色譜技術在藥物分析中的應用

于　雪　辛瑩娟　蔣　緒

（咸陽職業技術學院，陜西　咸陽　712000）

色譜技術在藥物分析中的應用

于雪辛瑩娟蔣緒

（咸陽職業技術學院，陜西咸陽712000）

藥物的質量直接關系著藥品的有效性和安全性，手性藥物的質量檢測成了藥物質量控制的最有效的方法。其中，色譜技術是藥品分離、分析檢測的有效手段，比較常用的是高效液相色譜技術和毛細管電泳技術。基于此，介紹兩種色譜技術的應用，在一維液相色譜技術的基礎上闡述二維液相色譜技術及其兩種模式。

藥物分析；高效液相色譜；毛細管電泳；二維液相色譜

藥物從根本上來說是一種商品，但其是一種特殊的商品。藥品質量的好壞直接關系到人的生命安全及藥物的有效性，所以對藥品質量的控制有比其他商品更嚴格的標準。因此，要利用各種手段和方法對其質量進行分析檢測，以控制和提高藥物的質量。藥物分析在藥品生產和制造中起著決定性的作用，這也使得藥物分析成了一種專門的學科。

研究表明，在目前存在的所有藥物中，至少有50%的藥物含有一個不對稱中心，有的含有多個。在這些藥物中，非天然性的藥物，經過人工合成的手性藥，如阻斷劑、局部麻醉藥物及部分抗癲痛藥等都以其外消旋體供藥用。在人工合成的藥物經消化系統進入人體的循環后，由于酶、受體、蛋白質將手性藥物分解成2種不同的化合物來進行處理，因而同一種手性藥物對映體會產生不同的藥理作用，同時也有不同的代謝途徑，也有一些手性藥物會在映體內發生轉化，這也就是為什么藥物能治療頑疾也能產生副作用的主要原因［1］。

1　常用的色譜技術

目前，世界上大多數國家的藥品管理部門在審批新的手性藥物時，會要求提供對手性藥物的每一種成分對映體的各種研究資料，包括藥理學、藥動學、毒理學等多個方面。傳統的分離方法靈敏度和重現性欠佳，隨著色譜學的發展，再加上分析儀器技術的不斷進步，人們發現用色譜是較為有效的分離分析方法。目前用在藥物分析檢測上的主要有2種常見的色譜技術，一種是高效液相色譜技術，一種是毛細管色譜技術。

1.1高效液相色譜技術

色譜是現代化學常用的分析、分離技術。最早發展起來的是氣相色譜技術，氣相色譜技術主要利用物質的揮發性進行檢測。但是，已知的化合物中有70%是非揮發性物質，因此氣相色譜技術的應用具有一定的局限性。高效液相色譜相對于氣相色譜來說，具有分離分析速度快、適用性更廣泛等特點，對大多數的沸點高、分子較大、熱穩定性能較差的化合物來說，高效液相色譜分析比較實用且分析效果好，目前已成為藥品分析檢測非常重要的方法。

普通高效液相色譜分析技術雖然適用性強、效率高，但是也存在著缺陷，由于液相色譜的填料相對單一，分離只能針對某種物質來進行，很難通過簡單的一次實驗將所有待檢測物質全部進行分離分析檢測，這也是今后如何對普通的高效液相色譜分析進行改進的地方。

1.2毛細管色譜技術

毛細管色譜技術是20世紀80年代初期，將傳統的電泳技術和色譜技術結合起來發展而成的一種新的分離技術，其操作方便，分離模式多樣化，效率和效果都較好，分離速度也較為迅速，最突出的優點是其試劑和樣品用量較少。其基本原理為將要分離的物質分解成離子或帶電粒子，在電場的作用下這些離子或帶電粒子在毛細管中按淌度或分配系數的不同進行分離，其有多種分離模式。

近年來，毛細管電泳技術在醫學方面得到了廣泛的應用，發展速度極快，很多國家將毛細管電泳技術用于分離測定藥品中雜質和異構體，成為了不少國家法定的藥品檢測方法。其在一定程度上比高效液相色譜分析法更有優勢，主要用于原料藥品中活性成分的檢定、離子測定、手性分離，還有對藥物成品性質的鑒定，如pKa值、溶解度值的測定等。

2　二維液相色譜技術及其兩種模式

2.1二維液相色譜技術概述

現代醫學的不斷發展，也促使了越來越多的手性藥物的產生。這些手性藥物相對以往，從種類和成分上都更為復雜。特別是隨著生物科技、蛋白組學、中西藥現代化研究的深入，普通的一維液相色譜技術已不能夠滿足要求，二維液相色譜技術的出現有力地推進了現代醫學中復雜體系成分分離的進一步發展［2］。Gidding指出二維液相色譜相對一維液相色譜具有更高的執行效率、更好的分離效果和更高的峰容量，對復雜分離體系的適用性更強［3］。二維液相色譜正逐漸取代一維液相色譜成為醫學分離技術色譜發展新的方向。

二維液相色譜采用多次分離的技術進行分析檢測，將不同的色譜連接起來，使得在一次色譜未分離的組分在接下來的第二維色譜中繼續進行分離，并不斷重復這個過程，直至所有的組分均分離。二維液相色譜是兩種分離模式的結合，是多種一維液相色譜的組合。二維液相色譜根據一維分離組分是否完全轉到二維中，分為中心切割模式和全二維液相色譜兩種模式。

2.2二維液相色譜技術的兩種模式

中心切割模式將一維中的組分有選擇的分到第二維進行分離檢測，這種做法可以有效減少外界的干擾，提高分離的純度。全二維液相色譜模式是將一維色譜柱操作后的全部組分完全轉入第二維進行分離，這樣雖有干擾，但可以獲得所有的組分信息，比較適合于復雜樣品的分離檢測工作。相對于一維分離檢測法來說，二維分離檢測可以大大提高樣品分離的純度，減少外界干擾，將樣品分離測定、濃縮凈化一次性處理，簡化了程序，同時減小了在分離檢測過程中樣品的損失和受污染的風險，在實際的分離過程中要針對樣品和分離純度的要求來選擇分離檢測方法。

二維液相色譜的中心切割模式和全二維分離模式，在實際分離過程中主要考慮以下幾個重要因素。一是流動相的兼容性。由于在做樣品分離檢測時，兩種模式的分離原理不同，這樣可以提供多種分離的選擇。但是，這兩種模式同時會造成溶劑系統的互斥，甚至有可能造成色譜柱損壞。所以，采取兼容的流動相是二維液相色譜模式選擇首要考慮的問題。二是分離速度的兼容性。二維分離是在第一維分離的基礎上進行的，如果第二維的分離速度慢，則第一維分離后的組分會在第二維分離的過程中重新混合，造成第一維分離工作的浪費。所以，要第一維和第二維的分離速度兼容，第二維的分離速度要高于第一維的分離速度才行。三是第一維和二維色譜洗脫強度的兼容性。當樣品經過第一維分離后進入第二維的分離流程，這個過程中組分在經過兩色譜柱之間的環線、檢測器的流程中很容易造成峰展寬，因此必須使第二維色譜的洗脫能力強于第一維。

3　結語

色譜技術在藥物檢測分離中起到非常大的作用，在實際的藥品檢測時要根據樣品性質、純度需求、分離需要來選擇相應的分離技術和模式。

［1］Ling Y S，Liang H J，Lin M H，et al.Two-dimensional LC-MS/MS to enhance cerarnide and phosphatidylcholine species profiling in mouse liver［J］.Biomed Chromatogr，2014 （9）：1284-1293.

［2］高輝，溫學森，馬小軍，等.二維液相色譜技術在藥物分析中的應用［J］.藥物分析雜志，2007（4）：616-620.

［3］陳靜，劉召金，戴振宇，等.適用于質譜分析的在線固相萃取除鹽方法［J］.色譜，2013（9）：894-897.

Application of Chromatography in Pharmaceutical Analysis

Yu XueXin YingjuanJiang Xu
（Xianyang Vocational and Technical College，Xianyang Shaanxi 712000）

The quality of the drug directly related to the effectiveness and safety of drugs，the quality of chiral drug testing has become the most effective method of drug quality control.Chromatography is an effective method for the separation and analysis of drugs.It is commonly used in high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis.Based on this，this paper introduced the application of two kinds of chromatographic techniques，and described the technology of two-dimensional liquid chromatography based on one dimensional liquid chromatography.

pharmaceutical analysis；high performance liquid chromatography；capillary electrophoresis；two-dimensional liquid chromatography

TQ460.7

A

1003-5168（2016）05-0132-02

2016-04-23

于雪（1984-），女，碩士，助教，研究方向：液相色譜、藥物蛋白相互作用。