早產兒B族鏈球菌帶菌情況研究

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早產兒B族鏈球菌帶菌情況研究

劉婉文

(廣東省佛山市南海區人民醫院, 廣東 佛山, 528200)

關鍵詞:早產兒; B族鏈球菌; 帶菌情況; 耐藥性

B族鏈球菌也稱為無乳鏈球菌，是β溶血性革蘭染色陽性鏈球菌中的一種，在細菌分類學上屬于芽孢桿菌綱、鏈球菌科，經常寄生于妊娠期女性的下消化道和泌尿生殖道[1]，是引起妊娠期女性及新生兒侵襲性感染的主要病原菌之一[2-5]。近年來，國內外對GBS進行了大量研究，對于GBS帶菌情況方面的研究，國內報道主要集中在孕產婦的帶菌情況，關于新生兒GBS的帶菌情及帶菌率鮮有報道[6]。本研究中作者選擇胎齡為28～37周的早產兒201例為研究對象，探討早產兒GBS帶菌情況、與產婦相關情況的關系及GBS的耐藥情況，為臨床合理用藥提供參考。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2014年6月—2015年7月入住佛山市南海區人民醫院生產的胎齡為28～37周的早產兒201例為研究對象，其中男106例，女95例；胎齡28～32周的92例，胎齡33～37周的為109例，平均胎齡33.4周；產婦年齡在23～46歲，平均年齡31.8歲；所有產婦均無明顯的全身性疾病。

1.2方法

1.2.1GBS培養實驗設計：早產兒出生后15 min內，使用COPAN eSWAP采集包分別于新生兒咽部、耳道部、臍根部、腋窩部和腹股溝部采集標本快速送檢；漩渦震蕩均勻后，用0.3 mL接種于增菌肉湯讓GBS增菌，待增菌肉湯變黃后采用改良GBS顯色血瓊脂，于5% CO2環境中培養，培養18～24 h后使用改良GBS顯色血瓊脂上挑取桔紅色菌落，進行快速識別篩選，生化鑒定后對GBS進行藥敏試驗。

1.2.2增菌肉湯備制方法：采用30 g的胰酪蛋白胨，15 g的磷酸氫二鉀，10 g的氯化鈉和16 mg的溴甲酚紫，加入蒸餾水至1 L, 將其pH值調至7.4后，將其置121 ℃的滅菌器內滅菌15 min后，加入15 g的葡萄糖，0.2 μg/mL的甲紫、15 μg/mL的萘啶酸、6 μg/mL的多黏菌素和50 mL的胎牛血清，混勻后制成增菌肉湯，將其分裝于2 mL的無菌管中，置于-20℃的環境中保存備用。

1.2.3改良GBS菌落顯色實驗方法：采用35 g的胰酪蛋白胨，20 g的未改性米淀粉，5 g的酵母浸膏，30 mL的馬血清，105 g的NaCl和20 g的l號瓊，加入蒸餾水使體積至1 L，將其pH值調為7.4，采用高壓滅菌后置于冰箱中保存備用，使用時需在厭氧環境、35 ℃環境溫度下培養8～18 h后觀察結果。

1.3觀察指標

① GBS陽性率: GBS培養液顏色由紫變黃或穿莉線周圍出現明顯桔紅色區者為陽性，陽性率=陽性例數/受檢患者數; ② 新生兒GBS帶菌情況與產婦相關情況的關系：產婦年齡、孕周、分娩方式、有無流產史、有無陰道炎癥、有無宮頸炎癥、有無菌尿癥、有無胎膜早破以及產婦產前體溫; ③ GBS的耐藥性：GBS菌株對慶大霉素、復方新諾明、頭孢呋辛、頭孢嘧啶、卡那霉素、青霉素、氨芐青霉素、阿莫西林、替卡西林以及苯哇青霉素的敏感性和耐藥性。

1.4統計學處理

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據處理，均以計數資料用%表示，χ2檢驗，以α=0.05為檢驗標準，當P<0.05為差異有統計學意義，說明該因素與早產兒GBS帶菌情況有明顯的相關性。

2結果

2.1本組早產兒GBS帶菌情況

本研究201例早產兒中，GBS陽性的30例，陽性率14.93%(30/201)；菌株直徑3～4 mm，主要為Ⅲ型和Ⅰa型菌株，分別占56.67%(17/30)和26.67%(8/30)，其他如Ⅰb/c型、Ⅱ型、Ⅳ型、Ⅴ型等菌株共5株，占16.67%(5/30)。

2.2早產兒GBS帶菌與產婦相關情況的關系

帶GBS早產兒與產婦流產史、陰道炎癥、宮頸炎癥、菌尿癥有明顯的相關性，與產婦年齡、孕周、分娩方式、胎膜早破無明顯的相關性，見表1。

表1　早產兒GBS帶菌與產婦相關情況的關系

與同一指標的另一項比較，*P<0.05。

2.3本組30株GBS菌株藥敏試驗結果

對檢出的30株GBS菌藥敏試驗結果顯示, GBS菌株對青霉素和氨芐青霉素高度敏感，敏感性均為100%；其次為頭孢嘧啶(96.67%)和頭孢呋辛(93.33%); GBS菌株對苯哇青霉素的耐藥性最高，為93.33%，其次為慶大霉素和卡那霉素，分別為86.67%和73.33%。見表2。

表2　本組30株GBS菌株藥敏試驗結果[n(%)]

3討論

B族鏈球菌(GBS)是人類致病菌之一。這一觀點早在1938年Fry在報告中就有所提及，他報告了3例感染GBS引起產后內膜炎的死亡病例。經過國內外學者[7-9]多年的研究，GBS是人類致病菌的觀點得到進一步證實，可以引起新生兒敗血癥、新生兒腦膜炎、新生兒肺炎以及孕婦感染等。相關流行病學研究[10]顯示，有10%～30%的孕婦伴有GBS感染情況，而其中有40%～70%的孕婦在分娩過程中會將GBS傳遞給新生兒[11-12]。GBS作為芽孢桿菌綱、乳桿菌目下的鏈球菌屬，以妊娠期女性的下消化道和泌尿生殖道為主要的寄生場所，根據其表面表達的莢膜多糖(CPS)的特異性，可將其分為Ⅰa型、Ⅰb/c型、Ⅰa/c型、Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ性Ⅴ型和Ⅵ型等至少8種血清類型，而其中的Ia型和III型在人體感染中比較常見，是造成腦膜炎以及敗血癥的主要GBS菌型。GBS感染危害較大，如果不及時進行科學的治療，可能引起患者死亡[13]。

國內學者研究報告[14-15]顯示，妊娠孕婦GBS帶菌率在7.5%～13%。目前國內關于新生兒GBS帶菌情況方面的報告比較少，大多數學者都集中于研究妊娠期孕婦GBS帶菌情況。本研究顯示，201例早產兒中GBS陽性的30例，陽性率14.93%(其中菌株直徑約3～4 mm，主要為Ⅲ型和Ⅰa型菌株)，陽性率略高于國內相關報告。這可能與本研究中采用的增菌肉湯以及多部位聯合檢測有關。本研究中，作者按照胰酪蛋白胨: 磷酸氫二鉀: 氯化鈉: 溴甲酚紫=30 g∶15 g∶10 g∶16 mg的比例配制GBS增菌肉湯增菌，能一定程度上提高GBS檢出率，本配方在37 ℃孵育5 h前GBS培養液顏色顯示為紫色，5 h后由紫色變為黃色，為GBS陽性。實驗中作者在早產兒出生后15 min內于新生兒咽部、耳道部、臍根部、腋窩部和腹股溝部采集標本快速送檢，標本的及時采集與多部位聯合檢測無疑提高了檢測的陽性率[16-17]。

早產兒帶菌情況與產婦相關情況具有一定的相關性[18]。本研究中，產婦有流產史與無流產史、有陰道炎癥與無陰道炎癥、有宮頸炎與無宮頸炎、有菌尿癥與無菌尿癥早產兒GBS帶菌情況比較，χ2值分別為6.15、5.68、11.41、5.89(P均<0.05)，提示早產兒GBS帶菌與產婦流產史、陰道炎癥、宮頸炎癥、菌尿癥有明顯的相關性，有以上癥狀的早產兒GBS帶菌率高；產婦年齡38歲或38歲以上與38歲以下、孕周低于32周與高于32周、自然分娩與剖宮產、有胎膜早破與無胎膜早破情況早產兒GBS帶菌情況比較，χ2值分別為0.43、0.49、2.74、0.26(P均>0.05), 提示孕婦年齡、孕周、分娩方式、有無胎膜早破與早產兒GBS帶菌情況無明顯的相關性[19-20]。

近年來，隨著各種抗菌素的大量使用，GBS耐藥性有明顯的增高趨勢。有研究顯示，在美國及加拿大地區, 1998年GBS對紅霉素的耐藥性為7%, 到2001年上升到25%，到2003年已經上升到37%；而在中國東部沿海地區，GBS對紅霉素的耐藥性超過了40%, 對林可霉素的耐藥性也超過了25%。本研究中對檢出的30株GBS菌藥敏試驗結果顯示，GBS菌株對青霉素和氨芐青霉素高度敏感，敏感性均為100%，其次為頭孢嘧啶(96.67%)和頭孢呋辛(93.33%); GBS菌株對苯哇青霉素的耐藥性最高，為93.33%, 其次為慶大霉素和卡那霉素，分別為86.67%和73.33%。臨床上，對于早產兒GBS感染者，應該根據藥敏試驗合理使用抗生素，提高治療效果[21-22]。

綜上所述, GBS可能是該地區新生兒感染的重要致病菌，新生兒GBS帶菌與產婦的流產史、陰道炎癥、宮頸炎癥、菌尿癥有很大的相關性；采用增菌肉湯、多部位聯合檢測以及使用改良GBS菌落顯色實驗方法可以提高GBS檢出率。

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收稿日期:2015-09-16

中圖分類號:R 722.6

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2016)01-181-03

DOI:10.7619/jcmp.201601068