200例乙型肝炎感染者的HBV耐藥分析

趙軻

200例乙型肝炎感染者的HBV耐藥分析

趙軻

目的研究分析醫院內使用核苷(酸)類藥物抗病毒治療乙型肝炎患者體內乙型肝炎病毒(HBV)基因耐藥位點變異情況。方法采用焦磷酸測序法分別對100例經核苷(酸)類藥物治療1年以上的患者和100例未使用過核苷(酸)類藥物治療的HBV攜帶者進行HBV-DNA P基因區9個NAS相關耐藥突變位點進行檢測,分析其耐藥變異檢出率并回顧性分析不同核苷(酸)類藥物的耐藥突變形式,分析HBV逆轉錄酶基因變異的發生率。結果100例HBV攜帶患者中檢出5例出現耐藥變異,占5%；100例乙型肝炎患者中檢出52例耐藥變異,占52%,檢測結果顯示乙型肝炎患者的耐藥檢測陽性率明顯高于HBV攜帶患者(P<0.05)。所檢測出的耐藥圖表位點有rtM250V/L、rtN236T、rtA181V/T、rtM/V207I、rtS202G、rtM204I/V、rtT184A/L、rtL180M。所檢出的57例耐藥變異當中,其中有8個位點上的耐藥變異檢出率各不相同,重要的原發性耐藥位點的rtM204的檢出率最高,高達60%,剩下位點的檢出率分別為rtL180(23/57),rtA181(18/57),rtN236(2/57),rtT184(1/57),rtS202(1/57),rtM250(1/57),rtM/V207(11/57)。結論隨著乙型肝炎患者治療時間的延長,HBV耐藥又越來越高的情況,52例HBV基因耐藥變異的檢出率與患者的性別、年齡、病毒基因型均無明顯相關。臨床醫生應根據實驗室檢測結果合理應用核苷(酸)類藥物。

乙型肝炎；核苷(酸)類藥物；耐藥變異

在為慢性乙型肝炎患者開展治療的過程中,國際防治指南建議使用閬中抗病毒治療方法,其中一種是應用聚乙二醇干擾素α-2a、α-2b或普通干擾素開展治療；另外一種是應用核苷酸類與核苷類藥物開展治療,拉米夫定在為患者開展治療的過程中出現了耐藥變異,之后關于病毒基因型與耐藥位點的研究越來越多,并且還有研究調查結果發現沒有應用過核苷類藥物治療的HBV感染患者體內存在著一定的耐藥位點［1］。本文通過開展相關研究主要是為了對經過核苷類藥物治療的慢性乙型肝炎患者及HBV攜帶者的耐藥位點檢出情況開展分析,以便于對檢出率與患者年齡、性別等因素之間的關系開展分析,為臨床用藥提供參考。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月～2016年5月來本院治療的已確診為慢性乙型肝炎的100例患者(均口服拉米夫定、阿德福韋酯、替比夫定、恩替卡韋單藥、聯合或者序貫治療1年以上)和門診100例HBV攜帶者(未展開藥物治療)。100例慢性乙型肝炎患者診斷符合2010年版《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標準,同時排除其他病因所致肝損害。其中男120例,女80例,年齡15～60歲。

1.2 儀器與試劑 儀器使用美國ABI7500熒光定量PCR分析儀,應用PCR熒光檢測法開展HNV-DNA的提取與檢測,檢測過程中所應用的試劑由深圳匹基生物工程有限公司提供,在實際的開展操作的過程中,應該嚴格依據說明書上的相關說明開展操作,應用Hot Start PCR法擴增DNA開展HBV多位點耐藥基因檢測。

1.3 方法 采用焦磷酸測序法分別對100例經核苷(酸)類藥物治療1年以上的乙型肝炎患者和100例未使用過核苷(酸)類藥物治療的HBV攜帶者進行HBV-DNA P基因區9個NAS相關耐藥突變位點進行檢測,分析其耐藥變異檢出率并回顧性分析不同核苷(酸)類藥物的耐藥突變形式,分析HBV逆轉錄酶基因變異的發生率。

1.4 統計學方法 采用SPSS17.0統計學軟件對數據進行統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

100例HBV攜帶患者中檢出5例出現耐藥變異,占5%；100例乙型肝炎患者中檢出52例耐藥變異,占52%,檢測結果顯示乙型肝炎患者的耐藥檢測陽性率明顯高于HBV攜帶患者(P<0.05)。見表1。所檢測出的耐藥圖表位點有 rtM250V/L、rtN236T、rtA181V/T、rtM/V207I、rtS202G、rtM204I/V、rtT184A/L、rtL180M。所檢出的57例耐藥變異當中,其中有8個位點上的耐藥變異檢出率各不相同,重要的原發性耐藥位點的rtM204的檢出率最高,高達60%,剩下位點的檢出率分別為rtL180(23/57),rtA181(18/57),rtN236(2/57),rtT184(1/57),rtS202(1/57),rtM250(1/57),rtM/V207(11/57)。

表1 100例HBV攜帶者和100例乙型肝炎患者耐藥檢測結果比較(n,%)

3 討論

HBV病毒變異的幾率非常高,即使患者沒有開展相應的治療,與耐藥變異相關的幾個突變位點的病毒品種或者是變異病毒都已經存在,若患者還沒有開展核苷類藥物的治療,在受到核苷治療患者體內變異病毒的傳播之后,也有可能會出現耐藥變異,在當前已有的文獻報道當中,沒有經過核苷酸類及核苷類藥物治療的人群的耐藥變異的檢出率在3%～27%［2］。

本次研究中,已經能夠確認從未應用核苷酸類及核苷類藥物開展治療的患者也存在HBV變異,有研究調查項目在為患者開展基線耐藥變異檢測之后再為患者應用相關治療方案開展治療,發現能夠有效提升其臨床治療效果,并且能夠降低其耐藥的發生率。已有文獻報道V173L、L80V、L180M是對HBV復制具有促進作用的單個突變位點,其中最為常見的是應用拉米夫定開展治療之后所產生的突變形式［3］。沒有應用藥物治療的患者各種耐藥位點的檢出率為5%,這與有關文獻中所報道的自然發生率一致［4］。

在實際的開展治療過程中,導致患者出現耐藥性的因素多種多樣,其中比較常見的有：耐藥后序貫治療、長期應用NAs、初始藥物選擇不當等。因此,在實際的為患者開展治療的過程中,建議長期應用NAs類藥物、更換藥物或者是初始治療的患者,都應該開展基因耐藥檢測,依據患者的臨床特點及用藥史,為其合理選擇相應的抗病毒藥物。

［1］林菲,姚貝,胥婕,等.153例慢性HBV感染者核苷和核苷酸類藥物的耐藥變異位點分析.臨床肝膽病雜志,2014,30(3): 269-271.

［2］薛彩花,吳瑋,安俊麗,等.987例乙型肝炎患者HBV-DNA P區多位點耐藥突變分析及臨床意義.胃腸病學和肝病學雜志2014,23(10):1187-1190.

［3］劉淑榮,趙文靜,劉薇,等.313例經核苷酸類似物治療的慢性乙型肝炎患者HBV 基因型及耐藥變異分析.世界最新醫學信息文摘,2015,15(11):3-4.

［4］劉妍,王春梅,紀冬,等.1121例慢性乙型肝炎患者HBV反轉錄酶區的耐藥突變分析(英文).解放軍醫學雜志,2009,34(6): 659-662.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.20.098

2016-09-19］

454000 焦作市第三人民醫院