全自動酶免儀不同洗板方式對結核抗體檢測結果的影響

張淑英 裴景亮 張玉芝 伊正君

全自動酶免儀不同洗板方式對結核抗體檢測結果的影響

張淑英 裴景亮 張玉芝 伊正君

目的評價不同的洗滌參數對全自動酶免儀檢測結核抗體的影響。方法120例結核患者采用全自動酶免儀,選擇4、5、6次不同洗滌次數,10、30、60 s不同清洗震蕩時間,20、40、60 s不同浸泡時間,進行結核抗體的酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測,觀察比較檢測結果。結果洗滌5次陽性似然比(PLR)、尤登指數(YI)高于洗滌4次的水平(P＜0.05)。振蕩30 s的方法在靈敏度、特異性、陽性預測值(PPV)、陰性預測值(NPV)、PLR、YI方面的診斷效能高于振蕩10 s的方法(P＜0.05)；在PPV和PLR的診斷效能方面高于振蕩60 s的方法(P＜0.05)。浸泡40 s的方法在靈敏度、NPV、PLR、陰性似然比(NLR)、YI方面的診斷效能高于浸泡20、60 s時(P＜0.05)。結論建立洗滌液系統的標準化程序可以提高檢測方法的靈敏度、特異性和準確性。

高通量分析；酶聯免疫吸附試驗；標準化；結核抗體

本研究采用的試劑利用基因工程技術克隆表達致病性結核分枝桿菌7種結核特異性表位抗原［1,2］,研究高通量ELISA檢測系統檢測結核抗體試驗過程中洗滌方式對結核抗體檢測結果的影響。現將研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取山東省濰坊市第二人民醫院2013年5月～2014年2月結核科門診及住院的120例結核患者,均符合2001年中華醫學會結核病學分會制定的肺結核診斷標準。

隨機選擇168例健康體檢人員。

1.2儀器與試劑 采用煙臺Addcare ELISA500全自動酶免儀,試劑采用榮盛公司結核抗體檢測試劑,批號: 20130824。

1.3血清標本收集 清晨空腹肘靜脈血4 ml,3000 r/min離心10 min分離血清,血清分裝后-80℃保存,備用。

1.4研究方法 選擇4、5、6次不同洗滌次數,10、30、60 s不同清洗震蕩時間,20、40、60 s不同浸泡時間［1］,進行結核抗體的ELISA檢測,觀察對最終檢測結果的影響,評價不同因素對靈敏度、特異性、PPV、NPV、PLR、NLR、YI的影響。

1.5統計學方法 采用SPSS21.0統計學軟件對數據進行統計分析。計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1不同洗滌次數對結核抗體檢測的影響 洗滌5次時PLR和YI高于洗滌4次的水平(P＜0.05)；洗滌5次各項與洗滌6次比較,差異均無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

2.2不同振蕩時間對結核抗體檢測的影響 振蕩30 s的方法在靈敏度、特異性、PPV、NPV、PLR、YI方面的診斷效能高于振蕩10 s的方法(P＜0.05)；在PPV和PLR方面的診斷效能高于振蕩60 s的方法(P＜0.05)。見表2。

2.3不同浸泡時間對結核抗體檢測的影響 浸泡40 s的方法在靈敏度、NPV、PLR、NLR、YI方面的診斷效能高于其他浸泡時間(P＜0.05)。見表3。

表1 不同洗滌次數對檢驗效能的影響

表2 不同振蕩時間對結核抗體檢測的影響

表3 不同浸泡時間對結核抗體檢測的影響

3 小結

有研究證實,結核分枝桿菌的特異性分泌蛋白的抗體檢測對結核病的診斷具有重要意義［2,3］,利用基因工程技術將結核分枝桿菌的多種分泌蛋白制成融合蛋白,利用ELISA技術檢測血清中對應的抗體可用于不同類型結核病的診斷。

本文研究結果證實,建立的洗滌液系統的標準化程序可以提高檢測方法的靈敏度、特異性和準確性。

［1］黃紹梅,邱薇,許柳清,等.蛋白芯片法檢測結核抗體在兒童結核病中的診斷價值.廣東醫學,2012,33(16):2421-2422.

［2］黃勝,余繼英,趙春艷,等.膠體金法檢測結核抗體的臨床價值探討.臨床肺科雜志,2014,19(6):1058-1060.

［3］林偉靈.結核患者結核抗體、血沉以及C-反應蛋白檢測的臨床分析.中國醫藥導報,2012,9(31):55-56.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.08.024

2015-06-18］

261041 山東省濰坊市第二人民醫院(張淑英)；山東省濰坊醫學院附屬醫院(裴景亮 張玉芝伊正君)