雞源奇異變形桿菌危害需重視

文│李巍 陳明非 楊卓 劉佳 蒼真偉 趙怡雯 王德強 程淑晶（遼寧省大連市畜牧總站）

劉威（廣東永順生物制藥股份有限公司）

雞源奇異變形桿菌危害需重視

文│李巍 陳明非 楊卓 劉佳 蒼真偉 趙怡雯 王德強 程淑晶（遼寧省大連市畜牧總站）

劉威（廣東永順生物制藥股份有限公司）

奇異變形桿菌屬于腸桿菌科變形桿菌屬，是革蘭氏陰性桿菌，有周生鞭毛，普通培養可形成遷移性生長。獸醫臨床上一度認為這類菌為糞便或環境污染菌，很少監控它的流行情況。筆者在對遼寧大連地區有腹瀉癥狀的肉仔雞進行大腸桿菌和沙門氏菌的感染情況調查時，發現奇異變形桿菌的分離率很高，部分雞是奇異變形桿菌和大腸桿菌或沙門氏菌混合感染，而部分雞是單純奇異變形桿菌感染；從具有敗血癥狀的肉仔雞的全身實質臟器分離到的奇異變形桿菌，經動物試驗證實有較強的致病力。

一、材料和方法

1. 材料。

（1）被檢病料。收集到的臨床有腹瀉癥狀的死淘肉雞472只，15～40日齡。

（2）主要試劑與儀器。亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC肉湯）、膽硫乳瓊脂（DHL瓊脂）培養基購自北京陸橋技術股份有限公司；VITEK2細菌生化鑒定卡由法國生物梅里埃公司（中國上海部）提供；細菌生化鑒定設備為法國生物梅里埃公司VITEK2全自動細菌鑒定系統。

（3）試驗動物。7日齡公雛雞120只，飼養到15日齡無異常后用于試驗。

2.方法。

（1）死淘肉仔雞臨床檢查。觀察死淘肉仔雞外觀及剖檢病理變化，并詳細記錄。

（2）細菌分離培養。無菌采集死淘肉仔雞的盲腸扁桃體，放入SC肉湯中，對應死淘雞只逐一編號，放入37℃生化培養箱中培養48小時，再將SC肉湯培養物逐個轉移接種DHL瓊脂培養基，37℃培養24小時；對DHL瓊脂上的疑似菌落做三次純化培養，標記菌株，置4℃冰箱中保存備用。對有敗血癥病理變化的死淘雞只，在進行SC肉湯增菌培養的同時，無菌勺取實質臟器（心、肝、脾、肺、腎等）直接在DHL瓊脂平板上劃線，同樣對長出的疑似菌落純化后標記保存。

（3）細菌生化鑒定。對獲得的菌株革蘭氏染色鏡檢，屬于革蘭氏陰性、兩端鈍圓、短桿菌的，用0.45%氯化鈉水溶液稀釋成0.5個麥氏單位，選擇VITEK2 GN卡，用VITEK2全自動細菌鑒定系統進行生化鑒定。

（4）致病力試驗。將從有敗血癥的死淘肉仔雞中分離到的菌株37℃培養24小時復壯，用生理鹽水稀釋成10個麥氏單位，換算成活菌數即每毫升約含3.0×109個活細菌菌落數。120只小公雞隨機分組，其中細菌接種組若干組、健康對照組1組、生理鹽水對照組1組。除健康對照組外，每只雞腹腔注射0.5ml菌液（活菌數約1.5×109個）或生理鹽水。每天觀察發病情況，剖檢死雞，回收細菌，連續觀察7天。

二、結果

1.臨床檢查。死淘肉仔雞外觀消瘦，體型明顯比同日齡健康雞小，雞冠蒼白或紫紺，共同特征是泄殖腔周圍羽毛污濁。這些死淘雞共同的剖檢病理變化是脾臟、腎臟淤血，略腫大，肓腸扁桃體腫大明顯，剪開可見新鮮或陳舊性出血點，泄殖腔黏膜有條狀出血。此外有的可見氣囊混濁，肺臟淤血有灰白色壞死灶；有的心包增厚，心包液增多，混有纖維素性滲出物，肝臟上有纖維素性包膜覆蓋；有的十二指腸或盲腸有出血斑塊。

2.培養特征。疑似菌在DHL瓊脂上37℃培養24小時后形成白色、半透明、帶或不帶黑心、圓整、略扁、直徑2毫米大小的菌落，與沙門氏菌菌落很相似，但比沙門氏菌菌落稍大、稍扁平、黑心的范圍稍大些；與大腸桿菌菌落則很易區分（圖1、圖2）。

3.生化鑒定?？梢删c沙門氏菌一樣，β-半乳糖苷酶（BGAL）陰性，產硫化氫（H2S），鳥氨酸脫羧酶（ODC）陽性，因此兩菌在DHL瓊脂上有相似特征。可疑菌與沙門氏菌顯著不同的是賴氨酸脫羧酶（LDC）陰性，尿酶（URE）陽性，生化鑒定結果為奇異變形桿菌，生化試驗詳細結果見表1。472份樣品中共分離到奇異變形桿菌62株，分離率高達13.1%。

4.致病力試驗。接種菌液的小公雞12小時后出現精神萎靡，24小時后開始出現死亡，48～96小時達到死亡高峰，144小時后全部死亡，而兩組對照雞則全部存活。

三、結論

1.此次在調查大連地區有腹瀉癥狀的死淘肉仔雞細菌感染情況的過程中，分離到了多株奇異變形桿菌。奇異變形桿菌有運動性，易呈遷移性生長，與其他細菌不易分開。但在含有膽鹽及去氧膽酸鈉（如SS瓊脂、麥康凱瓊脂、DHL瓊脂等）的培養基上失去聚集性，易獲得獨立菌落，這也是此次調查在獲得大腸桿菌、沙門氏菌菌株的同時獲得奇異變形桿菌菌株的原因。

2.奇異變形桿菌與感染相關的毒力因子主要表現在菌毛與莢膜多糖帶來的黏附力與侵襲力上，另外該菌產生的各種蛋白水解酶、各種細胞毒性溶血素使感染變得更加復雜。通常認為奇異變形桿菌是條件性致病菌，但通過此次對部分菌株的致病力試驗發現，該菌對日齡較低的雞有很強的致病力，可能該菌的致病力還與細菌數量達到一定的限值有關，對此還要做進一步的試驗。

3.近年來我國不斷有雞群暴發奇異變形桿菌病的報道，7周齡以下雛雞發病最多。此次調查發現大連地區肉仔雞奇異變形桿菌攜帶率高達13%以上，動物試驗表明當地分離到的菌株致病力很強，對大連肉雞養殖業是一種潛在的威脅。從大量肉仔雞盲腸扁桃體分離到奇異變形桿菌說明該菌還可以發生內源性感染，可以推測當飼料、飲水受到嚴重污染或雞體抵抗力下降時，很有可能造成奇異變形桿菌病的暴發。此外，奇異變形桿菌還是一種人畜共患的病原菌，和大腸桿菌、沙門氏菌一樣具有重要的公共衛生意義，因此動物防疫相關部門有必要加強對奇異變形桿菌病的監控。

◎圖1 大腸桿菌與可疑菌在DHL培養基上的不同形態

◎圖2 純化的可疑菌在DHL培養基上菌落形態

表1 奇異變形桿菌生化試驗結果