日本東曹AIA900全自動免疫儀檢測甲狀腺功能項目的性能驗證

王春雷

(鹽城市亭湖區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，江蘇鹽城 224001)

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日本東曹AIA900全自動免疫儀檢測甲狀腺功能項目的性能驗證

王春雷

(鹽城市亭湖區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，江蘇鹽城 224001)

摘要:目的對日本東曹AIA900全自動免疫分析儀檢測游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、血清游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)進行分析性能驗證。方法根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)文件及參考國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)15189相關(guān)要求，對AIA900檢測FT3、FT4、TSH的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍及生物參考區(qū)間進行分析性能驗證，并和生產(chǎn)廠家標(biāo)注的性能指標(biāo)進行對比。結(jié)果各檢測項目的批內(nèi)、批間精密度變異系數(shù)(CV)符合美國臨床實驗室修正法規(guī)1988(CLIA＇88)規(guī)定的TEa要求，且均低于廠家聲明的CV；準(zhǔn)確度驗證以2014年衛(wèi)生與計劃生育委員會臨檢中心內(nèi)分泌室間質(zhì)評標(biāo)本為檢測對象，F(xiàn)T3、FT4、TSH的檢測值與靶值的偏倚均符合臨檢中心允許范圍；線性范圍檢測結(jié)果以平均斜率法評價分析，各項目r≥0.975,斜率a在0.95～1.05,表示儀器檢測線性良好；生物參考區(qū)間驗證也與廠家提供的指標(biāo)相符。結(jié)論日本東曹AIA900全自動免疫儀在檢測FT3、FT4、TSH時的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、生物參考區(qū)間4個性能指標(biāo)均符合臨床檢驗的要求。

關(guān)鍵詞:全自動化學(xué)發(fā)光儀；游離三碘甲狀腺原氨酸；血清游離甲狀腺素；促甲狀腺激素性能驗證

本院在2014年新購了一臺日本東曹AIA900全自動免疫儀(以下簡稱“AIA900”)，其原理主要是利用化學(xué)發(fā)光技術(shù)和熒光磁微粒酶免技術(shù)，以檢測體內(nèi)激素、腫瘤標(biāo)志物、特定蛋白等微量物質(zhì)。目前，國內(nèi)的化學(xué)發(fā)光儀器市場上，該機型并不多見。為評價該檢測系統(tǒng)是否能夠滿足臨床需要，本實驗室根據(jù)美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)文件及參考國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)15189相關(guān)要求，對AIA900檢測血清游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、血清游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)進行了精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍及生物參考區(qū)間的性能驗證，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源

1.1.1精密度檢測標(biāo)本日本東曹公司提供的復(fù)合質(zhì)控品LEVEL1、LEVEL2，批號E140027、E140037。

1.1.2準(zhǔn)確度檢測標(biāo)本衛(wèi)生與計劃生育委員會臨檢中心2014年下半年發(fā)放的內(nèi)分泌室間質(zhì)評標(biāo)本，批號分別為201411、201412、201413、201414、201415。

1.1.3線性范圍檢測標(biāo)本選取覆蓋儀器說明書測量范圍的高(H)、低(L)水平患者新鮮血清各一份，按EP6-A文件[1]配制成系列梯度濃度血清。

1.1.4生物參考區(qū)間檢測標(biāo)本根據(jù)NCCLS C28-A2[2]文件，選取本院健康體檢者20例采集血液標(biāo)本，男女各10例，年齡19～68歲。所選研究對象均發(fā)育正常，無器質(zhì)性病變；3個月內(nèi)無輸血史、手術(shù)史；女性不在妊娠期及哺乳期；3 d內(nèi)未服用過藥物及進行過飲食治療；家族中無影響檢測項目的遺傳病史。

1.2儀器與試劑日本東曹AIA900全自動免疫儀及配套FT3、FT4、TSH檢測試劑、校準(zhǔn)品及人源血清基質(zhì)復(fù)合質(zhì)控品。

1.3方法

1.3.1精密度驗證按本室標(biāo)準(zhǔn)操作(SOP)文件對AIA900進行日常維護保養(yǎng)、校準(zhǔn)以后，按常規(guī)程序在2 h內(nèi)完成復(fù)合質(zhì)控品LEVEL1、LEVEL2的FT3、FT4、TSH檢測各20次，計算批內(nèi)變異系數(shù)(CV)；累積2個水平質(zhì)控品20個工作日的各項目室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)，計算批間CV。批內(nèi)精密度采用美國臨床實驗室修正法規(guī)1988(CLIA＇88)1/4 TEa要求,批間精密度采用1/3 CLIA＇88 TEa要求,并與廠家聲明的精密度進行對比，判斷精密度是否能夠通過驗證。

1.3.2準(zhǔn)確度驗證根據(jù)EP15-A文件[3]，采用衛(wèi)生與計劃生育委員會臨檢中心2014年的5份內(nèi)分泌室間質(zhì)控標(biāo)本為驗證標(biāo)本，按本室SOP文件操作，檢測FT3、FT4、TSH。

1.3.3線性范圍驗證參考NCCLS EP-6A[1]文件，以高水平(接近線性上限)患者血清作為高值標(biāo)本(H)，以低水平(接近線性下限)患者血清作為低值標(biāo)本(L)，按照以下比例混合：400 L H(6號)、320 L H+80 L L(5號)、240 L H+160 L L(4號)、160 L H+240 L L(3號)、80 L H+320 L L(2號)、400 L L(1號)，共6個等間距濃度標(biāo)本，每個濃度標(biāo)本每個項目分別檢測2次，2 h內(nèi)完成，取2次結(jié)果均值為實測值，以平均斜率法評價分析，若r≥0.975，斜率a在0.95～1.05，表示驗證通過。

1.3.4生物參考區(qū)間驗證根據(jù)NCCLS C28-A2文件[2]，對20例體檢健康者的血清標(biāo)本進行檢測。檢測結(jié)果不超過10%，即小于或等于2例結(jié)果在廠家建議的參考區(qū)間以外，說明該參考區(qū)間有效，驗證通過。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用Excel2007統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計學(xué)分析。

2結(jié)果

2.1精密度驗證結(jié)果FT3、FT4、TSH的批內(nèi)、批間精密度檢測結(jié)果顯示，各項目實際CV符合CLIA＇88 TEa要求，且均低于廠家聲明的CV，表明精密度驗證通過。結(jié)果見表1～2。

2.2準(zhǔn)確度驗證結(jié)果檢測衛(wèi)生與計劃生育委員會臨檢中心2014年的5份內(nèi)分泌室間質(zhì)控標(biāo)本，按臨檢中心要求的偏差范圍為判斷依據(jù)，本次檢測100%的結(jié)果滿足要求，表明準(zhǔn)確度驗證通過。見表3。

表1　　批內(nèi)精密度驗證結(jié)果

表2　　批間精密度驗證結(jié)果

表3　　準(zhǔn)確度驗證結(jié)果*

*:AIA900配套試劑說明書中FT3單位為pg/mL，F(xiàn)T4單位為ng/dL，TSH單位為 IU/mL，表3中各檢測值已轉(zhuǎn)換為國際單位，轉(zhuǎn)換公式為FT3,1 pmol/L=1 pg/mL×1.54;FT4，1 pmol/L=1 ng/dL×12.9;TSH,1 mIU/L=1 IU/mL×1.0。

表4　　線性范圍驗證結(jié)果

2.3線性范圍驗證按照線性標(biāo)準(zhǔn)要求，驗證結(jié)果的斜率a值均在0.95～1.05，r均大于或等于0.975，線性范圍驗證通過。見表4。

2.4生物參考區(qū)間驗證20份體檢合格的健康人血清標(biāo)本檢測顯示，在廠家聲明的參考區(qū)間之外的結(jié)果數(shù)均為0。表明可以應(yīng)用廠家聲明的參考范圍。見表5。

表5　　生物參考區(qū)間驗證結(jié)果

3討論

根據(jù)CLIA＇88及ISO15189相關(guān)要求，儀器定量項目應(yīng)用于臨床之前，都需要對其檢驗方法和程序進行分析性能驗證，內(nèi)容至少應(yīng)包括精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍和生物參考區(qū)間[4]。本室在2014年引進了一臺日本東曹AIA900全自動免疫儀，為評價其是否適用于臨床，選擇了平時工作中應(yīng)用十分廣泛的FT3、FT4、TSH項目進行性能驗證。

精密度可以評價儀器檢測的重復(fù)性。從表1～2的數(shù)據(jù)可知，AIA900檢測FT3、FT4、TSH的批內(nèi)、批間CV均符合CLIA＇88 TEa要求，且遠(yuǎn)低于廠家聲明的CV值，說明AIA900具有良好的精密度；準(zhǔn)確度可以評價儀器的系統(tǒng)誤差，本研究分析了衛(wèi)生與計劃生育委員會臨檢中心2014年的5份內(nèi)分泌室間質(zhì)控標(biāo)本，F(xiàn)T3、FT4、TSH檢測值與靶值的最大偏倚分別為4.73%、-7.59%、8.85%，且檢測值均在可接受范圍以內(nèi)，說明AIA900檢測FT3、FT4、TSH的結(jié)果可以信賴；線性范圍可以保證檢測結(jié)果在特定區(qū)間內(nèi)準(zhǔn)確可靠，可以衡量稀釋的標(biāo)本結(jié)果與真值的誤差是否具有臨床可接受性。本研究對FT3、FT4、TSH的線性范圍進行了回歸分析，各檢測項目斜率a值均在0.95～1.05，r均大于或等于0.975，說明檢測值與理論值之間相關(guān)性良好，結(jié)果符合要求；生物參考區(qū)間是指某項檢查結(jié)果在健康人群中的分布范圍，是分析解釋實驗結(jié)果的基本尺度和依據(jù)[5]。AIA900各項目說明書都提供了廠家聲明的生物參考區(qū)間，通過試驗驗證表明，20例符合健康人群篩選標(biāo)準(zhǔn)的血清標(biāo)本檢測FT3、FT4、TSH，結(jié)果均在廠家聲明的參考范圍以內(nèi)，表明生物參考區(qū)間驗證通過。

綜上所述，日本東曹AIA900全自動免疫儀的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍及生物參考區(qū)間都符合試驗要求，可以應(yīng)用于臨床檢驗。

參考文獻

[1]National Committee for Clinical Laboratory.EP6-A Evaluation of linearity of quantitative measurement procedures:a statistical approach[S].Wayne,PA,USA:NCCLS,2003.

[2]National Committee for Clinical Laboratory.C28-A2 How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory[S].2ed th.Wayne,PA,USA:NCCLS,2000.

[3]National Committee for Clinical Laboratory.EP15-A Used demonstration of performance for precision and accuracy[S].Wayne,PA,USA:NCCLS,2001.

[4]畢波，呂元.定量檢測方法學(xué)性能驗證的系統(tǒng)設(shè)計[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2007,30(2)：143-144.

[5]魏有仁.參考值的幾個基本問題[J].中國實驗診斷學(xué)，1997,1(1)：44-46.

(收稿日期：2015-11-20)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.064

文獻標(biāo)識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)03-0420-03