AVE-763尿沉渣自動分析流水線與顯微鏡檢查結果比較及復檢規則的建立

劉天霞，王婷婷

(白銀市第二人民醫院檢驗科，甘肅白銀 730900)

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·臨床研究·

AVE-763尿沉渣自動分析流水線與顯微鏡檢查結果比較及復檢規則的建立

劉天霞，王婷婷

(白銀市第二人民醫院檢驗科，甘肅白銀 730900)

摘要:目的分析尿液干化學分析(簡稱干化學)和有形成分分析(簡稱尿流式) 及顯微鏡尿沉渣結果的差異，建立顯微鏡復檢規則。方法以AVE-763尿有形成分分析儀及GEB600尿干化學分析儀構成檢測流水線，對臨床尿標本先用流水線進行紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、管型(CAST)及潛血(BLD)、中性粒細胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)檢測，再用顯微鏡進行驗證。結果GEB600和AVE-763兩者檢測均正常或同時異常的標本用顯微鏡復檢，結果之間的差異無統計學意義(χ2=1.46，P=0.23)。AVE-763與GEB600兩者檢測結果不符合標本，經顯微鏡進行RBC、WBC、CAST檢測,結果差異有統計學意義(χ2=16.75、15.29、79.18，P=0.001)。結論AVE-763與GEB600兩者檢測結果不符合時，不能以AVE-763代替顯微鏡尿沉渣檢查，需參照相應的復檢規則進行復檢，保證檢測結果準確性。

關鍵詞:尿分析；自動分析；顯微鏡檢查

常規尿液分析是臨床工作中最常用的檢查手段之一，對泌尿系統疾病的篩查和鑒別診斷具有重要的參考價值[1-2]。傳統的尿液分析包括干化學檢測和顯微鏡鏡檢中的有形成分分析兩步[3]。近年來，隨著自動化尿液檢測技術的推廣應用和持續進步，自動尿液常規分析流水線越來越多在檢驗科中使用，但由于尿液標本的復雜性和干化學分析儀存在方法學的局限性，干化學分析儀檢測與形態學鏡檢結果存在差異。所以，對自動化尿常規分析發現異常的尿液標本，有待于進一步通過形態學鏡檢進行確認核對分析。本研究以顯微鏡檢查為參考方法，對GEB600尿干化學分析儀檢測的潛血(BLD)、中性粒細胞酯酶(LEU)、蛋白(PRO)結果和AVE-763尿有形成分分析儀檢測的紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)、管型(CAST)結果的可信度進行評估[4-5]，當二者檢測結果不符時，則有必要以形態學鏡檢結果為診斷依據，進而區別假陽性或假陰性結果，達到提高檢驗結果準確度的目的。

1材料與方法

1.1標本來源收集本院門診患者尿液標本870份，住院患者尿液標本990份，共計1 860份，其中來自男性927例，女性933例，年齡2～82歲，中位年齡46歲。

1.2儀器與試劑尿液流水線由GEB600尿干化學分析儀與AVE-763全自動尿有形成分分析儀組成，AVE-763分析儀使用原裝配套試劑、質控品、校準品；GEB600尿干化學分析儀使用原裝配套試紙條和配套質控品。顯微鏡采用日本Olympus光學工業株式會社生產的雙目顯微鏡。

1.3檢測方法

1.3.1自動化尿液常規分析尿液留取標準依據《臨床檢驗操作規程(第3版)》[6]，每日隨機抽取10～20份新鮮中段尿液標本，每份標本于留取2 h內分別用干化學分析儀GEB600(簡稱“GEB600”)及尿有形成分分析儀AVE-763(簡稱“AVE-763”)進行檢測，尿液干化學分析儀分析指標包括BLD、LEU、PRO；尿有形成分分析指標包括RBC、WBC、CAST等，將原始檢測結果備份存檔。

1.3.2尿沉渣顯微鏡檢查取混勻的尿液標本10 mL于一次性尿液專用塑料試管，以1 500 r/min離心5 min，棄去上清液，留取0.2 mL尿沉渣，輕搖離心管，使尿沉渣充分混勻，滴入專用尿沉渣計數板中，進行尿沉渣中RBC、WBC、CAST定量計數。

1.4判斷標準鏡檢結果以《臨床檢驗操作規程(第2版)》[7]中制定的“RBC>3/HP、WBC>5/HP、CAST>1/LP”作為陽性判斷標準；尿液干化學分析的參考范圍由廠家提供，以BLD、LEU和PRO達到陽性閾值及以上判斷為陽性；AVE-763尿有形成分分析儀的參考范圍為本實驗自建范圍，RBC、WBC和CAST超出參考范圍上限、出現非透明管型者判斷為陽性。

1.5統計學處理采用SPSS19.0統計軟件進行數據處理及統計學分析。計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1AVE-763尿有形成分分析儀中細胞和管型成分的參考范圍建立(1)RBC：0～8.5/μL(男)，0～13.9/μL(女)；(2)WBC：0～11.5/μL(男)，0～12.7/μL(女)；(3)CAST：0～1.2/μL。陽性判斷標準如下：(1)RBC：>8.5/μL(男)，>13.9/μL(女)；(2)WBC：>11.5/μL(男)，>12.7/μL(女)；(3)CAST：>1.2/μL，出現非透明管型。

2.2GEB600和AVE-763檢測結果比較兩者檢測均正常的標本765份，GEB600和AVE-763檢測匹配項目同時異常的標本633份，包括：(1) GEB600潛血陽性和AVE-763紅細胞異常398份；(2) GEB600中性粒細胞酯酶陽性和AVE-763白細胞異常336份；(3) GEB600蛋白陽性和AVE-763 管型異常16份。同一份標本可同時有2～3個匹配項目陽性，經顯微鏡復檢結果見表1。AVE-763與GEB600檢測均正常和二者檢測匹配項目同時異常的標本時，顯微鏡檢查結果與儀器檢測結果之間的差異無統計學意義(χ2=1.46，P=0.23)。

2.3AVE-763與顯微鏡鏡檢結果比較AVE-763與GEB600結果不符合標本，經顯微鏡進行RBC、WBC、CAST檢測，見表2。AVE-763檢測的RBC、WBC、CAST結果與GEB600檢測的BLD、LEU、PRO結果不符的標本，與顯微鏡鏡檢的RBC、WBC及CAST檢測結果的差異均有統計學意義(χ2=16.75、15.29、79.18，P=0.001)。

表1　　AVE-763與GEB600相符合標本的顯微鏡檢查

表2　　AVE-763與GEB600結果不相符的標本顯微鏡檢查

3討論

自動尿液常規分析流水線近年來越來越多地在檢驗科中使用，它將尿液自動干化學分析和有形成分分析結合起來，使尿液常規檢驗更加迅速、準確。但尿干化學法存在方法學的局限，如僅能檢測尿清蛋白和尿中性粒細胞，不能排除尿球蛋白、尿淋巴細胞、單核細胞及細菌對細胞的干擾等。當尿液中存在過多的結晶、上皮細胞、黏液絲、大量細菌、大量細胞時，會干擾尿液有形成分分析儀的檢測結果。所以即使聯合使用干化學和尿流式分析儀對尿液進行常規分析檢測也不能完全替代有形成分的鏡檢[8-9]。對此需要制定相應的復檢規則，對不需要鏡檢的標本直接發放報告，篩選出需要鏡檢的標本，以保證檢驗結果的正確性。

本研究結果顯示，應用尿液流水線AVE-763檢測的RBC、WBC、CAST與GEB600檢測的BLD、LEU、PRO結果均正常或同時異常的標本時，顯微鏡檢查結果與流水線AVE-763檢測結果比較，差異無統計學意義(P>0.05)。47份AVE-763與GEB600檢測匹配項目同時異常的標本，顯微鏡檢查正常者有21份為干化學蛋白陽性和尿沉渣管型異常，顯微鏡檢查發現有大量的上皮細胞、大量WBC聚集成團及一些黏液絲；1份為隱血陽性和紅細胞異常，顯微鏡檢查是由于存在草酸鈣結晶、細菌、少量精子；另外12份為干化學和尿沉渣檢測WBC異常，顯微鏡檢查發現標本含有小圓上皮細胞、細菌、扁平上皮細胞和脂肪滴等，其中以小圓上皮細胞為主。36份AVE-763與GEB600檢測均正常，而顯微鏡檢查異常者有21份為孕婦標本，顯微鏡檢查為略超出正常的WBC；3例痛風患者，顯微鏡檢查發現略超出正常的RBC；12例為糖尿病患者，顯微鏡檢查為略超出正常的WBC。因此，當2種儀器RBC與BLD檢測結果一致時，不再需要進行顯微鏡復檢，有利于尿標本檢測的規范化與標準化[10-11]。

AVE-763與GEB600結果不符合標本，經顯微鏡進行RBC、WBC、CAST檢測結果存在明顯差異，研究顯示:(1)RBC檢測AVE-763為陽性，GEB600為陰性，顯微鏡檢測陰性，多見于尿液中存在草酸鈣結晶、真菌、細菌、非定型結晶等的干擾；AVE-763為陽性，GEB600為陰性，顯微鏡檢測陽性，分析原因可能是由于尿液中還原性物質維生素C的濃度大于100 mg/L時，使干化學法檢測潛血呈假陰性結果；AVE-763為陰性，GEB600為陽性，顯微鏡檢測陰性，可能是因為干化學法通過對破損的紅細胞和游離血紅蛋白或肌紅蛋白發生過氧化物酶反應所致。(2)WBC檢測AVE-763為陽性，GEB600為陰性，顯微鏡檢測陰性，可能尿中含有較多腎小管上皮細胞、某些結晶與黏液同時存在，導致尿沉渣分析儀誤判，致使WBC出現假陽性[12]；AVE-763為陽性，GEB600為陰性，顯微鏡檢測陽性，可能因為GEB600僅能檢測中性粒細胞中的酯酶成分，而單核細胞和淋巴細胞不含有酯酶成分，而尿標本中的WBC又是以單核細胞和淋巴細胞為主，也可能是使用了慶大霉素，對干化學造成負干擾表現為假陰性；AVE-763為陰性，GEB600為陽性，顯微鏡檢測陰性，可能是由于尿液在膀胱貯存時間過長或標本放置時間延長導致WBC破壞，酯酶釋放到尿液中。(3)AVE-763檢測CAST為陽性，GEB600檢測PRO為陰性，可能是干化學法檢測PRO的原理采用指示劑誤差法，當尿液pH<3時，以及臨床大量應用青霉素、呋喃類藥物時，均可造成PRO的假陰性；也可能是因為GEB600僅能檢測尿清蛋白，在慢性腎小球腎病進展過程中，常見成分升高的先后順序為：尿黏蛋白、尿微球蛋白、尿管型、尿清蛋白，所以CAST陽性會比PRO陽性出現得更早一些。因此，當2種儀器CAST與PRO檢測結果存在差異時，有必要用傳統的顯微鏡方法復檢。

綜上所述，尿液流水線具有操作流程簡便、快捷、圖像真實、重復性好、可以降低勞動強度、資料易保存等優點，但干化學分析儀對尿液的物質是間接檢測，方法缺乏特異性。尿有形成分分析儀檢測RBC、WBC、CAST時，易受結晶、上皮細胞、黏液絲、大量細菌和細胞的干擾。所以，為了提高檢測結果的準確性，只有尿有形成分分析儀、干化學分析儀及人工顯微鏡鏡檢有機結合，聯合應用，才能減少假陰性及陽性的發生。筆者認為有以下幾種情況的尿液標本必須進行顯微鏡檢查：(1)干化學法檢查的BLD、LEU異常，而尿沉渣檢查RBC、WBC正常者；(2)干化學檢查的BLD、LEU正常，而尿沉渣檢查RBC、WBC異常者；(3)干化學檢查的PRO陽性，而尿沉渣檢查CAST陰性者；(4)干化學檢查的PRO陰性，而尿沉渣檢查CAST陽性者；(5)腎病科的患者及妊娠女性；(6)尿沉渣結果顯示有大量結晶或小圓上皮細胞出現時；(7)本次結果與最近一次結果有明顯差異者。

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(收稿日期：2015-11-08)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.054

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)03-0406-03