江蘇、安徽等地3株水禽大腸桿菌的藥敏試驗(yàn)

秦淑美

中圖分類號(hào)：S858.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1673-1085（2015）06-0033-02

摘要：水禽的各年齡段都易感大腸桿菌病，給水禽的養(yǎng)殖造成很大的損失。檢測(cè)病死水禽分離到的大腸桿菌對(duì)自制的藥敏試紙的敏感性，找出合理預(yù)防和控制大腸桿菌病的敏感藥物。

關(guān)鍵詞：水禽源大腸桿菌；藥敏；診治

水禽大腸桿菌病是水禽感染致病性大腸桿菌引起的一種急性或慢性的細(xì)菌性傳染病。水禽感染大腸桿菌后，由于其年齡、抵抗力以及大腸桿菌的致病力、感染途徑等不同因素，會(huì)產(chǎn)生許多癥狀和病變不同的病。如急性敗血癥、氣囊炎、肝周炎、心包炎、卵黃性腹膜炎、輸卵管炎、眼炎、關(guān)節(jié)炎、肉芽腫。大腸桿菌病的病原由某些血清型的大腸桿菌所致，雛鵝有O1、O2、O6等血清型，雛鴨有O78、O8、O7、O73、O19等血清型，產(chǎn)蛋鵝有O2K39、O2K1、O39等血清型。

筆者采取3株來(lái)自江蘇、安徽等地的雛鵝、雛鴨的心血及纖維素性滲出物、母鵝的變性卵泡等作為被檢病料分離到大腸桿菌，通過(guò)對(duì)自制的藥敏試紙敏感性檢測(cè)，找到科學(xué)防治水禽大腸桿菌的藥物。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 病料 ①江蘇姜堰10日齡鵝，肝腫大，有纖維素性滲出，腹腔中有未被吸收的卵黃；②安徽合田種鵝，患病死亡的母鵝卵黃性腹膜炎，凝固蛋白，輸卵管里黃色纖維素性滲出物；③江蘇揚(yáng)州15日齡鴨，肝腫大，有包膜，易剝離，有不凝心血，關(guān)節(jié)紅腫。

1.1.2 藥敏試驗(yàn)培養(yǎng)基 營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血瓊脂平板、麥康凱平板培養(yǎng)基。

1.1.3 自制藥敏試紙 分別為1-林可霉素（15mg/片）、2-慶大霉素（2mg/片）、3-卡那霉素（12.5mg/片）、4-環(huán)丙沙星（2mg/片）、5-復(fù)方磺胺嘧啶（10mg/片）、6-強(qiáng)力霉素（5mg/片）、7-復(fù)方甲氧嘧啶（10mg/片）、8-鏈霉素（2000單位/片）、9-氟哌酸（1mg/片）、10-氟苯尼考（15mg/片）。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌分離 1#：姜堰雛鵝：無(wú)菌取肝、纖維素性滲出物接種血瓊脂平板和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、麥康凱培養(yǎng)基，37℃有氧培養(yǎng)。

2#：安徽合田種鵝：無(wú)菌取變性卵泡接種血瓊脂平板和普通瓊脂平板、麥康凱平板培養(yǎng)基。37℃有氧培養(yǎng)。

3#：揚(yáng)州雛鴨：無(wú)菌取肝、腦、關(guān)節(jié)，接種血瓊脂平板，37℃，5%CO2厭氧培養(yǎng)和有氧培養(yǎng)24h后，厭氧培養(yǎng)和有氧培養(yǎng)都形成灰白色單個(gè)菌落，挑取單個(gè)菌落重新劃線麥康凱培養(yǎng)基，24h形成紅色菌落。

1.2.2 染色鏡檢 分離到的細(xì)菌挑取單個(gè)菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢。

1.2.3 細(xì)菌生化鑒定 根據(jù)細(xì)菌的培養(yǎng)特征、染色形態(tài)特征，挑取單個(gè)菌落接種大腸桿菌微量生化鑒定管，置37℃恒溫箱培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。能夠分解葡萄糖和甘露醇，產(chǎn)酸；分解阿拉伯糖、木膠糖、鼠李糖、麥芽糖、乳糖；不分解側(cè)金盞花醇和肌醇；能產(chǎn)生靛基質(zhì)，不產(chǎn)生尿素酶和硫化氫。符合上述生化反應(yīng)的，確定為大腸桿菌。

1.2.4 血清學(xué)鑒定 將被檢菌株的培養(yǎng)物分成2份，一份經(jīng)121℃高壓蒸汽加溫2h，破壞K抗原，一份加0.5%福爾馬林搖勻后37℃放置24h。分別用各種單因子抗O血清和抗OK血清對(duì)處理后的兩份菌液作凝集試驗(yàn)。如該菌株含有K抗原，則各種抗O血清不能使經(jīng)福爾馬林處理的菌液凝集，但可被各種抗OK血清中的一種凝集。經(jīng)高壓蒸汽加熱的菌液可被一種單因子抗O血清所凝集。

1.2.5 藥敏試驗(yàn) 將分離到的大腸桿菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。挑取適量細(xì)菌培養(yǎng)物，以劃線方式將細(xì)菌涂布到營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上。將含有定量抗菌藥物的試紙片貼在已接種了細(xì)菌的瓊脂表面上，37℃，培養(yǎng)24h。抑菌圈的大小反映出細(xì)菌對(duì)藥物的敏感程度。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離 三組病料均分離到灰白色、濕潤(rùn)、光滑、不溶血、邊緣整齊、麥康凱培養(yǎng)基呈紅色菌落、鏡檢均為G-桿菌。

2.2 這3株細(xì)菌經(jīng)鑒定均為大腸桿菌。

2.3 分離到的細(xì)菌血清型為O6、O39、O19。

2.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果 見(jiàn)表1。

這3株來(lái)自不同日齡的鵝和鴨，有著不同的血清型的大腸桿菌，對(duì)藥物的敏感性大不同，但它們同時(shí)對(duì)氨基苷類的慶大霉素、卡那霉素高敏感。1#姜堰雛鵝株還對(duì)鏈霉素高敏感，2#合田種鵝株還對(duì)氟苯尼考高敏感，3#揚(yáng)州雛鴨還對(duì)環(huán)丙沙星和5-復(fù)方磺胺嘧啶高敏感。

3 治療

根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，給出如下治療方案：

3.1 姜堰雛鵝，建議養(yǎng)殖戶挑出有癥狀病鵝，隔離飼養(yǎng)，肌肉注射慶大霉素2mg/kg·w，每日2次，連用3d。

3.2 合田種鵝，挑出病重的母鵝淘汰。癥狀較輕的母鵝，隔離飼養(yǎng)，肌肉注射慶大霉素3mg/kg·w。每日2次，連用5d。檢查公鵝的陰莖，有腫大、在不同部位有膿性或干酪樣結(jié)節(jié)的，淘汰。

姜堰雛鵝和合田種鵝群中其它無(wú)癥狀的鵝，飼料中添加林可霉素，每只禽3.0mg/kg或飲水17mg/kg進(jìn)行預(yù)防。

3.3 揚(yáng)州雛鴨，癥狀明顯的治療同姜堰雛鵝。其它鴨飼料或飲水中添加環(huán)丙沙星，1g藥粉加入5kg飼料，或1g藥粉加入10kg水進(jìn)行預(yù)防。

這三群鵝和鴨，經(jīng)過(guò)治療，3d后病情得到控制。禽群中不再出現(xiàn)死亡病例。7d后，鵝群及鴨群恢復(fù)原有的采食量，精神狀況良好。

4 體會(huì)

大腸桿菌是動(dòng)物腸道中的常在菌，10%～15%的大腸桿菌屬于有致病力的血清型。水禽場(chǎng)衛(wèi)生條件差、地面潮濕、舍內(nèi)通風(fēng)不良、氨氣味大、飼養(yǎng)密度過(guò)高等易誘發(fā)本病。初生雛禽的感染是由于種蛋被傳染，因此，應(yīng)注意育雛期保溫及飼養(yǎng)密度，改善通風(fēng)，降低灰塵，勤于除糞，減少氨氣的含量；禽舍、孵化器及用具經(jīng)常清潔和消毒。

禽群中發(fā)現(xiàn)發(fā)病或死亡的禽只，應(yīng)及時(shí)細(xì)菌分離，進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，找出該菌較敏感的幾種藥，添加到飼料和飲水中，會(huì)取得較理想的效果。但是，有時(shí)也會(huì)出現(xiàn)藥敏試驗(yàn)很敏感的藥，而實(shí)際應(yīng)用效果很差，這時(shí)就要更換敏感藥，找到最有效的治療藥物。

由于養(yǎng)殖過(guò)程中不科學(xué)、盲目濫用抗菌藥，致使疾病發(fā)生后，對(duì)治療藥物的選擇就顯得困難，特別是長(zhǎng)時(shí)間飼養(yǎng)的場(chǎng)地，只能選擇不常用的藥物治療，若藥物不敏感有效，不僅造成了藥物的浪費(fèi)，而且還延誤了病情，給養(yǎng)殖戶造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，在養(yǎng)殖水禽的過(guò)程中，科學(xué)合理用敏感藥物預(yù)防，對(duì)控制大腸桿菌病非常重要。endprint