袁志蕓青海省海南州畜牧獸醫(yī)工作站 813000
一例牛偽狂犬病和巴氏桿菌混合感染的診治
袁志蕓
青海省海南州畜牧獸醫(yī)工作站813000
牛偽狂犬病是由豬皰疹病毒Ⅰ型引起的傳染病,雖然呈散發(fā)流行,但是由于目前沒有特效治療方法,病死率幾乎為100%,給養(yǎng)牛業(yè)造成很大的經(jīng)濟(jì)損失,所以加強(qiáng)對(duì)牛偽狂犬病的防制尤為重要[1-2]。牛巴氏桿菌病又叫牛出血性敗血癥,是由多殺性巴氏桿菌引起的一種急性、熱性傳染病。該菌常在健康牛的上呼吸道中存在,以敗血癥和組織器官的出血性炎癥為特征,表現(xiàn)為患畜高燒、肺炎、急性胃腸炎及內(nèi)臟器官廣泛出血。牛巴氏桿菌病一般呈散發(fā)性流行,一年四季均可發(fā)病,潛伏期短,傳播迅速,致死率高。當(dāng)牛群受應(yīng)激等因素刺激導(dǎo)致免疫力降低時(shí)可發(fā)生內(nèi)源性感染,造成重大的經(jīng)濟(jì)損失。
2015年3月下旬某牛場(chǎng)母牛精神沉郁,食欲不振,鼻鏡干燥,發(fā)病初期體溫升高達(dá)41~42℃,但是溫度很快降至常溫或更低。病牛摩擦鼻鏡或面部,不斷用蹄子搔癢,或者在地面上摩擦肛門或陰戶,出現(xiàn)犬坐姿勢(shì),出現(xiàn)偽狂犬病毒特有的“奇癢”癥狀。病牛流涎,唾液增多,流膿性鼻液,咳嗽,呼吸困難。患牛出現(xiàn)腹瀉、嘔吐,排粥狀稀糞,個(gè)別可見便中帶有血絲。個(gè)別病牛神經(jīng)系統(tǒng)紊亂,表現(xiàn)如磨齒、眼球震顫、四肢劃動(dòng)和后足踏地等神經(jīng)癥狀。單純注射鏈霉素、土霉素和安乃近后治療無效,發(fā)病3天后出現(xiàn)死亡。
剖檢死亡的病牛,主要見胃內(nèi)充滿食糜,腸道鼓氣;肝臟腫大,有少量白色壞死灶和出血點(diǎn);雙側(cè)肺發(fā)生肉變,質(zhì)地堅(jiān)硬,胸腔內(nèi)有大量滲出液,漿膜出血,扁桃體水腫充血,喉頭黏膜充血、水腫;小腸黏膜充血,腸壁變薄、水腫;腦膜表面充血、出血,并見有少量腦脊液滲出。
(1)細(xì)菌的分離鑒定。無菌采集部分病死牛的肝臟和肺臟組織,涂片后分別進(jìn)行革蘭氏、堿性美蘭和瑞氏染色,然后鏡檢。可見革蘭氏陰性短小桿菌,美藍(lán)和瑞氏染色均見兩極濃染的短桿菌,無鞭毛,也不形成芽孢。病料在血液瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)24小時(shí)后長(zhǎng)出淡灰白色、表面光滑濕潤(rùn)、露珠樣的小菌落,無溶血現(xiàn)象。而在麥康凱培養(yǎng)基上沒有細(xì)菌生長(zhǎng)。
(2)細(xì)菌的生化鑒定。本實(shí)驗(yàn)分離的細(xì)菌接種于生化反應(yīng)管可以發(fā)酵葡萄糖、甘露醇和蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣,乳糖、枸櫞酸、麥芽糖發(fā)酵試驗(yàn)、尿素酶、VP試驗(yàn)和甲基紅試驗(yàn)均為陰性,可形成靛基質(zhì),氧化酶試驗(yàn)呈陽性,液化明膠,能產(chǎn)生硫化氫。根據(jù)其生化特性,可以確定細(xì)菌為巴氏桿菌。
(1)病毒的分離。取處理過的病料濾液0.5mL接種于處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的單層PK細(xì)胞,培養(yǎng)48小時(shí)后觀察細(xì)胞病變,發(fā)現(xiàn)部分細(xì)胞圓縮、脫落,有些細(xì)胞融合形成全胞體,呈典型的細(xì)胞病變。對(duì)照組仍呈均一的單層細(xì)胞。
(2)乳膠凝集試驗(yàn)。待檢牛血清經(jīng)華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物疫病檢測(cè)中心用偽狂犬病乳膠凝集診斷試劑盒檢測(cè),牛待檢血清與乳膠抗原反應(yīng)產(chǎn)生顆粒狀,凝集聚于邊緣,液體呈明顯凝集反應(yīng),結(jié)果為陽性(++),對(duì)照為陰性。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果,結(jié)合臨床癥狀和病理剖檢變化及動(dòng)物接種回歸實(shí)驗(yàn),確診此疫病為牛偽狂犬病與多殺性巴氏桿菌病混合感染,及時(shí)對(duì)養(yǎng)牛場(chǎng)該疾病進(jìn)行綜合防控。預(yù)防免疫和早期鑒別診斷是有效防制牛偽狂犬病的關(guān)鍵。
(1)治療。對(duì)發(fā)病牛用病毒靈、氟苯尼考等抗病毒和抗感染藥治療,同時(shí)給予5%葡萄糖、氟苯尼考和黃芪多糖飲水,配合復(fù)方青霉素和硫酸慶大霉素肌注進(jìn)行抗感染治療,連用5~7天。及時(shí)隔離病牛,同時(shí)圈舍和環(huán)境用2%的NaOH全面消毒,用1%百毒殺噴霧消毒。及時(shí)處理死亡的病牛,對(duì)牛群進(jìn)行強(qiáng)制性緊急免疫接種,用偽狂犬病活疫苗對(duì)健康羊進(jìn)行免疫。
(2)防控。PRV屬于高度潛伏感染的病毒,可引起持續(xù)性感染,牛豬混養(yǎng)是引起牛偽狂犬病發(fā)生的原因之一。防止牛偽狂犬病的發(fā)生和流行,必須先凈化豬的偽狂犬病。因此養(yǎng)殖場(chǎng)要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,盡量堅(jiān)持自繁自養(yǎng),對(duì)新引進(jìn)的牛只嚴(yán)格檢疫,防止帶入偽狂犬病毒。對(duì)牛場(chǎng)圈舍做好衛(wèi)生消毒工作,要用合適的消毒液定期嚴(yán)格消毒,對(duì)同圈的牛和與豬混牧的牛進(jìn)行偽狂犬病的免疫注射工作,并禁止貓和狗進(jìn)入牛場(chǎng),避免帶入傳染源;一旦發(fā)病,必須對(duì)患畜進(jìn)行撲殺隔離,嚴(yán)格無害化處理,防止疫情擴(kuò)散,盡可能把損失降至最小。
[1]殷震,李景華.動(dòng)物病毒學(xué)[M].第2版.北京:科學(xué)出版社,1997:329-340.
[2]郭起繡,沈艷麗,李桂蘭.牛、羊偽狂犬病的血清學(xué)調(diào)查[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊,2008(3)::34.