多種抗凝劑引起血小板假性減低1例報道

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·個案與短篇·

多種抗凝劑引起血小板假性減低1例報道

徐陽1，劉莉君2，張磊1，張彥平1，王金華1

(西安交通大學醫學院第二附屬醫院：1.檢驗科；2.腫瘤科，陜西西安 710054)

乙二胺四乙酸(EDTA)作為國際血液學標準化委員會(ICSH)推薦的抗凝劑，在臨床上獲得認可，已得到廣泛的應用。但臨床有報道稱EDTA可誘導血小板(PLT)聚集，使PLT的計數假性減低，即臨床所診斷的EDTA依賴性假性PLT減少癥(EDTA-PTCP)[1]，嚴重影響PLT計數的準確性。EDTA-PTCP發病率較低，約為0.1%，臨床主要表現為重型假性PLT減少癥，但患者并無出血現象[2]。在平時工作中，如果檢驗工作者沒有引起足夠重視，或是由于經驗不足，此種PLT假性減低很容易被認為PLT減少癥，造成臨床的誤診，給患者診斷帶來嚴重影響。本院檢驗科近期發現1例在乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)作用下，PLT出現聚集的情況，采用枸櫞酸鈉和肝素重新抽血檢測，仍發現有少量聚集，因臨床少有報道，現總結如下，以供各臨床醫生和檢驗工作者參考。

1資料與方法

1.1一般資料患者女，53歲。近半年因進食量少、頭暈、全身乏力、面色蒼白來院就診。查血常規：白細胞(WBC)6.2×109/L，紅細胞(RBC) 2.8×1012/L，血紅蛋白(Hb) 80 g/L，PLT 26×109/L，門診擬診斷為缺鐵性貧血，入住本院血液科。患者既往無出血史，當地查血常規，取指尖末梢血，均未發現有PLT計數減少。凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(FIB)(109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝)均在正常參考范圍內。查體：全身皮膚黏膜無黃染，無皮疹分布、無出血點分布、鼻腔及牙齦無滲血。

1.2檢測儀器血常規檢測儀器為Sysmex XE-2100五分類血細胞分析儀，試劑為Sysmex原裝試劑；推片機Sysmex SP1000i；染液為瑞-姬氏染液，由珠海貝索生物技術有限公司提供；閱片機為Cellavision DM96；采血管使用EDTA-K2血常規管，瀏陽市三力醫用品有限公司生產。

2結果

在血常規檢測中發現在EDTA抗凝狀態下有

大量PLT聚集，改用枸櫞酸鈉及肝素進行重新抽血檢測仍發現有PLT聚集現象。

圖1　　EDTA抗凝發現有大量PLT聚集

圖2　　枸櫞酸鈉抗凝發現PLT聚集

圖3　　肝素抗凝仍發現PLT聚集

血常規檢測結果顯示RBC、WBC及相關參數基本在正常范圍內。PLT計數26×109/L，因平均PLT體積(MPV)、PLT體積分布寬度(PDW)、大PLT(P-LCR)比例、PLT比容未出結果，PLT直方圖呈不規則鋸齒狀。符合本科室復檢條件，則使用Sysmex SP1000i進行推片，Cellavision DM96進行閱片，發現有大量PLT聚集。見圖1。采用枸櫞酸鈉及肝素進行重新抽血檢測，PLT計數分別為102×109/L、110×109/L，結果雖已在正常參考范圍內，PLT直方圖仍呈不規則的鋸齒狀，遂推片、染色、閱片。見圖2～3。

3討論

EDTA因其對外周血WBC、RBC形態影響小，同時可與血液中的凝血因子Ⅳ(鈣離子)形成螯合物，阻止血液凝固，ICSH推薦其為血細胞計數首選抗凝劑，已成為臨床使用最多的一種抗凝劑。

EDTA可引起EDTA-PTCP,在國內已多有報道，但由于目前全自動血細胞分析儀計數PLT的工作原理多為經典的電阻抗法,即不同大小的血細胞通過阻抗回路會產生不同的電脈沖，儀器根據脈沖多少及脈沖大小來計算血細胞個數及細胞體積大小,致使在EDTA-PTCP狀態下，部分聚集的PLT不能通過儀器檢測微孔，而通過儀器檢測微孔的PLT聚集塊易被誤認為有核細胞和RBC，導致PLT計數的假性減低及WBC計數的假性升高。

目前,認為EDTA-PTCP產生機制為EDTA作為抗凝劑可誘導PLT膜上糖蛋白的暴露，而暴露的糖蛋白會與嗜異性抗體反應，引起PLT的聚集[3]。隨著有些學者對PLT功能的進一步研究,發現在自身免疫性疾病、心血管疾病、感染及妊娠時，EDTA-PTCP的發生率會有所增加[4]，相應科室應給予重視。實際工作中當遇到EDTA-PTCP時，常用的解決方案為：(1)選用其他抗凝劑(枸櫞酸鈉及肝素)重新進行抽血檢測。(2)如果其他抗凝劑仍有聚集現象,應嚴格按照全國臨床檢驗操作規程，使用1%草酸銨溶液手工法計數PLT或進行末梢血的血常規分析進行驗證[5]。但如果重新抽血檢測的結果達到正常參考范圍，便認為該EDTA-PTCP患者PLT計數準確，不再懷疑枸櫞酸鈉及肝素抗凝血中仍會出現PLT聚集現象。近期本科室發現1例患者對枸櫞酸鈉及肝素也發生了聚集反應。本室的解決方法為：(1)如果枸櫞酸鈉及肝素抗凝血中PLT計數滿足患者手術條件，在報告單備注仍有少量PLT聚集,已給醫生簡單提示。(2)如果臨床需要患者的PLT的準確數值，即按照全國臨床檢驗操作規程，使用1%草酸銨溶液手工法計數PLT,或采用末梢血在血細胞分析儀上計數。臨床上雖然少有報道，但不容忽視，而其引起PLT聚集的機制尚不清楚，此案例是特殊現象，還是一種普遍存在，而又未被發現的情況有待進一步證實。所以，有必要考慮多種因素的影響，例如抽血是否規范、抗凝管、抗凝劑的抗凝效力(濃度)，以及患者其他的病理或生理因素等。如果有條件，可進一步查看患者臨床資料及其他實驗室的檢測結果，回顧該病例檢測前的治療、診斷等混雜因素以查找原因。筆者在此只是列舉此現象產生的可能原因，而其真正產生機制還有待各檢驗工作者的進一步探討。

綜上所述，臨床中PLT計數存在很多的影響因素，因此在全自動血細胞分析儀出現“PLT Clumps？”報警或是PLT直方圖呈不規則的鋸齒狀時應按照《國際血液學41條復檢規則》[6]進行推片，瑞氏染色以排除PLT聚集引起的PIL假性減低，盡可能提供更加準確的PLT計數，避免引起臨床的誤診、誤治。

參考文獻

[1]宓慶梅.EDTA依賴性假性血小板減少癥一例[J]．中華檢驗醫學雜志，2004，27(10):719.

[2]齊云曉.EDTA依賴性假性血小板減少癥2例[J]．檢驗醫學與臨床，2015，12(5):719-720.

[3]鄭軍.EDTA依賴性假性血小板減少癥血小板表面糖蛋白活化的研究[J]．中國血液流變學雜志，2007,17(3)：481-482.

[4]Isik A,Balcik OS,Akdeniz D,et al.Relationship between some clinical situtions,autoantibodies,and pseudothrombocytopenia[J].Clin Appl Thromb Hemost,2012,18(6):645-649.

[5]王威.多種抗凝條件下血小板假性減少1例報道[J]．國際檢驗醫學雜志，2014，35(21):3006-3007.

[6]XE-2100血細胞分析復檢標準制定協作組.Sysmex XE-2100自動血細胞分析和白細胞分類的復檢規則探討[J]．中華檢驗醫學雜志，2008，31(2):752-757.

(收稿日期：2015-11-08)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.03.072

文獻標識碼：C

文章編號：1673-4130(2016)03-0432-02