CD2AP相關作用的研究進展

康麗霞++陳素枝++陳文軍

【摘要】 CD2AP首先是作為一個免疫分子被發現，其后又證實它也是一個足細胞分子，與其他各種足細胞相關蛋白的關系密切而復雜，并參與信號傳導，在腎臟病的發生中起重要作用。文中從CD2AP與蛋白質的關系，中醫藥上調CD2AP研究的現狀等方面綜述CD2AP相關作用的研究進展。

【關鍵詞】 CD2AP；足細胞；蛋白尿；中醫藥

【中圖分類號】R692

【文獻標志碼】A

【文章編號】1007-8517（2015）24-0019-02

蛋白尿是腎小球疾病的基本表現之一，是促使腎臟疾病進展的獨立危險因素，尤其足細胞損傷在腎病發展中更為重要，CD2AP作為一個足細胞分子，通過參與細胞免疫、細胞骨架組裝、維持裂孔隔膜的結構、信號轉導等功能與蛋白尿發生密切相關，是維持腎小球濾過屏障生理完整性的重要成分之一。CD2AP表達下降可引起足細胞損傷而致大量蛋白尿，研究發現中醫藥對上調CD2AP具有良效，能有效阻止腎臟病進展。

1 CD2AP與蛋白尿的關系

CD2相關蛋白（CD2-associated protein，CD2AP）是近年來發現的與蛋白尿發生密切相關的SD分子。CD2AP是足細胞裂孔隔膜上一種重要的蛋白質，先天缺乏此蛋白的小鼠出生后不久即出現大量的蛋白尿…，并伴有足突的融合和消失，表明CD2AP在蛋白尿的發生中有重要的作用。CD2AP水平的減少在兒童的微小病變和IgA腎病也已經證實。

1.1 CD2AP的結構和功能 CD2AP是分子量為80kD的跨膜蛋白，含有639個氨基酸殘基。N端有3個連續的SH3結構域，可與許多信號傳導和細胞骨架分子中的富含脯氨酸序列相互作用；C端有1個螺旋結構域和肌動蛋白細胞骨架的結合位點，這樣的分子結構特點表明它對細胞骨架具有調節作用。

1.2

CD2AP參與細胞免疫 CD2AP作為一個免疫分子表達于T淋巴細胞及自然殺傷細胞的表面，通過其SH3結構與T細胞黏附蛋白CD2結合，促進T細胞與抗原呈遞細胞的黏附，起到促進抗原識別和呈遞的作用。在T細胞激活后，又參與T細胞表面抗原識別受體的降解，起到避免過度免疫反應、防止T細胞死亡的作用。CD2AP參與足細胞對免疫復合物的降解，其表達異常可致足細胞清除功能下降，可引起蛋白尿和腎小球疾病。

1.3

CD2AP穩定足細胞骨架結構 F-actin對維持足突的結構與功能有著重要作用。研究表明，CD2AP參與了多種細胞生理過程中actln骨架的構建，對骨架結構起穩定作用。Lehtonen等在培養的小鼠腎小管上皮細胞中發現，CD2AP與F-actin部分聯合定位，且肌動蛋白細胞骨架的斷裂可導致內源性CD2AP結構的破壞，Gaidos等通過F-actin結合實驗發現這種聯合通過CD2AP羧基端直接與F-actin結合實現。黃松明等研究顯示腎小球CD2AP表達量的改變與F-actin含量變化呈顯著正相關（P<0.01），腎小球CD2AP表達量的下降過程中伴隨著F-actin含量的減少。Synaptopodin是足細胞分化的標志蛋白，也是重要的與F-actin結合的骨架蛋白之一，Synaptopodin過表達可引起F-actin纖維骨架重建，部分區域呈點塊狀濃聚；而synaptopodin表達沉默可導致足細胞內F-actin纖維骨架消失。CD2AP可通過蛋白氨基端3個SH3結構域直接與synaptopodin結合，推測CD2AP的SH3結構域突變可能會影響CD2AP與synap-topodin的結合，進而對synaptopodin與F- actin的結合產生影響，最終導致足細胞內F - actin纖維骨架的改變。

1.4

CD2AP維持裂孔隔膜正常濾過 nephrin特異性地表達于足細胞裂孔膜上，與足細胞的成熟及裂孔隔膜的形成有關，其表達下降是引起蛋白尿的原因，而非蛋白尿所致的一繼發性改變。Shih等研究表明CD2AP可通過其C端與nephrin胞內C區相互連接，兩者在足細胞中一起表達，分布部位基本一致，在nephrin和肌動蛋白細胞骨架間起橋梁作用，起到穩定SD的作用。podocin為脂質筏相關蛋白家族的新成員，電鏡下可見podocin面對裂孔隔膜，兩末端插于足突的胞質中。CD2AP可與podocin在足細胞內SD處發生連接，正常情況下它們在足突和裂隙孔膜的形成中發揮著協同作用，CD2AP蛋白表達的減少，可同時伴podocin蛋白表達降低，它們的減少導致了足細胞發育停滯。Asanuma等研究表明，CD2AP、nephrin與podocin定位于SD區。CD2AP是使nephrin、podocin與足細胞細胞骨架相連的重要組成部分，三者通過彼此間的相互作用形成neph-rin-CD2AP-podocin復合物，將裂孔隔膜鉚釘于足細胞肌動蛋白骨架上，以維持濾過膜正常濾過功能，三者僅一種成分的改變即可導致大量蛋白尿。

1.5

CD2AP參與信號傳導 目前研究表明與SD有關的信號傳導通路主要有PI3 K/AKT和MAPK通路，MAPK家族成員主要有p38MAPK及ERKl/2，P13 K/AKT和ERKI/2活性增加可以抑制細胞凋亡，而p38MAPK則促細胞凋亡。在正常足細胞、GTF-β刺激下CD2AP通過增加PI3 K/AKT和ERKI/2的活性抑制足細胞的凋亡； CD2AP基因敲除小鼠足細胞在TGF-β刺激下足細胞AKT活性明顯降低而p38MAPK活性顯著增加及足細胞更易凋亡。

2 中醫藥上調CD2AP研究的現狀

減少CD2AP表達的下降，或上調CD2AP可減少足細胞損傷，延緩腎臟病進展。中醫藥治療對于上調CD2AP的研究有民間驗方、藥食同源、中藥復方、成方中藥等方面，研究證實中醫藥能上調CD2AP。

2.1 民間驗方 蟾蜍作為民間驗方有使腎病模型大鼠CD2AP上調的作用。林麗等用蟾蜍干預阿奇霉素腎病大鼠，造模出現三高一低腎病綜合征表現后發現CD2AP在腎小球足細胞的表達明顯下降，蟾蜍及蟾蜍加強的松干預后其表達上調，同時蛋白尿亦明顯減少。

2.2 藥食同源祖國醫學有藥食同源之說，王鑫等研究發現鯉魚赤小豆湯干預阿霉素腎病大鼠后發現Nephrin與CD2AP的蛋白表達均有不同程度上升，并有一定的量效關系，高劑量組上調Nephrin與CD2AP更加明顯。徐常杰等研究發現阿霉素腎病大鼠CD2AP和Nephrin蛋白的表達較正常大鼠明顯減少，經鯉魚湯干預后，其表達均有不同程度上調，還提高了血清總蛋白、白蛋白水平，減少了尿中蛋白質排泄。

2.3 中藥復方郭明慧等在誘導的阿霉素腎病大鼠中發現其腎小球CD2AP、Cortactin、Arp2/3復合體的表達均減少，進而可能影響了足細胞骨架蛋白，出現足細胞融合，而在溫陽活血利水方治療4周后改善了CD2AP、Conactin、Arp2/3復合體表達的下降，療效與強的松組類似。這些蛋白表達與分布的改善，有助于actln骨架蛋白結構的穩定，改善足突融合，維持腎小球濾過屏障的形態和功能完整，減少蛋白尿。袁軍等用阿霉素誘導一種類似人類微小病變腎病模型后分別用溫陽活血方和強的松治療，治療4周后模型組較正常組CD2AP、synaptopodin表達顯著下降（均P

2.4 成方中藥王立范等研究亦表明阿霉素腎病大鼠模型組中Nephrin mRNA、CD2AP mRNA均高于正常組的表達，治療組分為洛汀新組、腎炎消白顆粒低劑量組、腎炎消白顆粒高劑量組，干預后而各治療組腎組織中NephrinmRNA、CD2AP mRNA均較模型組表達減少，表明腎炎消白方及洛汀新可能通過穩定足細胞上的nephrin、CD2AP蛋白分子，維護腎小球濾過膜的正常結構，從而達到治療蛋白尿的作用。趙宗江在研究糖腎平對糖尿病腎病大鼠足細胞nephrin與CD2AP蛋白及其mRNA表達的影響時，將造模成功后的大鼠隨機分為模型組、厄貝沙坦組、糖腎平小、大劑量組干預14周。結果發現，模型組與正常組相比nephrin和CD2AP蛋白及其mRNA表達水平明顯下調（P<0.01）；與模型組相比厄貝沙坦、糖腎平干預后糖尿病大鼠腎小球足細胞nephrin和CD2AP蛋白及其mRNA水平表達明顯增加（P<0.05），提示糖腎平可能通過維持足細胞裂孔隔膜蛋白nephrin和CD2AP的穩定性，從而發揮對DN腎臟的保護作用。耿建國等研究芪衛顆粒對糖尿病腎病大鼠足細胞CD2AP表達的影響時，將造模成功后的大鼠隨機分為模型組、西藥組以及芪衛顆粒組干預24周。結果發現，與正常組相比，模型組腎組織足細胞CD2AP表達顯著下降，24h尿微量白蛋白濃度顯著升高；藥物干預后各給藥組腎組織CD2AP表達明顯上調，24h尿微量白蛋白濃度明顯下降，說明芪衛顆粒能夠上調CD2AP在腎組織的表達，降低DN大鼠尿微量白蛋白排泄，延緩DN的發生發展。

3 展望

CD2AP在蛋白尿發生及腎臟病緊張中起重要作用，中醫藥能夠上調CD2AP的表達，延緩或阻止腎臟病進展，但其作用機制尚不明確，有待進一步研究。在中醫理論指導下，充分發揮中醫藥治療腎臟病的優勢，將會取得更好的臨床治療效果。