凍融胚胎和凍融囊胚移植對分娩結局影響的比較

張雪

凍融胚胎和凍融囊胚移植對分娩結局影響的比較

張雪

目的探討分析凍融囊胚移植對分娩結局的影響。方法比較1 715例凍融胚胎移植和228例冷凍囊胚移植后兩組胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率、早產率、新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒發生情況。結果B組患者的胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率均優于A組（均P＜0.05），兩組新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒情況比較差異無統計學意義（均P＞0.05）。結論凍融囊胚移植技術是可以提高胚胎種植率，降低妊娠率、異位妊娠率，能夠改善后期妊娠結局。

凍融囊胚；凍融胚胎；移植；分娩結局

1983年自從首例冷凍胚胎移植獲得圓滿成功以來，凍融胚胎技術得以迅速傳播和發展，目前凍融胚胎技術已經逐漸成為我們人類輔助生殖技術中的一個重要技術[1]。胚胎的解凍移植技術可以解決因卵巢過度刺激綜合癥、子宮內膜異常等高風險不能進行自行移植的胚胎問題。此種技術不僅可以減少移植胚胎數目，還能增加積累妊娠率[2]。近些年，隨著序貫培養技術的發展，凍融囊胚技術逐漸發展，人類已使囊胚培養和移植成為可能。凍融囊胚移植可以實現胚胎發育和子宮內膜的同步，能夠提供一個更加接近子宮的著床環境，可以大大提高胚胎種植率和臨床妊娠率，同時還能限制移植囊胚數目，既可以得到高的累積妊娠率，又能降低相關母嬰并發癥的發生率[3]。本研究通過對1 715例凍融胚胎移植和228例凍融囊胚移植病例的回顧性分析，以探討凍融胚胎和凍融囊胚對移植周期和分娩結局的影響。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2014年7月～2016年7月由我院生殖醫學研究中心收治的1 715例凍融胚胎移植和228例凍融囊胚移植患者；將1 715例凍融胚胎移植患者定為A組，228例凍融囊胚移植患者定為B組；回顧性分析兩組患者的臨床資料以及產后資料；其中A組年齡22～36歲，平均（28.5±5.7）歲；B組年齡23～35歲，平均（29.5±4.8）歲；本研究納入標準：（1）兩組患者均采用長方案控制性超促排卵；（2）患者的年齡均在38周歲以內；兩組間患者的不孕年限、年齡、子宮內膜厚度、基礎性激素水平以及體質量指數（BMI）等資料比較差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 胚胎及囊胚的評分 依據胚胎的卵裂球數目和碎片比例將第3 d的卵裂期胚胎分為4個等級[4]：Ⅰ級（碎片比例在5%以內），Ⅱ級（碎片比例5%～20%），Ⅲ級（碎片比例20%～50%），Ⅳ級（碎片比例在50%以上）；優質胚胎定義為6/Ⅱ級以上；囊胚分級依據文獻[5-6]，優質囊胚定義為3BB（囊腔完全占據胚胎的總體積，內細胞團數量少，排列松散，滋養層細胞少，結構松散。）以上；依據知情同意原則，選取患者第3 d，剩余3枚以上5/Ⅲ級胚胎進行囊胚培養，并對第5 d 3BC（囊腔完全占據胚胎的總體積，內細胞團數量少，排列松散，滋養層細胞稀疏，大細胞少。）或3CB（囊腔完全占據胚胎的總體積，內細胞團數量很少，滋養層細胞稀疏，結構松散。）以上囊胚和第3 d優質胚胎進行冷凍；囊胚及卵裂期胚胎均使用玻璃化冷凍法，其中囊胚在冷凍前進行激光打孔人工皺縮。

1.2.2 胚胎及囊胚的冷凍與復蘇移植 囊胚和胚胎的冷凍采用玻璃化冷凍方法：在常溫下（25 ℃左右）將囊胚和胚胎轉移至BS平衡液（胚胎冷凍緩沖液）中2 min，然后再轉移至ES平衡液（胚胎冷凍平衡液）中8 min，當保護劑進入胚胎后，使其恢復至原體積大小，再將其轉移至VS液（胚胎冷凍液）中1 min，并在30 s內從VS液中轉移至冷凍載體，最后迅速侵入液氮內保存。Ⅲ級及以上的囊胚在冷凍前行激光打孔人工皺縮。復蘇時將囊胚和胚胎從液氮取出，浸入TS（解凍液）平衡液中3 min，然后轉移至DS（稀釋液）平衡液中3 min以及WS（清洗液）平衡液中5 min，最后轉移至囊胚培養液內。凍融胚胎存活細胞數目在1/2以上定義為存活，并培養2 h后進行移植。

1.3 觀察指標

凍融胚胎和凍融囊胚的妊娠結局：胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率、早產率；新生兒狀況：新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩組患者胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率、早產率比較

B組患者的胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率、早產率分別為 19.7%（45/228）、50.9%（116/228）、1.1%（26/228）、20.6%（47/228）， 均 優 于 A組 的 39.7%（680/1 715）、30.0%（514/1 715）、4.6%（79/1 715）、21.1%（362/1 715），差異均具有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組患者胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率、早產率比較

2.2 兩組新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒情況比較

B組新生兒缺陷率、男女比例、死胎率、巨大兒率分別為0.9% （2/228）、1.19%（124/104）、0.0%（0/228）、1.3%（3/228），均與A組0.6%（10/1 715）、1.06%（881/834）、0.0%（0/1 715）、1.2% （20/1 715）比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表2。

表2 兩組新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒情況比較

3 討論

囊胚與胚胎的冷凍保存是人類輔助生殖必要且高效的技術。在體外將囊胚與胚胎冷凍保存，并通過合理的限制胚胎移植數目（3個以內），不僅能顯著降低多胎妊娠和分娩的發生[7]，還可以為出現流產、想要二胎、首次移植失敗等情況的患者提供再移植的機會，同時還能大大降低卵巢過度刺激綜合征的發生[8]。

目前階段在輔助生殖領域廣泛使用的低溫冷凍技術主要包括慢速冷凍和玻璃化冷凍兩種。玻璃化冷凍技術是指使用一種高濃度的冷凍保護劑實現快速降溫，在快速降溫使溶液變得十分堅固、粘稠，從而形成玻璃樣物質以減少或避免細胞內冰晶的形成，進而降低冰晶給細胞帶來的損傷[9-10]。與慢速冷凍技術相比，玻璃化冷凍技術主要有以下優點：（1）操作簡單、費用低、耗時短；（2）效果好，胚胎存活率高；（3）無冰晶形成，對細胞損傷小。

自然狀態下早期胚胎首先在輸卵管中停留發育，當到達囊胚期時才開始進入宮腔著床。對于一些不孕不育患者，可在體外利用囊胚培養技術先行囊胚培養，等囊胚形成后再人工將其植入子宮腔內進行著床，從而使胚胎發育和子宮內膜趨于同步。同時隨著輔助生殖技術的不斷發展，在體外發現染色體異常或發育潛能差的胚胎后，可在其發育到囊胚之前便使其停止發育。這種體外的囊胚期胚胎培養移植的應用可以幫助我們進一步篩選發育潛能優質的胚胎，從而可以提高或改善后期的妊娠結局。

本研究結果顯示，B組患者的胚胎種植率、妊娠率、異位妊娠率均優于A組，提示凍融囊胚移植技術是可以改善后期妊娠結局的。同時我們又對比分析了兩組新生兒情況，結果顯示兩組新生兒缺陷、男女比例、死胎、巨大兒情況比較差異并無明顯區別。總之，凍融囊胚移植技術是可以提高胚胎種植率，降低妊娠率、異位妊娠率，能夠改善后期妊娠結局。

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Comparison of Effects of Frozen Thawed Embryos and Frozen Thawed Blastocysts on Delivery Outcome

ZHANG Xue Reproductive Medicine Center, Xuzhou Maternal and Child Health Care, Xuzhou Jiangsu 221000, China

ObjectiveTo investigate the analysis of the influence of the freeze-thaw blastocyst transplant outcome for delivery.Methods1 715 cases of frozen thawed embryo transplantation and 228 cases of the two groups after transplantation of frozen blastocysts implantation rate, pregnancy rate, ectopic pregnancy rate, premature birth, birth defects, the proportion of men and women, stillbirth, fetal macrosomia incidence.ResultsIn group B patients grow rate and pregnancy rate of embryo, ectopic pregnancy rate were better than that of group A (P＜0.05), two groups of birth defects, the sex ratio, stillbirth, macrosomia situation compare diferences and no signifcant diference (P＞0.05).ConclusionFreeze-thaw blastocyst transplant technology is can increase the rate of embryo planting, decrease the rate of pregnancy, ectopic pregnancy rate, can improve the late pregnancy outcomes, has a certain use value.

Freeze-thaw blastocyst, Freezing and thawing embryo, Transplantation, Delivery outcomes

R714.8

A

1674-9308（2016）36-0081-03

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.36.044

徐州市婦幼保健院生殖醫學中心，江蘇 徐州 221000