廉江市育齡期婦女AsAb、EmAb和AcAb抗體陽性率調查

黃存敏，李艷艷，姚林伶

(廉江市人民醫院檢驗科，廣東 廉江 524400)

廉江市育齡期婦女AsAb、EmAb和AcAb抗體陽性率調查

黃存敏，李艷艷，姚林伶

(廉江市人民醫院檢驗科，廣東 廉江 524400)

目的 調查廉江市育齡期婦女抗精子抗體(AsAb)、抗子宮內膜抗體（EmAb）和抗心磷脂抗體（AcAb）陽性率，并比較兩種檢測方法的可靠性。方法分別以斑點免疫滲濾試驗法（DIGFA）與酶聯免疫吸附法（ELISA）檢測2013年2月至2015年2月于我院行婚前檢查的500例廉江市育齡期未生育婦女的AsAb、EmAb和AcAb情況，并比較兩種檢測方法的敏感度、特異度、符合度和重復率。結果廉江市育齡期婦女AsAb、EmAb、AcAb的ELISA法檢測陽性率分別為2.0%、3.8%、1.6%，而DIGFA法檢測陽性率分別為2.4%、4.6%、1.8%。DIGFA法檢測3種抗體相對于ELISA法的敏感度為87.5%～90.0%，特異度為98.8%～99.6%，符合度為98.4%～99.4%，差異均無統計學意義(P＞0.05)；DIGFA法的日間重復性為100.0%，明顯高于ELISA法的94.0%，差異具有統計學意義(P＜0.05)。結論廉江市育齡期婦女的3種抗體陽性率較低，DIGFA法檢測結果與ELISA檢測結果相當，但DIGFA法的穩定性要高于ELISA法，且其具有簡便、快捷的特點，其在免疫性不孕的流行病學調查中具有重要的臨床推廣價值。

廉江市；育齡期婦女；斑點免疫滲濾試驗；酶聯免疫吸附法；抗精子抗體；抗子宮內膜抗體；抗心磷脂抗體

不育不孕是人類共同關注的生殖問題，其在給患者和家屬帶來了沉重的經濟和精神負擔的同時，還嚴重影響社會的穩定。研究表明，30%以上的不育不孕與免疫性抗體有關，其中抗精子抗體(AsAb)、抗子宮內膜抗體(EmAb)、抗心磷脂抗體(AcAb)是最重要的檢測指標[1-2]。酶聯免疫吸附法(ELISA)是臨床抗體檢測中的常用方法，但其檢測相對繁瑣且易受干擾；而斑點免疫滲濾試驗法(DIGFA)具有檢測速度快且準確率高的特點，因而在臨床上的應用日益增多[3-4]。因此，本文分別以DIGFA法和ELSIA法對廉江市育齡期婦女AsAb、EmAb和AcAb抗體陽性率進行調查，并比較兩種檢測方法的敏感度、特異度、符合度和重復率，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年2月至2015年2月于我院行婚前檢測的500例廉江市育齡期未生育婦女，平均年齡(24.3±4.8)歲。采集所有患者空腹靜脈血5 mL，離心后分離血清，避光凍存于-20℃冰箱備用。

1.2 檢測方法 (1)DIGFA法和ELISA法檢測：對所有樣本血清中的AsAb、EmAb、AcAb抗體及其滴度分別以ELISA試劑盒(購自深圳市賽爾生物技術有限公司)和DIGFA試劑盒(購自三明市藍波生物技術研究所)進行檢測，所有檢測操作均嚴格按照試劑盒說明書進行各步操作，并設置陰陽性對照及空白對照；(2)重復性試驗：分別抽取ELISA法檢測陽性和陰性結果各5例，在1 d內以ELISA法和DIGFA法各檢測5次，考察兩種檢測方法的日內重復性，同時在5 d內每天以ELISA法和DIGFA法各檢測1次，考察兩種檢測方法的日間重復性。DIGFA法檢測相對于ELISA法檢測的敏感度=DIGFA(+)/ELISA(+)×100%；特異度= DIGFA(-)/ELISA(-)×100%；符合度=(DIGFA=ELISA)/總例數×100%；日內和日間重復性均以5次檢測均一致為重復，并除以總例數計算重復率(%)。

1.3 統計學方法 應用SPSS19.0統計軟件進行數據分析，計數資料以百分比進行描述，兩兩比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 免疫性不孕的流行病學調查 AsAb、EmAb、AcAb的DIGFA法和ELISA法檢測結果見表1。DIGFA法檢測的陽性率稍高于ELISA法檢測，但差異均無統計學意義(P＞0.05)。

表1 AsAb、EmAb、AcAb的DIGFA法和ELISA法檢測結果[例（%）]

2.2 兩種檢測方法檢測AsAb、EmAb、AcAb的結果比較 AsAb、EmAb、AcAb的ELISA法和DIGFA法檢測結果比較見表2。DIGFA法檢測與ELISA法檢測相比，AsAb的敏感度為90.0%，特異度為99.4%，符合度為99.2%；EmAb的敏感度為89.5%，特異度為98.8%，符合度為98.4%；AcAb的敏感度為87.5%，特異度為99.6%，符合度為99.4%；兩種檢測方法在3種抗體檢測中的敏感度、特異度、符合度比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。

表2 AsAb、EmAb、AcAb的ELISA法和DIGFA法檢測結果比較（例）

2.3 兩種檢測方法的重復性 兩種檢測方法在日內各重復檢測5次，結果均一致，日內重復率均為100.0%。在持續5 d的日間重復性考察中，ELISA法檢測中3種抗體檢測結果共出現3次不一致，DIGFA法檢測結果均一致，DIGFA檢測的日間重復性(100.0%)高于ELISA檢測(94.0%)，差異具有統計學意義(χ2= 4.167，P＜0.05)。

3 討 論

近年來，原因不明的不孕癥中免疫性不孕所占比例不斷升高，開展免疫性不孕的流行病學調查的重要性日益增加[5]。當前，已有大量研究表明免疫性抗體與不孕不育之間具有明顯的相關性。馬興璇等[6]以ELISA檢測對569例不明原因不孕患者血清中5種免疫性抗體AsAb、EmAb、AcAb、抗卵巢抗體(AoAb)、抗透明帶抗體(ZpAb)進行了檢測，結果表明不明原因不孕患者血清中5種抗體的陽性率均在40%以上，總陽性率高達87.6%，均顯著高于正常生育的育齡婦女。趙芳芳等[7]以ELISA法檢測對復發性流產與自身免疫性抗體的相關性研究也表明，流產婦女自身免疫性抗體水平顯著高于正常生育的育齡婦女，以ELISA法檢測包含AsAb、EmAb、AcAb在內的5種自身免疫性抗體的檢測對復發性流產的臨床診治具有重要的指導意義。但我院檢驗科既往檢測結果提示ELISA法檢測上述抗體存在一定的局限性，其原因主要在于ELSIA法檢測操作過程自動化程度較低，易受環境和人為因素的影響，檢測步驟繁雜、耗時長[8]。而DIGFA法檢測耗時具有簡便、快速、準確無污染的優點，整個檢測過程僅需數分鐘，是新一代的抗體快速篩查手段[9]。

在本研究中，AsAb、EmAb、AcAb的ELISA法檢測陽性率分別為2.0%、3.8%、1.6%，而DIGFA法檢測陽性率分別為2.4%、4.6%、1.8%，兩種檢測方法結果相當，差異均無統計學意義(P＞0.05)。說明廉江市育齡期婦女的3種抗體陽性率較低，與上述研究結果具有可比性，且ELISA法和DIGFA法都能有效地對免疫性不孕的流行病學調查進行調查[10-11]。在兩種檢測方法的對比結果結果中，DIGFA法檢測AsAb、EmAb、AcAb相對于ELISA法的敏感度為87.5%～90.0%，特異度為98.8%～99.6%，符合度為98.4%～99.4%，兩種檢測方法的3種抗體比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)。以上結果表明DIGFA檢測具有很好的敏感度和特異度，能有效完成ELISA法抗體檢測的項目，與李相新等[10]以DIGFA法檢測AsAb、馬興璇等[6]以DIGFA法檢測EmAb的結果一致。在兩種方法的重復性上，日內重復性均為100.0%，而DIGFA法的日間重復性為100.0%，明顯高于ELISA法的94.0%，差異具有統計學意義(P＜0.05)，說明DIGFA法的穩定性要高于ELISA法。

綜上所述，廉江市育齡期婦女的3種抗體陽性率較低，DIGFA法檢測AsAb、EmAb、AcAb結果與ELISA法檢測結果相當。但DIGFA法的穩定性要高于ELISA法，且其操作簡便、快捷，其在免疫性不孕的流行病學調查中具有重要的臨床推廣價值。

[1]陳兆芳,邊靜.不孕不育患者血清中相關抗體檢測臨床研究[J].臨床合理用藥雜志,2012,5(5):106-107.

[2]馬興璇,生淑亭,韋麗麗,等.不明原因不孕患者血清抗精子抗體和抗透明帶抗體檢測結果研究[J].中國婦幼保健,2015,30(1): 94-95.

[3]Eamsobhana P,Gan X X,Ma A,et al.Dot immunogold filtration assay(DIGFA)for the rapid detection of specific antibodies against the rat lungworm Angiostrongylus cantonensis(Nematoda:Metastrongyloidea)using purified 31-kDa antigen[J].Journal of Helminthology, 2014,88(4):396-401.

[4]陳長強,楊晶,顧志冬,等.斑點免疫金滲濾法定量測定血清淀粉樣蛋白A方法的建立及性能評估[J].檢驗醫學,2013,28(9):835-840.

[5]趙成元,王麗,王華,等.免疫性不孕抗體陽性引發不孕癥的臨床診治分析[J].中國婦幼保健,2013,28(28):4681-4682.

[6]馬興璇,生淑亭,韋麗麗,等.569例不明原因不孕患者血清中五種免疫性抗體聯合檢測結果分析[J].海南醫學,2015,26(6):919-920.

[7]趙芳芳,蔣曉莉,郭誼,等.復發性流產與自身免疫性抗體的相關性研究[J].中國醫藥,2013,8(11):1619-1620.

[8]裘紅梅,宋光,于增國,等.抗精子抗體檢測診斷不孕癥的臨床價值[J].大連大學學報,2006,27(2):88-90.

[9]李濤,程立慶,陳兵.斑點金免疫滲濾法聯合檢測糖尿病自身抗體的研究[J].免疫學雜志,2014,30(1):70-74.

[10]李相新,李凱,楊運霞,等.斑點免疫金滲濾技術檢測抗精子抗體的實驗研究[J].中華男科學雜志,2015,21(8):760-762.

[11]Dehghannezhad A,Paknejad M,Rasaee MJ,et al.Development of a nanogold-based immunochromatographic assay for detection of morphine in urine using the Amor-HK16 monoclonal antibody[J].Hybridoma,2012,31(6):411-416.

Investigation on the positive rate of AsAb,EmAb and AcAb antibody in women of childbearing age in Lianjiang.

HUANG Cun-min,LI Yan-yan,YAO Lin-ling.Department of Clinical Laboratory,Lianjiang People's Hospital,Lianjiang 524400,Guangdong,CHINA

Objective To investigate positive rate of anti-sperm antibody(AsAb),anti-uterine endometrial antibody(EMAb)and anti-cardiolipin antibody(AcAb)in women of childbearing age Lianjiang City,and to compare the reliability of dot immunogold filtration test method(DIGFA)and enzyme-linked immunosorbent adsorption method (ELISA).MethodsA total of 500 cases of women of childbearing age with AcAb,EmAb and AsAb level in Lianjiang city in our hospital from February 2013 to February 2015 were detected by DIGFA and ELISA.The sensitivity,specificity,in line with the degree and repetition rate of the detection method were compared.ResultsThe positive rates of As-Ab,EmAb,ELISA of women of childbearing age in Lianjiang city detected by ELISA were 2.0%,3.8%,1.6%,and the positive rates detected by DIGFA were 2.4%,4.6%,1.8%.The sensitivity of the DIGFA method for detecting 3 kinds of antibodies with respect to the ELISA method was 87.5%～90.0%,the specificity was 87.5%～90.0%,and the coincidence degree was 98.4%～99.4%,with no statistically significant difference(P＞0.05).The day repeatability(100.0%)of DIGFA method was significantly higher than that of ELISA(94.0%),and the difference was statistically significant(P＜0.05).ConclusionThe positive rate of 3 kinds of antibodies in women of childbearing age in Lianjiang city was low.The results of DIGFA method and ELISA method are quite comparative,but the stability of DIGFA method is higher than that of ELISA method and its operation is simple and quick,which has an important value in the epidemiological investigation of immune infertility.

Lianjiang City;Women of childbearing age;Dot immunogold filtration assay(DIGFA);Enzyme linked immunosorbent adsorption(ELISA);Anti-sperm antibody(AsAb);Anti-endometrial antibody(EmAb);Anti-cardiolipin antibody(AcAb)

R195

A

1003—6350（2016）14—2258—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.008

2016-03-28)

廣東省廉江市2013年度科技計劃項目（編號：2013B01330）

黃存敏。E-mail：cunminhh@126.com