豬場(chǎng)環(huán)境測(cè)定及對(duì)敏感抗生素的篩選

趙達(dá)卓,杜秋明,張　穎,許龍春

(吉林省延邊州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林 延邊 133000)

?

豬場(chǎng)環(huán)境測(cè)定及對(duì)敏感抗生素的篩選

趙達(dá)卓,杜秋明,張穎,許龍春

(吉林省延邊州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林 延邊 133000)

豬舍環(huán)境不衛(wèi)生是誘發(fā)疫病的重要因素之一，目前環(huán)境因素不被養(yǎng)殖戶所重視，導(dǎo)致豬群疫病暴發(fā)，從而給養(yǎng)殖戶造成經(jīng)濟(jì)損失。通過對(duì)豬場(chǎng)空氣中以及飲用水中的細(xì)菌數(shù)進(jìn)行檢測(cè)，與國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較，對(duì)比是否符合環(huán)境養(yǎng)殖標(biāo)準(zhǔn),通過藥敏試驗(yàn)檢測(cè)空氣中常在的細(xì)菌對(duì)何種抗生素敏感，為養(yǎng)殖戶合理用藥提供理論依據(jù)。

豬場(chǎng)；環(huán)境測(cè)定；敏感抗生素；篩選

我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展迅速，近幾年來養(yǎng)豬模式由傳統(tǒng)的分散養(yǎng)殖快速向規(guī)模化、集約化和產(chǎn)業(yè)化方向發(fā)展，但是隨著規(guī)模的不斷擴(kuò)大，新的制約因素不斷出現(xiàn)，尤其是在豬場(chǎng)衛(wèi)生防御體系上，衛(wèi)生防御體系脆弱，易受外界環(huán)境的干擾；豬場(chǎng)的飼養(yǎng)環(huán)境惡劣，限制新技術(shù)的應(yīng)用[1]，使豬的生產(chǎn)性能難以發(fā)揮；出現(xiàn)這些因素的原因在于豬場(chǎng)內(nèi)外環(huán)境的污染和生態(tài)系統(tǒng)的破壞。規(guī)模豬場(chǎng)產(chǎn)生的糞便和污水量較大，并且集中，超出周圍環(huán)境的消納能力[2]，生態(tài)環(huán)境變的極為脆弱與歐盟國(guó)家相比有很大的差距。

歐盟國(guó)家對(duì)畜禽廢棄物的先進(jìn)管理超過很多國(guó)家，不僅擁有農(nóng)牧混合發(fā)展的歷史傳統(tǒng)和現(xiàn)代技術(shù)，畜牧業(yè)也相當(dāng)發(fā)達(dá)，在農(nóng)業(yè)產(chǎn)品中占很重要的位置。同時(shí)，也是世界環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域的帶頭人[3]，尤其是農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)政策的涉及范圍廣、支持力度大、農(nóng)民和消費(fèi)者環(huán)保意識(shí)強(qiáng)，作為先進(jìn)工業(yè)化的地區(qū)，歐盟各國(guó)起初也受到環(huán)境問題的困擾，起初實(shí)行的單一養(yǎng)殖模式給農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境帶來巨大的影響。糞尿的肆意排放、無序處理對(duì)地表水及地下水造成很大污染[4]，雖然養(yǎng)殖模式向著集約化、規(guī)模化生產(chǎn)，但是同樣也對(duì)土壤造成了嚴(yán)重的損害。歐盟成立后在畜禽養(yǎng)殖廢棄物的管理上出臺(tái)了一系列政策法規(guī)、管理規(guī)定、生態(tài)補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)等，不但改善了起初的現(xiàn)狀，在對(duì)畜禽糞尿的處理上也有很大改觀[5]。中國(guó)與之相比較畜禽污染防治法較為粗放，大多數(shù)畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)沒有污染治理措施，畜禽糞便未經(jīng)處理就地排放。畜禽的糞便和尿中有大量的病原微生物、寄生蟲卵，直接威脅環(huán)境和人類的健康。嚴(yán)重時(shí)還會(huì)導(dǎo)致人畜共患病的傳播，給人畜帶來災(zāi)難性的危害，例如每年春季的流行豬瘟、豬丹毒、口蹄疫。在傳統(tǒng)的一家一戶養(yǎng)豬模式的轉(zhuǎn)化過程中由于對(duì)環(huán)境的重視不夠[6]，導(dǎo)致養(yǎng)豬環(huán)境惡化，進(jìn)而引起疾病的流行，豬的生產(chǎn)性能、健康狀況和肉的品質(zhì)都受到影響，進(jìn)而給養(yǎng)殖戶帶來經(jīng)濟(jì)損失，所以養(yǎng)殖環(huán)境是制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要因素。環(huán)境是防控疾病的首要因素，豬生長(zhǎng)在適宜的環(huán)境中，機(jī)體抵抗力增強(qiáng)，減少疾病的發(fā)生。不良的環(huán)境可直接導(dǎo)致疫病的發(fā)生和傳播[7]，同時(shí)可促使疫病的暴發(fā)。如豬舍內(nèi)的濕度過高可影響新陳代謝，引起仔豬黃白痢;寒冷對(duì)仔豬的間接影響更大，是仔豬黃白痢和傳染性胃腸炎等腹瀉性疾病的主要誘因，還能引起呼吸道疾病。

環(huán)境是提高生產(chǎn)效率的關(guān)鍵。豬生長(zhǎng)在適宜的環(huán)境中能充分發(fā)揮其遺傳潛力，各項(xiàng)生產(chǎn)性能均能發(fā)揮正常[8]。不良的環(huán)境嚴(yán)重制約著豬的各項(xiàng)生產(chǎn)性能。比如：高溫高濕環(huán)境下，豬食欲減退、體溫升高、精神不振;公豬性欲減退;空懷母豬不發(fā)情或發(fā)情異常，妊娠母豬胚胎死亡率高，臨產(chǎn)母豬在溫度過高的情況下甚至還可能造成死亡[9]。

由此可見，豬舍環(huán)境的好壞決定豬場(chǎng)的成敗，做好豬舍內(nèi)外的環(huán)境評(píng)價(jià)、環(huán)境監(jiān)測(cè)是很有必要的，夏季對(duì)成年豬做好防暑降溫工作，冬季提高新生仔豬和斷奶豬環(huán)境溫度。豬舍的濕度也是引發(fā)豬病的因素之一，為了防止?jié)穸冗^高，首先要減少豬舍內(nèi)水汽的來源，盡量不用大量的水沖刷圈舍，避免積水造成濕度過高，還要設(shè)置通風(fēng)設(shè)備，經(jīng)常開啟門窗以降低室內(nèi)濕度，為美化豬場(chǎng)的環(huán)境可以在豬場(chǎng)周圍植草種樹，不但具有綠化環(huán)境的作用，夏季還能發(fā)揮遮陽(yáng)的作用，適當(dāng)?shù)慕档蜏囟萚10]。

不單是這些自然因素可以影響豬的生長(zhǎng)，養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)部的水質(zhì)也是影響豬只的重要因素，而影響水質(zhì)的不僅是水中的細(xì)菌，還有一些藻類，水藻是污染水源的微生物之一，有些水藻能夠產(chǎn)生對(duì)豬有毒的化合物，在極端的情況下，藻類能產(chǎn)生具有異味的物質(zhì)，使豬肉有塑料味或泥腥味[11]。被細(xì)菌和藻類污染的水會(huì)引起豬的疾病，有時(shí)會(huì)抑制其免疫系統(tǒng)，從而危害生產(chǎn)性能，還有些非致病的細(xì)菌和藻類會(huì)使水出現(xiàn)難聞的氣味和滋味，豬不愿飲水或采食導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降。防止水質(zhì)污染的有效措施是對(duì)水管采取沖擊處理，采用有機(jī)酸和清潔劑進(jìn)行清潔處理，隨后添加艾菌清，但是使用有機(jī)酸和清潔劑時(shí)要注意避免有機(jī)酸和清潔劑進(jìn)入眼中或呼吸道造成生命危險(xiǎn)[12]。近年來養(yǎng)殖戶不注重豬舍環(huán)境和養(yǎng)殖場(chǎng)飲用水的質(zhì)量，不合理的應(yīng)用抗生素導(dǎo)致疫病的暴發(fā)，給養(yǎng)殖戶帶來經(jīng)濟(jì)損失，因此本實(shí)驗(yàn)從圈舍內(nèi)細(xì)菌和水中微生物的檢測(cè)入手，為養(yǎng)殖戶解決圈舍和飲用水中微生物超標(biāo)的問題，并且通過藥敏試驗(yàn)為養(yǎng)殖戶在殺菌消毒用藥方面提供合理依據(jù)。

1　材料

1.1試驗(yàn)用的藥品

抗生素：萬古霉素、萘啶酸、強(qiáng)力霉素、妥布霉素、乙酰螺施霉素、慶大霉素、四環(huán)素、紅霉素、新霉素、卡那霉素、壯觀霉素、痢特靈、新生霉素、林克霉素、氯霉素、氟哌酸、呋喃妥因、復(fù)方新諾明、利福平、多粘菌素B、先鋒霉素V、氨芐青霉素、頭孢曲松、先鋒孟多、氧哌嗪青霉素、苯唑青霉素、頭孢他定、頭孢拉定、頭孢拉定、青霉素G、鏈霉素、頭孢噻肟、丁胺卡那、麥迪霉素、世福素、環(huán)丙沙星、阿莫西林、奧復(fù)星、優(yōu)立新、洛美沙星、米諾環(huán)素、頭孢噻吩、頭孢哌酮、頭孢呋肟。

1.2試驗(yàn)用的儀器

血液瓊脂培養(yǎng)基，藥敏試紙，溫度計(jì)，鑷子，移液器(10uL)，刻度尺，濕度計(jì)，豬舍飲用水，無菌注射器，高壓蒸汽滅菌器，干熱滅菌箱，37℃恒溫培養(yǎng)箱，菌落計(jì)數(shù)器。

2　方法

2.1試驗(yàn)步驟

樣品的采集在豬舍內(nèi)養(yǎng)殖床的下方15cm區(qū)域內(nèi)采樣，取11個(gè)培養(yǎng)基平均放置在養(yǎng)殖場(chǎng)角落、中心、窗，放置2min后蓋上培養(yǎng)皿蓋收回，然后采用無菌注射器抽取豬舍飲用水1mL與培養(yǎng)基一并帶回。

實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：采用藥敏試驗(yàn)檢測(cè)法步驟如下,將取回的培養(yǎng)基放在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)10～18h;用移液器吸取培養(yǎng)好的菌落2uL注入培養(yǎng)平板上，用涂菌環(huán)涂抹均勻;用鑷子夾取藥敏片分別放置在培養(yǎng)平板上兩紙片間距大于25mm，紙片離培養(yǎng)皿邊緣15mm分別在培養(yǎng)平板下部標(biāo)記抗生素名稱和菌種名稱;將平板底部向上在37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h后觀察。

圈內(nèi)常在菌和豬舍飲用水菌數(shù)的檢測(cè)：無菌操作的方法用無菌移液器吸取混合均勻水樣1mL注入另一個(gè)培養(yǎng)平皿中用涂菌環(huán)涂抹均勻;將融化后的瓊脂倒入無菌培養(yǎng)平皿中將水樣與其混合均勻，然后取瓊脂倒入另一個(gè)培養(yǎng)平皿中作對(duì)照;待瓊脂冷卻后將培養(yǎng)平皿底部向上，放入恒溫培養(yǎng)箱中24h后取出計(jì)算每個(gè)平皿的菌數(shù)。

2.2判定標(biāo)準(zhǔn)

藥物敏感性判定標(biāo)準(zhǔn)參照美國(guó)臨床試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(National Committee Clinical Laboratory Standards NCCLS)頒布的《抗微生物藥物敏感性執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)第14版信息增刊》的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

3　結(jié)果

3.1環(huán)境和水質(zhì)情況

由試驗(yàn)得知圈舍內(nèi)細(xì)菌總數(shù)是8.9629萬個(gè)/m3，標(biāo)準(zhǔn)參考值≤5萬個(gè)/m3；超過標(biāo)準(zhǔn)值3.9629萬個(gè)/m3，水中微生物數(shù)量577mL，標(biāo)準(zhǔn)參考值≤100mL，超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)477mL。因此圈舍內(nèi)常在菌和飲用水中細(xì)菌數(shù)目均超過國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。

3.2抗生素敏感性結(jié)果

在藥敏紙片含量為10μg時(shí)，先鋒孟多的抑菌圈直徑是34mm，強(qiáng)力霉素的抑菌圈直徑是20mm，氟哌酸抑菌圈直徑是18mm，新生霉素抑菌圈直徑是14mm，丁胺卡那的抑菌圈直徑是12mm，四環(huán)素的抑菌圈直徑是7mm，利福平抑菌圈直徑是4mm，其余藥物均不產(chǎn)生抑菌圈。

4　討論

實(shí)驗(yàn)中可知圈舍內(nèi)細(xì)菌總數(shù)是8.9629萬個(gè)/m3，標(biāo)準(zhǔn)參考值≤5萬個(gè)/m3，水中微生物數(shù)量577mL，標(biāo)準(zhǔn)參考值≤100mL，可以得出圈舍內(nèi)細(xì)菌總數(shù)和飲用水中微生物數(shù)量均不符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，圈舍空氣中細(xì)菌超標(biāo)79.26%，陽(yáng)性菌較多，霉菌陰性菌均存在。造成圈舍內(nèi)菌落超標(biāo)的原因是由于豬舍通風(fēng)設(shè)施不夠完善，對(duì)于封閉式豬舍夏季通風(fēng)較好，冬季隨著天氣寒冷通風(fēng)次數(shù)不斷減少而造成空氣中菌落超標(biāo)。由于水源的管理不當(dāng)導(dǎo)致水中微生物超標(biāo)。

藥敏試驗(yàn)得知：圈舍內(nèi)常在的細(xì)菌敏感抗生素是強(qiáng)力霉素、阿莫西林、洛美沙星；對(duì)新霉素、慶大霉素、四環(huán)素、鏈霉素均耐藥。仔豬黃白痢病原的分離及藥敏試驗(yàn)得出：卡那霉素、多粘菌素高敏；氨芐西林及氟苯尼考中敏，對(duì)新霉素、慶大霉素、鏈霉素、四環(huán)素均耐藥，本次試驗(yàn)與該學(xué)者實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本相同[12]。之所以有耐藥菌落的產(chǎn)生是由于不合理應(yīng)用抗生素所至。

5　防治措施

冬季由于溫度過低、封閉式養(yǎng)殖場(chǎng)的通風(fēng)和溫度之間存在矛盾，所以養(yǎng)殖戶為了保證溫度而不注重通風(fēng)，往往是導(dǎo)致豬發(fā)病的因素之一，所以冬季也該注重通風(fēng)，對(duì)開放式豬舍采用局部保溫，大環(huán)境通風(fēng)，對(duì)于封閉式豬舍采用自動(dòng)控制風(fēng)機(jī)進(jìn)行通風(fēng)，同時(shí)規(guī)范的消毒程序也是不可缺少的，做好通風(fēng)和消毒控制圈舍細(xì)菌在標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)，減少由環(huán)境中細(xì)菌引起的疾病給養(yǎng)殖戶造成損失，同時(shí)找出水源菌落數(shù)超標(biāo)的原因加以治理。

經(jīng)過藥敏試驗(yàn)的檢測(cè)可知圈舍內(nèi)常在的細(xì)菌對(duì)大多數(shù)抗生素有耐藥性，造成這種耐藥性的原因是抗生素的不合理應(yīng)用，在使用抗生素時(shí)應(yīng)注重抗生素的選擇，避免大量應(yīng)用易產(chǎn)生耐藥性的抗生素，避免圈舍內(nèi)耐藥菌株的增加，為養(yǎng)殖帶來潛在的風(fēng)險(xiǎn)。菌落對(duì)抗生素耐藥是一種自然的過程，在抗生素應(yīng)用的過程中只要不大量應(yīng)用耐藥性抗生素，并且有針對(duì)性的對(duì)某種菌應(yīng)用某種藥物，從而減少耐藥菌株的存在，減少對(duì)養(yǎng)殖戶造成的風(fēng)險(xiǎn)。利用生物制劑替代日常養(yǎng)殖過程中投喂抗生素進(jìn)行預(yù)防疫病的輔助功能。

[1]劉德旺.集約化豬場(chǎng)決勝未來的管理措施[J].豬業(yè)科學(xué),2006,23(10): 92-93.

[2]陳煥生,聶風(fēng)英.國(guó)外養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的趨勢(shì)與經(jīng)驗(yàn)[J].飼料研究,2005,(1): 41-42.

[3]倪冬嬌,高增兵,金立志.歐盟養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展?fàn)顩r及對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的啟示 [J].中國(guó)畜牧雜志,2006,42(2): 50-51.

[4]田亞磊，韓金玲，賀寶云，等.舍內(nèi)溫度變化對(duì)哺乳期母、仔豬的影響[J].豬業(yè)科學(xué),2010,27(4):69-70.

[5]李清勇.豬舍空氣質(zhì)量對(duì)豬生產(chǎn)性能的影響及控制措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2012(1):16-17.

[6]伍清林，金蘭梅，周玲玲，等.規(guī)模化豬場(chǎng)舍內(nèi)外空氣質(zhì)量變化的研究[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2012,39(11):221-222.

[7]秦少梅，朱建國(guó).規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)環(huán)境污染情況調(diào)查和防控措施[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2012，28(11)：6-7.

[8]李建軍，常娟.豬舍科學(xué)消毒技術(shù)[J].農(nóng)村科技,2011(8):56-57.

[9]Zhu Yongwen.Manure treatment technologies,disease and odor control [J].Today's swine industry，2012(1):54-55.

[10] 何琦,金志強(qiáng),周碧君.規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)環(huán)境微生物污染動(dòng)態(tài)的監(jiān)測(cè) [J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,39(11): 156-157.

[11] 懷明燕,王晨輝.水質(zhì)對(duì)豬的重要性[J].國(guó)外畜牧學(xué)-豬與禽,2007,27(3): 22-23.

[12] 郭延敏.仔豬黃白痢病原分離及藥敏試驗(yàn)[J].畜牧與獸醫(yī),2011,43(9): 80-81.

2015-11-30

趙達(dá)卓(1980-),女 ,碩士研究生,獸醫(yī)師。

許龍春(1964-),男 ,博士,研究員。

S816.73

A文章編號(hào)：2095-9737(2016)04-0007-02