jié)性變化規(guī)律除2009年第42周出現(xiàn)高峰外，其他各年變化規(guī)律基本一致，為第52周至次年的1～6周ILI%較高，提示流感主要發(fā)生于冬春季節(jié)，這與錦州市位于中國(guó)的北方，冬春季氣候寒冷，流感病毒可在環(huán)境中存活較長(zhǎng)時(shí)間有關(guān)。我市ILI%相對(duì)較低的原因，可能是兩家監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院兒科監(jiān)測(cè)科室設(shè)置相對(duì)較少，而兒科診室ILI%明顯高于內(nèi)科診室［8］。

從流感病毒病原學(xué)監(jiān)測(cè)情況分析，7個(gè)監(jiān)測(cè)年度，新甲型H1N1、季節(jié)性H3N2和B型流感病毒在錦州市先后引起不同程度流行，呈現(xiàn)交替或混合流行的態(tài)勢(shì)。2009年和2013年以新甲型H1N1(55.73%，83.33%)為主，且2009年的毒株分離率最高(15.87%)，由新甲型H1N1病毒亞型引起，人群無(wú)免疫力，導(dǎo)致傳染性強(qiáng)，傳播迅速，極易發(fā)生大范圍流行［9］。2011年以BY(74.42%)為主，究其原因可能是自2010年起，WHO將新甲型H1N1流感毒株作為推薦株應(yīng)用于季節(jié)性流感疫苗的生產(chǎn)，故2011年一部分人群對(duì)其已經(jīng)有了免疫力。其他年份以季節(jié)性H3型為流感優(yōu)勢(shì)毒株，BV在人群當(dāng)中流行逐漸減弱，新甲型H1N1、BY在人群中偶可檢出。此結(jié)果與王宇報(bào)道的基本一致［10］。由此可見(jiàn)，錦州市甲流疫情結(jié)束后，2010年甲型流感病毒主要以新甲型H1N1與季節(jié)性H3N2兩種優(yōu)勢(shì)株存在，后轉(zhuǎn)為BY為優(yōu)勢(shì)毒株，之后各年以新甲型H1N1、季節(jié)性H3N2及B型交替流行，B型流行趨勢(shì)較弱。從流感毒株各年的變化趨勢(shì)分析，每年春季流感的流行株將成為當(dāng)年冬季流感流行的優(yōu)勢(shì)株，據(jù)此可初步預(yù)測(cè)2016年度流感流行優(yōu)勢(shì)株為BV亞型。不同年份優(yōu)勢(shì)毒株有所不同，這與流感病毒的亞型復(fù)雜，品種繁多，存在不同的優(yōu)勢(shì)毒株，受環(huán)境因素的影響，病毒優(yōu)勢(shì)毒株隨著年份、季節(jié)的不同而不同有關(guān)［11］。司虹等［12］監(jiān)測(cè)報(bào)告顯示2010至2014年度大連市流感的流行趨勢(shì)是季節(jié)性H3N2、B型、新甲型H1N1混合存在，主要發(fā)生在冬春兩季。而葛愛(ài)華等［13］在分析江蘇省2009至2012年流感情況時(shí)發(fā)現(xiàn)毒株以B型和季節(jié)性H3N2交替出現(xiàn)為主，偶有新甲型H1N1散發(fā)，冬季1至2月和夏季8月是兩個(gè)小流行高峰。郎中凱等［14］報(bào)道重慶市2010至2015年以新甲型H1N1、B型、季節(jié)性H3N2型混合流行，出現(xiàn)冬夏季流行高峰。由此可見(jiàn)，在優(yōu)勢(shì)毒株的分布情況方面，北方與南方結(jié)果相一致;而流行高峰期南方與北方地區(qū)略有不同，推其原因可能是南北氣候的差異所致。本研究病原學(xué)結(jié)果與ILI%呈正相關(guān)。歐才好等［15］監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示流感樣病例的百分比(ILI%)與H1N1流感病毒存在相關(guān)性，這說(shuō)明可以用流感樣病例監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)預(yù)測(cè)流感的流行趨勢(shì)。

綜上所述，ILI和病原學(xué)監(jiān)測(cè)是防控流感的有效方法。ILI是呼吸道疾病流行的預(yù)警信號(hào)，病原學(xué)監(jiān)測(cè)為及早發(fā)現(xiàn)變異株、推薦疫苗組分、確定流行株及疫情預(yù)測(cè)、預(yù)警提供基礎(chǔ)。

［1］中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部辦公廳.全國(guó)流感監(jiān)測(cè)方案(2010年版)［S］.北京:衛(wèi)生部辦公廳，2010.

［2］劉漢卿，高敬華，王燕，等.2011－2013年濟(jì)寧市流感監(jiān)測(cè)系統(tǒng)運(yùn)行狀況及監(jiān)測(cè)質(zhì)量評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)病原生物學(xué)雜志，2013，8(9):830-833.

［3］Thomas RE.Is influenza-like illness a useful concept and an appropriate test of influenza vaccine effectiveness［J］.Vaccine，2014，32(19):2143-2149.

［4］Vanhems P，Voirin N，Bénet T，et al.Detection of hospital outbreaks of influenza-like illness based on excess of incidence rates compared to the community［J］.Am J Infect Control，2014，42(12):1325-1327.

［5］李靜，柳鴻敏，盧欣榮.2010～2014年吉林省流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)分析［J］.中華疾病控制雜志，2015，19(10):1062-1065.

［6］蘇楊，馬玲，王開(kāi)利，等.黑龍江省2009－2012年流感監(jiān)測(cè)及流行特征分析［J］.中國(guó)公共衛(wèi)生，2013，29(5):744-745.

［7］史恒越.2010－2014年度遼寧省阜新市流行性感冒監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］.疾病監(jiān)測(cè)，2014，29(12):948-952.

［8］馬瑩瑩，張曉麗.河南省許昌市2009－2012年流感監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2014，41(9):1686-1688.

［9］鄧斐，羅鵬飛，祁賢，等.江蘇省2009－2011年流感監(jiān)測(cè)和流行特征分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2013，40(13):2384-2388.

［10］王宇，宋黎黎，沈福杰，等.2009－2014年上海市黃浦區(qū)流感監(jiān)測(cè)分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，42(24):4494-4496.

［11］高強(qiáng)，蘇琦，范剛，等.2009－2013年淮安市流感監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，42(12):2254-2256.

［12］司虹，張倩文，肖冰，等.2010－2014年度大連市流感監(jiān)測(cè)［J］.預(yù)防醫(yī)學(xué)論壇，2014，20(10):785-787.

［13］葛愛(ài)華，鮑倡俊，祁賢，等.江蘇省2009－2012年流感監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］.中華疾病控制雜志，2014，18(2):123-126.

［14］郎中凱，王恒芹，丁建武，等.2010年-2015年重慶市萬(wàn)州區(qū)流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果分析［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015，25 (10):3553-3558.

［15］歐才好，張東明，馮銳財(cái)，等.我院流感樣病例監(jiān)測(cè)探討［J］.中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2010，17(15):135-137.

Analysis of Influenza-Like Cases＆the Aetiology Features in Jinzhou，Liaoning 2009－2015

YOU Jia1，2，SHAN Ying1
(1.Liaoning Medical Coll.，Jinzhou 121001;2.Jinzhou Ctr.for Disease Ctrl.＆Prevent＇n，Jinzhou 121001)

In order to understand the epidemiological features of influenza and the distribution of the dominant strain of influenza in Jinzhou，so as to provide scientific evidence for the early warning and control influenza epidemic effectively.The analysis was conducted on the surveillance and aetiological detection data of influenza like illness(ILI)，monitoring proportion of ILI cases in outpatient visits，the rate of virus isolation and variation of influenza virus subtypes.A total of 51 277 ILI cases were reported in Jinzhou from 2009 through 2015.The ILI cases accounted for 2.28%of the total outpatient visits，mainly in the group of 0 to 15 ages，accounting for 56.72%.Among the 8 254 swabs detected during this period，467 were positive for influenza viruses，including 192 cases of influenza A (H1N1)，186 cases of seasonal H3N2 subtype，37 cases of type B influenza(Yamagata)，and 52 cases of type B influenza(Victoria).The average rate of virus isolation was 5.66%.Pandemic strain of influenza was influenza A (H1N1)in 2009 and 2013.Type B Yamagata lineage was prevalent in 2011，accounting for 74.42%.In other years seasonal H3N2 was the predominant strain，showing a downward trend of type B Victoria lineage，and influenza A (H1N1)，type B Yamagata lineage can be detected occasionally.The monthly ILI proportion from 2010 to 2015 was lower than that in 2009，suggesting that the influenza activity was relatively stable after 2009.The ILI proportion waspositively correlated with the virus isolation rate(rs=0.347;P=0.039).ILI proportion can truly reflect the degree of local influenza activity.The influenza A(H1N1)，seasonal H3N2 subtype and type B influenza were present mixed，and seasonal H1N1 subtype disappeared.

influenza;influenza-like cases;influenza virus isolation rate;monitor

Q939.93;R511.7

A

1005－7021(2016)04－0053－05

10.3969/j.issn.1005－7021.2016.04.009

遼寧省科技廳聯(lián)合基金項(xiàng)目(2015020354)

尤佳女，主管檢驗(yàn)師，碩士。研究方向?yàn)榱鞲胁≡瓕W(xué)檢測(cè)。Tel:0416-2332132，E-mail:250050302@qq.com

*通訊作者。女，教授，博士，碩士生導(dǎo)師。研究方向?yàn)榭垢腥久庖摺-mail:1822518917@qq.com

2016-03-04;

2016-05-02