Vitros5600檢測血漿肌鈣蛋白I 穩(wěn)定性及假陽性的原因分析

左　軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長春市一汽總醫(yī)院/吉林大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長春 130011)

?

·經(jīng)驗(yàn)交流·

Vitros5600檢測血漿肌鈣蛋白I 穩(wěn)定性及假陽性的原因分析

左軍，宋曉冬，徐建華

(吉林省長春市一汽總醫(yī)院/吉林大學(xué)第四醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林長春 130011)

摘要:目的探討Vitros5600檢測肌鈣蛋白I(CTNI)中存在的假陽性及不穩(wěn)定因素。方法選取今年5月份出現(xiàn)重復(fù)性差，假陽性的20份標(biāo)本進(jìn)行比較分析。結(jié)果20份標(biāo)本中，有些標(biāo)本首次檢測結(jié)果偏高，有的甚至達(dá)到危急值，而當(dāng)再次復(fù)檢后結(jié)果正常或略高，與第一次檢測結(jié)果相差甚遠(yuǎn)。結(jié)論Vitros5600檢測CTNI重復(fù)性差、假陽性及不穩(wěn)定性結(jié)果是多方面因素所致，為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度，必須從標(biāo)本采集到實(shí)驗(yàn)室檢測均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。

關(guān)鍵詞:肌鈣蛋白I；不穩(wěn)定性；假陽性

由于心肌肌鈣蛋白(CTN)特異地分布于心肌組織，作為心肌損傷的高敏感和特異性標(biāo)志物，CTN對于檢測急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者心肌缺血及危險(xiǎn)分級具有重要意義。目前檢測CTN的方法很多，如電化學(xué)發(fā)光免疫檢測法(ECLIA) 、酶聯(lián)熒光分析法等[1]。Vitros5600進(jìn)行血漿CTNI定量檢測已被廣泛應(yīng)用，它采用的是intelliccheck技術(shù)(化學(xué)發(fā)光法)應(yīng)用特異性免疫檢測單克隆抗體[2-3]。其敏感度很高，線性范圍在0.003～66.700 μg/L，檢測結(jié)果的穩(wěn)定性顯得尤為重要。本文主要探討關(guān)于使用Vitros5600檢測CTNI時(shí)，發(fā)現(xiàn)的不穩(wěn)定及其假陽性的一些問題，以示在報(bào)告結(jié)果時(shí)應(yīng)該加以注意，防止誤報(bào)。

1材料與方法

1.1儀器與試劑美國強(qiáng)生Vitros5600生化免疫分析儀及檢測試劑、定標(biāo)液、質(zhì)控品。

1.2檢測方法在經(jīng)過儀器調(diào)試定標(biāo)完成之后，進(jìn)行質(zhì)控檢測，質(zhì)控在控后進(jìn)行標(biāo)本檢測。采集患者新鮮無溶血、乳糜、黃疸的全血4 mL，離心，用血清進(jìn)行直接檢測。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Excel2007軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2結(jié)果

在本院使用Vitros5600 2年期間檢測患者CTNI，選取今年5月份出現(xiàn)重復(fù)性差，假陽性的20份標(biāo)本進(jìn)行比較分析，研究發(fā)現(xiàn)有些標(biāo)本首次檢測結(jié)果偏高，有的甚至達(dá)到危急值，而再次復(fù)檢后結(jié)果正常或略高，與第一次檢測結(jié)果相差甚遠(yuǎn)，見表1。

表1　　20份重復(fù)檢測2次標(biāo)本及同時(shí)定值質(zhì)控品反測結(jié)果

3討論

本研究結(jié)果顯示，在使用Vitros5600檢測患者血清CTNI一段時(shí)間后，某一階段頻繁出現(xiàn)重復(fù)性差、穩(wěn)定性差及假陽性，而質(zhì)控和批量檢測對比竟然沒有明顯變化。其中，在今年5～6月份檢測的1 200份標(biāo)本中假性升高總數(shù)為50例，占4.12%，最為明顯。而真正由心肌梗死問題和其他心臟疾病方面原因引起的升高患者僅占35%，其余患者經(jīng)過二次復(fù)檢證實(shí)為正常結(jié)果。為什么會(huì)出現(xiàn)首次檢測結(jié)果與再次復(fù)檢存在較大差異呢？筆者考慮是不是由于試劑批號(hào)不同所引起的差異，然而，采用不同批號(hào)的試劑進(jìn)行比對也沒有發(fā)現(xiàn)明顯差異。對此也用健康患者血清進(jìn)行了比對，也沒有發(fā)現(xiàn)很大的差異，連續(xù)進(jìn)行標(biāo)本的重復(fù)性檢測結(jié)果顯示穩(wěn)定。之后筆者考慮是不是由于儀器設(shè)備本身的因素，例如光源、檢測模塊、吸樣針、吸樣量等多方面因素造成的，更換相關(guān)儀器部件，再進(jìn)行檢測，也沒有發(fā)現(xiàn)具體引起這種現(xiàn)象的主要因素。

從標(biāo)本采集開始，仔細(xì)研究是不是由于采血量、離心力及離心時(shí)間不夠，或者由于纖維蛋白凝塊，或者有極微小的凝塊所致。筆者對每一份標(biāo)本離心后采用手工方式徹底分離血清以達(dá)到減少微凝到最低程度的目的。此外，同樣選取無溶血、無乳糜、無黃疸的標(biāo)本進(jìn)行檢測，同時(shí)也考慮到藥物方面的影響，以及臨床護(hù)士采集標(biāo)本時(shí)的一些影響因素，經(jīng)過分離血清用測試小杯將血清分離進(jìn)行測試，但還是或多或少，不定期地出現(xiàn)2次檢測結(jié)果不符及假陽性的現(xiàn)象。

之后筆者考慮過多的分離步驟也許會(huì)影響結(jié)果的重復(fù)性及穩(wěn)定性，采用增加標(biāo)本采集量的方法，每份標(biāo)本采血量不少于4 mL，離心時(shí)間不少于8 min，離心速度不低于4 000 r/min，待血清完全分離好后直接上機(jī)檢測。經(jīng)過這些嘗試后雖然出現(xiàn)假陽性頻率略低，但還是存在一定的假陽性率。

經(jīng)過和廠家技術(shù)人員共同分析，以及從他們那兒吸取經(jīng)驗(yàn)，考慮到室內(nèi)環(huán)境的塵埃是不是也會(huì)影響到結(jié)果的穩(wěn)定性。因此，本院檢驗(yàn)科定期清潔空調(diào)，并且在機(jī)房內(nèi)加裝空氣凈化器以減少對檢測時(shí)的影響。綜合上訴各種原因，筆者認(rèn)為造成這種重復(fù)性差、假陽性及不穩(wěn)定性結(jié)果是多方面因素所致。為了保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度，必須從標(biāo)本采集到實(shí)驗(yàn)室檢測均嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行。對于這種靈敏度高的檢測項(xiàng)目必須注意結(jié)果的監(jiān)測，一方面在平時(shí)要做好儀器設(shè)備的保養(yǎng)維護(hù)，另一方面對于不同批號(hào)的試劑應(yīng)做對比，堅(jiān)持做好室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評。

參考文獻(xiàn)

[1]張志榮，李強(qiáng).老年膿毒癥患者血漿BNP和肌鈣蛋白I檢測的臨床價(jià)值[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生,2015，9(19):19-21.

[2]張振輝，陶麗麗，陳偉燕，等.肌鈣蛋白-I、B型利鈉肽、血乳酸對膿毒癥心功能障礙患者嚴(yán)重程度及預(yù)后評估的價(jià)值[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2014，33(9):1424-1426.

[3]李振華，董磊，王國興，等.腦利鈉肽、肌鈣蛋白T和I監(jiān)測對重癥膿毒癥和膿毒癥休克預(yù)后的意義[J].中華急診醫(yī)學(xué)雜志, 2012, 21(9):1016-1021.

(收稿日期：2015-10-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.063

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1673-4130(2016)03-0419-02