黃桂美
乳糜血對血細胞分析儀測定結果的影響及處理
黃桂美
乳糜血又稱脂血,是多種因素造成的血液脂肪暫時性升高。乳糜微粒的存在,會直接影響血細胞分析的比色結果,從而干擾血紅蛋白含量的測定,導致血細胞分析失去意義。為進一步了解乳糜血的發生原因和其對血細胞分析結果的影響,本文對現已發表的相關文獻進行回顧,旨在為臨床檢驗提供指導,力求檢驗能夠展示更為準確的結果,使血細胞分析參考價值更高、更為可靠。
乳糜血;血細胞分析儀;測定結果
乳糜血(chylemia)或脂血(lipidemia)是由脂類代謝異常、淋巴管阻塞等因素造成,進食大量高脂肪類食物可以造成血液中的血脂暫時性升高。當去除血細胞后,肉眼可見血清或血漿出現均勻的乳白色渾濁。血細胞分析是臨床上常見的檢驗方式,也是疾病篩查、輔助診斷的重要參考。使用一定量的溶血劑溶解標本中的紅細胞,釋放出血紅蛋白。而血紅蛋白在不同波長下吸光度有所差異,可以根據顯色來確定血紅蛋白的含量。近年來,隨著醫療技術的不斷發展,本研究發現乳糜血標本的檢測結果普遍存在差異,乳糜微粒會直接影響最終的比色結果,從而干擾血紅蛋白含量的測定[1]。本研究對現已發表的相關文獻進行回顧,全面分析引發乳糜血的原因、乳糜血對血細胞分析結果產生的影響及臨床上如何處理,旨在為臨床檢驗提供指導,力求檢驗能夠展示更為準確的結果,使血細胞分析參考價值更高、更為可靠。詳細報道如下。
臨床上引起乳糜血的原因復雜多樣,大多與飲食因素有關。相關文獻報道,獻血員中飲食因素造成的乳糜血獻血占0.2%~0.5%,這與獻血員食用油炸食品、動物脂肪、巧克力等密切相關。其次,乳糜血液可能系某種疾病治療輸注脂肪乳所致[2]。再者,臨床上少數患者患有高乳糜微粒血癥(hyperchylomicronemia),屬于一種常染色體隱性遺傳病,血三酰甘油、膽固醇指標增高,低密度脂蛋白、高密度脂蛋白均偏低,極低低迷脂蛋白膽固醇輕度增高,肝外組織脂蛋白脂肪酶活性缺陷,使進入血液的乳糜微粒不能經脂肪組織正常代謝,從而乳糜微粒在血液中潴留。再者,高脂血癥、急性胰腺炎等基本也能夠促進血液乳糜微粒增加。
血細胞分析儀在臨床廣泛應用已有一段歷史,對相當一部分疾病的篩查、診斷起著重要的作用。其原理是利用溶血劑溶解紅細胞,釋放出血紅蛋白。特定的波長下測定溶液吸光度的方法來測定血紅蛋白,溶液顏色與血紅蛋白含量成正比,比色測定法原理遵循朗伯——比爾定律。隨著技術的日趨成熟,不少學者發現很多因素都會影響血細胞分析儀的計數參數,特別是在某些病理因素的影響下。相關報道指出,乳糜血會對放射免疫測定、凝血實驗、生化實驗、血脂和血流變學檢查等項目均有明顯的影響[3]。乳糜血對血細胞計數分析儀的影響幅度是不等的,這與出現乳糜現象的程度不同有關。蔣素珍等[4]證實,當在被檢測的溶液中乳糜微粒濃度過高,溶液則會變得更渾濁,此時比色結果必將出現錯誤。同樣的,在血常規檢驗中乳糜血也會影響檢驗結果,尤其是全自動血細胞分析儀和抗靜脈血時,影響幅度更大。
鑒于乳糜血的以上特征,臨床對于此類標本的處理就顯得尤為重要。張時民等[5]指出,首先對血常規中的MCH、MCHC等參數進行觀察,判定肉眼不易發現的乳糜血后,再采用血漿置換的方法處理乳糜血標本,每份標本置換3次,用血細胞分析儀重新測定,將結果與位置換前樣本進行比較,同時也對每次置換間的結果進行統計分析。乳糜血可造成HGB、MCH、MCHC三項指標明顯升高,在乳糜血狀態下測定的結果與其實際值有顯著性差異。血漿置換能夠明顯改善乳糜血對血常規測定的影響,為臨床提供正確的血常規分析結果。流式細胞術和電阻抗原理的血細胞分析儀對于檢測環境和成分相對固定的正常血液細胞進行分類計數,達到了一定的準確性,在實際工作中,經常發現有些病理因素會對儀器產生一些影響。特別是檢測乳糜血標本、黃疸標本、冷藏集標本,細胞不分類或分類但散點圖明顯異常,導致檢測結果不準確。由于血細胞分析是根據容量、電導、光散射(VCS)技術對血細胞進行分析、檢測,并非純粹參照細胞形態而進行監測。由此可知,無論所應用的器械技術性多么先進,檢測靈敏度如何,最終結果都會受到環境因素、理化因素的干擾。大量的數據表明,乳糜血患者的血清標本中,所含膽紅素的水平會明顯升高,與正常者有統計學差異。再者,乳糜血患者的丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、血糖GLU含量等也明顯高于健康人群[6]。但是,乳糜組血清中尿素氮水平與血清成分相近。也就是說,BUN不太受乳糜血的影響。本研究懷疑,這一結果系乳糜血與所使用的化學試劑發生反應造成。因乳糜顆粒廣泛分布在反應液中,隨著顆粒密度的增加,光路系統的吸光值開始提示,最終引發是丙氨酸轉移酶、血糖濃度等一系列指標的升高。
那么如何處理血清標本,最終得到一個科學性強、準確度高的檢測結果是臨床一直探討的話題,也是該領域研究的重點。臨床上乳糜血標本的出現難以避免,因此恰當的處理方式對最終結果起著決定性的作用。有學者指出,乳糜血標本的WBC、HGB及PLT檢測結果受到明顯影響,如對乳糜血標本進行血漿置換,則能夠明顯改善乳糜血標本血細胞分析儀的檢測結果,以為臨床提供可靠的參考指標[7]。值得一提的是,血漿置換方式可以改善全自動細胞分析儀對血紅蛋白的檢測結果,減少乳糜血對血紅蛋白測定結果的干擾[8]。當然,處理對乳糜標本處理可以校準檢驗結果,也可應用實驗室的軟件系統對準確值進行計算。王康椿等[9]收集了100份肉眼可見脂濁的EDTAK2抗凝全血標本,分別對以上標本和經立新出來的乳糜微粒血漿,用BC-5300全自動血細胞分析儀全血模式測定HBG,得出相應的數據。再對每份標本兩次測定的血紅蛋白值進行計算,最終得出校準后的HBG合MCH值。在該研究中,王康椿等得出校準后血紅蛋白=原標本血紅蛋白值-[乳糜血漿測得的血紅蛋白值/(1-原標本HCT值)];MCH值=(HBG×100)/RBC這兩項共識計算的乳糜血漿HBG可以準確消除乳糜微粒對儀器測定結果的影響,并能夠不同程度的準確校正。實際中,乳糜血標本放置時間的不同,其最終所測定的結構也會出現相應的波動。有報道證實,健康的血標本在室溫下放置不同的時間,及乳糜血標本處理前后,血細胞監測結果中WBC、PLT及RBC計數基本不會有太大的變化。但在室溫下,放置2h以后的監測結果表明,乳糜血對白細胞分析類NEU(%)、LY(%)、MO(%)的結果又影響。因此,建議檢驗中心在血液標本采集后室溫放置2h以內進行測定。對于白細胞分類計數受到影響這一問題,可采取血細胞稀釋、洗滌加血漿等量的稀釋液稀釋后再測定[10]。目前,諸多學者指出,測定儀器也是造成檢測結果產生差異的一大因素[11-12]。以德國西門子Dade Thrombin Reagent試劑對比,該儀器及試劑的精密度高,結果可靠。但在我國,很大一部分醫院出于成本的考慮,而采用國產試劑,盡管這一方案適合在臨床上推廣,但對檢測結果的影響難以預估,有待于更進一步的驗證[13]。
隨著人們生活水平的不斷改善,高脂血癥的發生率也逐漸上升。流行病學調查顯示,高三酰甘油患者占據了高脂血癥人群的大部。實驗室檢查發現,當血清三酰甘油超過3.0mmol/L時,血清可出現不同程度的渾濁,直接影響監測結果,致使血細胞分析結果失去價值[14-15]。目前臨床上并沒有一套完整的乳糜血標本處理方式,學者眾說紛紜。本研究對以往的文獻進行回顧性分析,深入了解乳糜血的發生原因和其對血細胞分析結果的影響,并收集不同學者對乳糜血標本的方式并進行整理,旨在為血清處理方式提供指導,力求檢驗能夠展示更為精確的結果,提高血細胞分析結果的科學性和參考價值。
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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.9.009
廣西 531400 平果縣人民醫院 (黃桂美)